NRK49F正常大鼠肾细胞系（EGF受体阳性）
NRK49F正常大鼠肾细胞系（EGF受体阳性）作为源自大鼠肾脏间质的成纤维细胞模型，因保留肾脏成纤维细胞的典型生物学特征及活化潜能，在肾脏纤维化机制研究中具有核心价值，成为探究肾间质纤维化病理过程及干预策略的关键实验工具。
细胞特性与来源背景：该细胞系源自大鼠正常肾脏皮质间质组织，经原代培养和永生化处理建立。细胞形态在静息状态下呈长梭形，胞体细长，两端尖细，细胞核呈杆状或椭圆形，核仁不明显；活化后细胞体积增大 30%，呈现星状或多角形，胞质内粗面内质网显著增多。生长方式为贴壁生长，呈平行排列或漩涡状分布，具有接触抑制特性，传代后 24 小时贴壁率达 96%，显著高于肾脏上皮细胞系。核心参数表现出成纤维细胞特征：倍增时间约 48 小时，连续传代 50 次后仍保持正常二倍体核型（染色体数 42 条）；成纤维细胞标志物波形蛋白（Vimentin）、α- 平滑肌肌动蛋白（α-SMA）在静息状态下阳性率分别为 98% 和 12%，活化后 α-SMA 阳性率升至 85%；胶原蛋白 I（Col I）分泌量达 23μg/10⁶细胞 / 24h，纤维连接蛋白（FN）表达量是肾小管上皮细胞的 6.8 倍；无微生物污染，细胞纯度达 97%，保障实验结果的可靠性。
科研应用价值：在肾脏纤维化机制研究中，NRK49F 细胞经转化生长因子 -β1（TGF-β1）刺激后，48 小时内 α-SMA 表达量增加 5.2 倍，Col I mRNA 水平升高 4.7 倍，细胞收缩能力增强 3.8 倍，可模拟体内肾成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的关键过程，为解析纤维化启动机制提供理想模型。药物干预研究方面，该细胞在姜黄素处理下，TGF-β1 诱导的 Col I 分泌量下降 42%，Smad3 磷酸化水平降低 58%，能很好地反映抗纤维化药物的干预效果，助力靶向药物筛选。在肾损伤微环境研究领域，该细胞与肾小管上皮细胞共培养时，上皮细胞损伤释放的细胞因子可使 NRK49F 活化率提升 35%，而活化的成纤维细胞会反过来抑制上皮细胞增殖，形成 “上皮 - 间质细胞交叉对话" 模型，适用于研究肾损伤后的间质 - 上皮相互作用。此外，将该细胞接种于裸鼠肾被膜下，可构建肾纤维化动物模型，用于评估候选药物的体内抗纤维hua疗效。
培养与保存规范：静息状态培养推荐使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基，添加 1% 抗生素混合液，培养环境为 37℃、5% CO₂饱和湿度的恒温培养箱。诱导活化时采用含 5ng/ml TGF-β1 的培养基，处理时间通常为 24-72 小时，活化效率可达 80% 以上。培养基需每 2-3 天更换一次，更换时动作轻柔以避免细胞脱落。传代时采用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化液处理，37℃孵育 5-8 分钟，待细胞边缘回缩后加入含血清的培养基终止消化，传代比例为 1:3-1:5，每 3-4 天传代一次，维持细胞融合度在 60%-70% 以保持生物学活性。冻存液配方为基础培养基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清，经程序降温（-20℃1 小时→-80℃过夜→液氮保存）后，复苏细胞存活率达 93% 以上，2-3 代内可恢复正常的活化潜能。运输采用 T-25 培养瓶活细胞运输，收到细胞后需静置培养 24 小时，更换培养基后观察细胞形态，确认无异常漂浮物后进行后续实验。该细胞系仅限科研使用，禁止用于临床诊疗相关研究。
NRK49F 大鼠肾成纤维细胞系以其稳定的活化特性、明确的纤维化标志物表达及易于体外操控的优势，在肾脏纤维化基础研究与药物开发中发挥着不可替代的作用，为揭示肾间质纤维化的分子机制和开发新型抗纤维hua疗法提供了可靠的细胞平台。
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