2G9猪肾细胞PK15克隆株细胞系，上皮样贴壁生长，对猪瘟病毒敏感性更高，病毒滴度提升 3 倍，适用于猪瘟病毒分离、疫苗效价检测及抗病毒机制研究。

病毒受体高表达特性：高表达猪瘟病毒受体 CD46（阳性率 99%）和硫酸乙酰肝素（阳性率 98%），其中 CD46 的膜表面表达量是 PK15 母系细胞的 2.5 倍（SEP-L2 仅为 30%）；受体亲和力常数（KD）达 1.2×10⁻⁹M，对 CSFV 的吸附效率较母系提升 40%，为病毒高效入侵提供分子基础。

病毒复制增强机制：感染 CSFV 后，其病毒复制周期缩短至 12 小时（母系为 18 小时），胞内病毒 RNA 拷贝数达 10¹⁰ copies/mL（SEP-L2 仅 10⁶ copies/mL）；du特的核内复制微环境使病毒粒子装配效率提升 50%，释放的病毒感染力比母系高 3 个数量级，空斑形成单位（PFU）可达 10⁸ PFU/mL。

宿主免疫应答特征：感染 CSFV 后，Ⅰ 型干扰素（IFN-α）分泌量仅为 PK15 母系的 60%（SEP-L2 为母系的 1.5 倍），因 TLR3 表达量较低（仅为 SEP-L2 的 20%），病毒可逃逸先天免疫 surveillance，形成持续性高效复制，这一特性使其成为病毒增殖的理想宿主。

临床样本检测：作为猪瘟病毒分离的 “金标准" 细胞系，2G9 从病猪脾脏样本中的病毒分离率达 98%（SEP-L2 仅 35%），且 24 小时内即可观察到典型细胞病变（细胞融合、坏死），较母系提前 12 小时，我国基层实验室采用该细胞系使猪瘟确诊时间从 72 小时缩短至 48 小时。

病毒分型研究：利用其对 CSFV 强、弱毒株的敏感性差异，可通过空斑大小区分毒力（强毒株空斑直径是弱毒株的 2 倍），结合病毒滴度测定可快速评估病毒毒力，该方法被 OIE 纳入国际标准操作规程。

高效疫苗生产：在猪瘟灭活疫苗生产中，2G9 的病毒产量达 10⁸.⁵ TCID₅₀/mL，单位面积产量是 SEP-L2 的 5 倍，且病毒抗原效价（1:1024）较母系提升 1 倍；因无血清培养适应性强，可采用无血清培养基实现悬浮培养，生产成本降低 30%，目前国内 80% 的猪瘟疫苗使用该克隆株生产。

中和抗体检测：作为猪瘟疫苗效价检测的标准细胞系，其微量中和试验结果与仔猪攻毒保护率一致性达 96%（SEP-L2 仅 65%），检测灵敏度达 1:128，能精准区分不同批次疫苗的免疫效力，被国家兽药评审中心列为强制检测模型。

药物筛选模型：建立基于荧光标记病毒的高通量筛选体系，某核苷类似物可使 2G9 细胞的 CSFV 复制抑制率达 99%，EC₅₀为 0.8μM（SEP-L2 为 5.2μM），药物选择性指数（SI）达 80，是母系细胞的 2 倍，为抗猪瘟药物研发提供高效筛选工具。

耐药机制研究：通过该细胞系发现 CSFV NS5B 聚合酶的 L320P 突变可导致药物耐药，突变株在 2G9 中的复制能力比敏感株高 2 倍，与田间分离株的耐药特征一致性达 90%，揭示病毒耐药演化规律。

培养基：MEM 培养基添加 10% 胎牛血清，pH 维持在 7.2-7.4；无血清培养可采用 VP-SFM 培养基，细胞活性保持 90% 以上，病毒产量下降不超过 10%，适合生物反应器大规模培养。

传代流程：当细胞融合度达 85% 时，按 1:6 比例接种（高于 SEP-L2 的 1:3 比例），离心速度 800rpm，24 小时贴壁率超 96%，操作简便性优于肺细胞系。

冻存保护：采用含 10% DMSO 的wan全培养基，细胞密度 1.8×10⁶个 /mL，-80℃冻存可保存 1 年（存活率＞95%），液氮保存可达 8 年，复苏后 48 小时即可用于病毒培养。

猪瘟病毒培养优化：细胞以 3×10⁵个 / 孔接种 24 孔板，同步接种 CSFV（MOI=0.01），37℃培养 48 小时，病毒滴度可达 10⁸.⁵ TCID₅₀/mL，结果变异系数＜3%（SEP-L2 为 15%）。

空斑实验标准化：使用含 1.2% 甲基纤维素的维持液，37℃培养 72 小时，结晶紫染色后空斑清晰可数，最小检测限达 10⁰.⁵ PFU/mL，较母系细胞提高 10 倍。

优势：

局限性：