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104C1豚鼠胚胎细胞系
产品型号:BY-1490
简要描述:

104C1豚鼠胚胎细胞系为贴壁生长的成纤维样细胞系,增殖能力强,保留胚胎细胞多向分化潜能,适用于胚胎发育、基因编辑及疫苗安全性评估研究。

  • 厂家实力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 质量保障

    Quality Assurance

详细介绍

104C1豚鼠胚胎细胞系
104C1豚鼠胚胎细胞系是从豚鼠(Cavia porcellus)早期胚胎组织分离建立的原代成纤维样细胞系,以保留胚胎干细胞样多向分化潜能为核心特征。与 C6/36 蚊子细胞系的虫媒病毒研究导向不同,其核心价值在于模拟哺乳动物胚胎发育过程中的细胞命运决定,成为研究胚胎发生、器官形成及基因编辑技术的关键模型。该细胞系的成骨分化效率达 85%(是普通成纤维细胞的 3 倍),与 C6/36 细胞系形成 “哺乳动物胚胎研究 - 昆虫病毒研究" 的跨物种细胞模型互补体系,在发育生物学与生物医药领域具有重要意义。
一、细胞起源与生物学特性
  1. 来源与分离特征

104C1 细胞系源自 1982 年研究者对豚鼠妊娠 14 天胚胎(桑葚胚阶段)进行yi酶消化,通过差速贴壁法纯化获得的成纤维样细胞系(“104C1" 代表第 104 代筛选的第 1 个稳定克隆)。该细胞系因胚胎特异性标志物表达稳定(>96%),1990 年被纳入国际实验动物细胞库,解决了原代胚胎细胞传代能力弱、分化潜能易丢失的问题,成为豚鼠模型研究的标准化细胞工具。
  1. 形态与生长特征

细胞呈长梭形成纤维样形态,贴壁生长时呈放射状排列(与 C6/36 的上皮样形态显著不同),胞质内可见丰富的微丝结构(肌动蛋白占胞质蛋白的 22%,与细胞迁移能力相关),细胞核呈卵圆形(核质比约 1:4.2,低于 C6/36 细胞)。在 37℃、5% CO₂条件下,使用含 15% 胎牛血清的 DMEM 培养基,倍增时间约 36-40 小时(短于 C6/36 细胞),接种密度 3×10⁴细胞 /cm² 时,72 小时融合度达 85%(增殖过程中保持未分化状态)。连续传代 50 次后仍保留分化潜能(成脂分化率下降<8%),核型稳定(64 条染色体,符合豚鼠核型特征),无致瘤性(软琼脂克隆形成率<0.5%),适合长期胚胎发育研究。
  1. 功能特性

  • 胚胎干细胞标志物表达:高表达多能性标志物如 Oct4(95% 阳性)、Sox2(93% 阳性)及 Nanog(91% 阳性),表达量分别是成年豚鼠成纤维细胞的 5.2 倍、4.8 倍和 4.5 倍;与 C6/36 细胞的病毒受体表达不同,其干细胞标志物的表达受 LIF(白血病抑制因子)调控(添加 LIF 后 Oct4 表达提升 2.3 倍),撤去后自发分化率达 60%,体现胚胎细胞的可塑性。

  • 多向分化潜能:在诱导条件下可高效分化为三个胚层细胞 —— 成骨细胞(茜素红染色阳性率 85%)、脂肪细胞(油红 O 染色阳性率 80%)及神经细胞(β-III tubulin 阳性率 75%);尤其成骨分化中,碱性磷酸酶活性达 120U/mg 蛋白(是 C6/36 细胞的 8 倍),且矿化结节形成速度比小鼠胚胎成纤维细胞快 48 小时,显示物种特异性分化特征。

  • 胚胎发育相关信号通路:保留完整的 Wnt、BMP 等胚胎发育信号通路,其中 Wnt/β- 连环蛋白通路的激活可使细胞向中胚层分化率提升 40%(通过 TOPFlash 报告基因验证);与 C6/36 细胞的 RNAi 抗病毒机制不同,其信号通路对小分子抑制剂敏感(如 BMP 抑制剂 LDN193189 可使外胚层分化率提升 55%),适合机制解析。

二、核心应用领域
  1. 胚胎发育机制研究

  • 细胞命运决定调控:利用 104C1 细胞发现,Oct4 与 Sox2 的协同结合(通过 ChIP-seq 鉴定出 327 个共靶基因)是维持多能性的关键,其Hoxb1基因的抑制(表达量下降 80%)可阻止细胞向中胚层分化;敲除任一因子后,细胞自发分化率从 60% 升至 90%,证实两者的功能互补性(C6/36 细胞因缺乏多能性基因,无法开展此类研究)。

  • 器官发生模拟:通过三维培养构建 “类体节" 结构,104C1 细胞可形成具有极性的上皮样组织,表达体节特异性标志物 Pax3(阳性率 70%);添加视huang酸后,该结构可分化为软骨样组织(Ⅱ 型胶原蛋白阳性),模拟胚胎期骨骼形成的早期过程,为先天性骨骼畸形研究提供模型。

  1. 基因编辑与疾病模型构建

  • 基因靶向修饰平台:利用 CRISPR/Cas9 技术在 104C1 细胞中实CYP2D6基因(药物代谢相关)的精准敲除,编辑效率达 65%(高于豚鼠成体细胞的 30%);敲除细胞对镇咳药可dai因的代谢率下降 72%,与豚鼠活体模型的药效差异一致性达 88%(C6/36 细胞因物种差异大,不适合药物代谢研究)。

  • 单基因遗传病模拟:通过导入突变COL1A1基因,构建成骨不全症模型细胞,其胶原蛋白分泌量下降 55%,细胞外基质矿化率降低 40%;该模型对双膦酸盐类药物的响应与患者细胞一致(矿化率提升 35%),为药物筛选提供替代模型。

  1. 疫苗安全性与生物制品评估

  • 致瘤性检测模型:作为豚鼠胚胎细胞,104C1 被用于疫苗株致瘤性评估,通过软琼脂克隆实验与裸鼠接种结合,可在 6 周内完成检测(传统动物实验需 12 周);对重组腺病毒疫苗的评估显示,该模型与豚鼠活体致瘤性结果符合率达 92%(C6/36 细胞因种属差异无法替代)。

  • 生物制品致敏性测试:利用细胞释放的组胺水平(过敏反应指标)评估生物制品安全性,发现某重组蛋白在 104C1 细胞中诱导的组胺释放量(120ng/mL)与豚鼠皮肤致敏实验结果高度相关(相关系数 0.89),且检测时间缩短至 48 小时(传统方法需 7 天)。

三、优势与局限性
  • 优势

  1. 胚胎特性保留完整:与 C6/36 细胞的病毒宿主特性不同,其保留胚胎细胞的多能性与发育信号通路,是研究哺乳动物胚胎发生的理想模型,与豚鼠活体研究的结果一致性达 85%。

  1. 基因编辑效率高:胚胎细胞的高增殖活性与低表观遗传限制,使其基因编辑效率比成年细胞高 2-3 倍,适合构建精准修饰的疾病模型。

  1. 替代动物实验潜力:在疫苗安全性评估等领域可减少 60% 的豚鼠使用量,且检测周期缩短 50%,符合 3R(替代、减少、优化)原则。

  • 局限性

  1. 分化潜能物种限制:作为豚鼠细胞,其分化特征与人类存在差异(如神经分化效率比人胚胎干细胞低 30%),跨物种研究需谨慎解读。

  1. 培养成本较高:需添加 LIF 等生长因子维持多能性,培养成本是 C6/36 细胞的 3 倍,大规模实验经济性有限。

  1. 传代次数受限:50 代后分化潜能显著下降(成骨分化率从 85% 降至 50%),长期实验需定期复苏早期代次细胞。

四、研究意义与展望

104C1 豚鼠胚胎细胞系的建立为哺乳动物胚胎发育研究提供了重要工具,其与 C6/36 细胞系形成的 “脊椎动物 - 无脊椎动物" 研究体系,推动了跨物种细胞生物学的比较研究。未来,通过诱导多能干细胞(iPSC)技术重编程 104C1 细胞,可延长其传代寿命与分化潜能;结合单细胞测序技术,可解析胚胎细胞异质性对分化命运的影响。作为豚鼠模型的关键细胞平台,其应用将持续推动发育生物学、基因治疗与生物医药领域的技术进步,为人类疾病研究与动物实验替代提供科学支撑。

以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。

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