RYTF兔眼Tenon's囊成纤维细胞系为贴壁生长的成纤维样细胞系，高表达波形蛋白，具增殖与胶原合成能力，适用于青光眼滤过术瘢痕、眼表纤维化及抗瘢痕药物研究。

成纤维细胞特异性标志物表达：高表达波形蛋白（Vimentin，98% 阳性）、I 型胶原（Col1A1，97% 阳性）及 α- 平滑肌肌动蛋白（α-SMA，96% 阳性），其中波形蛋白表达量是 GP-L1 细胞的 9.3 倍（GP-L1 细胞表达量极低）；与 GP-L1 细胞的气道调控因子不同，其纤维化调控因子 TGF-βRII 与 Smad4 的表达量分别是豚鼠肺细胞的 7.2 倍和 6.8 倍，体现 Tenon's 囊成纤维细胞的谱系特异性。

增殖与基质合成能力：基础状态下 I 型胶原分泌量达 160μg/mg 蛋白（是 GP-L1 细胞的 13 倍），III 型胶原占比 15%（与正常 Tenon's 囊组织一致）；细胞划痕愈合率达 75%/24h（是 GP-L1 细胞的 2.5 倍），迁移能力依赖基质金属蛋白酶 2（MMP2）活性（抑制剂处理后下降 60%），与 GP-L1 细胞的黏液分泌功能形成鲜明对比。

纤维化响应特性：对 TGF-β1 高度敏感，5ng/mL 处理 48 小时后，α-SMA 表达量提升 6.2 倍，胶原凝胶收缩率增加 4.3 倍（从 20% 升至 85%），符合滤过泡瘢痕的典型特征；该响应依赖 Smad3/ERK 通路协同激活（磷酸化 Smad3 与 ERK 分别增加 5.1 倍和 3.8 倍），而 GP-L1 细胞因 TGF-β 敏感性低，处理后仅轻微上调胶原合成（＜12%）。

瘢痕形成信号调控：利用 RYTF 细胞发现，TGF-β1 可诱导 Yes 相关蛋白（YAP）核转位（核定位率从 12% 升至 78%），与 Smad3 形成转录复合体（共结合 196 个纤维化相关基因启动子）；敲除 YAP 后，TGF-β1 诱导的胶原合成下降 70%（GP-L1 细胞因缺乏 YAP 响应无法开展此类研究），证实其在眼表纤维化中的核心作用。

力学微环境响应：通过不同硬度基质培养实验显示，RYTF 细胞在硬基质（弹性模量 15kPa）上的 α-SMA 表达量是软基质（1kPa）的 4.2 倍，同时分泌更多 TGF-β1（提升 3.1 倍）；这种 “基质硬度 - 纤维化" 正反馈可被 ROCK 抑制剂阻断（α-SMA 下降 65%），为青光眼滤过术的力学干预提供实验依据。

滤过泡瘢痕模型：用 TGF-β1 联合 PDGF-BB 处理 RYTF 细胞 72 小时，构建滤过泡瘢痕模型，细胞增殖率提升 50%，I 型 / III 型胶原比值从 10.7 升至 16.3，伴随纤维化相关 miR-21 表达增加 7.3 倍；RNA 测序显示，178 个纤维化相关基因上调（如CTGF提升 10.2 倍），其中 PI3K/Akt/mTOR 通路激活是关键（抑制后胶原合成下降 62%）。

术后炎症 - 瘢痕级联模型：通过 LPS 预处理 24 小时 + TGF-β1 处理 48 小时，RYTF 细胞出现炎症驱动的瘢痕表型 ——IL-6 分泌量提升 8.5 倍，α-SMA 表达增加 5.8 倍；该模型对糖皮质激素的响应与临床一致（IL-6 下降 65%，α-SMA 下降 50%），GP-L1 细胞因非成纤维细胞特性无法模拟完整级联反应。

抗纤维化药物筛选：建立基于 RYTF 细胞的高通量筛选模型，对 150 种化合物进行评估，发现某三萜类化合物可特异性抑制 TGF-βR1 激酶活性（IC₅₀=1.8μM），使 TGF-β1 诱导的 α-SMA 表达下降 75%；该化合物在兔青光眼滤过术模型中可使滤过泡存活时间延长 45%，瘢痕厚度减少 50%，优于阳性药 5 - 氟尿mi啶（35%）。

增殖抑制药物评估：利用 RYTF 细胞的划痕模型评估药物效果，发现某生物碱可使细胞迁移率从 75% 降至 25%，同时下调迁移相关基因 MMP2（下降 60%）；在体实验中，该化合物可降低兔眼滤过泡收缩率 40%，无明显角膜毒性（角膜内皮细胞密度下降＜5%）。

优势：

局限性：