pDSr a2-mpl-X中国仓鼠卵巢细胞系，经基因修饰，稳定表达 mpl 蛋白，上皮样，贴壁生长，适用于相关蛋白功能研究、药物筛选及信号通路探究。

构建背景：mpl 是血小板生成素（TPO）的特异性受体，在巨核细胞增殖分化与血小板生成中起关键作用。该细胞系通过脂质体转染技术，将含 mpl 基因的 pDSr a2 载体（含 SV40 启动子与新mei素抗性基因）导入 CHO 细胞，经 G418 筛选获得稳定表达株，“X" 代表克隆编号，确保细胞群的均一性。

形态与增殖：体外培养时呈上皮样形态，贴壁生长，细胞呈多边形，排列紧密，形态与亲本 CHO 细胞一致。在 37℃、5% CO₂条件下，传代周期约 2-3 天，可适应含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养基，同时兼容无血清培养体系，悬浮培养时细胞存活率可达 85% 以上，增殖稳定性优于普通转染细胞株。

表达特征：mpl 蛋白定位于细胞膜，表达量可通过 Western blot 或流式细胞术定量（平均每细胞约 1×10⁴-5×10⁴个受体），且长期传代（＞30 代）后表达量波动＜10%。载体中的 SV40 启动子确保基因持续表达，新mei素抗性基因便于维持细胞株纯度，避免非表达细胞污染。

优势：mpl 表达稳定且可控，避免原代细胞的异质性问题；保留 CHO 细胞的易培养特性，适合大规模实验；功能特异性高，仅响应 mpl 通路相关刺激，减少背景干扰；可通过基因编辑进一步改造（如敲除内源性信号分子），提升研究精准度，被多家实验室列为 mpl 相关研究的标准细胞系。

局限性：作为异源表达系统，mpl 的糖基化模式与人类细胞存在细微差异，可能影响配体结合效率；长期培养需维持 G418 筛选压力（通常 400μg/mL），否则易丢失表达质粒；无法wan全模拟体内巨核细胞的分化环境，研究生理功能时需结合动物模型验证。

培养条件：基础培养基为含 10% 胎牛血清、400μg/mL G418 的 DMEM/F12，添加青mei素 - 链mei素防污染。传代时用 0.25% yi酶消化，贴壁培养融合度控制在 70%-80%，避免过度密集导致表达量下降。进行功能实验前，需用无 G418 培养基培养 1-2 代，排除药物对细胞活性的影响。

功能检测优化：检测通路激活时，推荐使用无血清培养基饥饿处理 12 小时，减少血清因子干扰；TPO 刺激浓度通常为 10-100ng/mL，作用时间根据检测指标调整（如磷酸化蛋白检测取 15-60 分钟，增殖实验取 48-72 小时）。

冻存与复苏：冻存液含 10% DMSO 与 400μg/mL G418，液氮保存可维持活性 3 年以上；复苏时 37℃快速解冻，离心后用含 G418 的培养基重悬，传代 2 次后再用于实验，确保细胞状态稳定。