TS-EL-1树鼩胚胎肺细胞系
TS-EL-1树鼩胚胎肺细胞系在树鼩胚胎肺脏生物学研究领域占据重要地位,为深入探究树鼩胚胎肺细胞的特性与功能提供了可靠的体外研究工具,助力科研人员剖析树鼩胚胎肺的发育机制和相关病理过程。
树鼩作为进化上接近灵长类的小型哺乳动物,其胚胎肺脏的发育过程,包括支气管分支、肺泡形成等阶段,与高等哺乳动物存在诸多相似之处。胚胎肺细胞作为胚胎肺脏发育的核心细胞类型,其增殖、分化和功能成熟的调控机制,是理解胚胎肺发育规律的关键。以往对树鼩胚胎肺发育的研究多依赖胚胎切片观察或整体动物实验,难以在细胞层面精准解析胚胎肺细胞的动态变化和分子调控网络。原代胚胎肺细胞培养存在分离难度大、存活时间短、传代困难等问题,制约了相关研究的深入开展。因此,TS-EL-1 树鼩胚胎肺细胞系的建立,为突破这些研究瓶颈提供了新的解决方案。
TS-EL-1 树鼩胚胎肺细胞系来源于树鼩胚胎的肺组织,通过原代培养结合纯化技术建立而成。建立过程严格遵循细胞培养规范,在无菌条件下获取发育至特定阶段的树鼩胚胎,剥离完整的肺脏组织,去除周围结缔组织和血管,将肺组zhi剪切成约 1mm³ 的小块。随后,用含双抗的磷酸盐缓冲液多次冲洗,彻di清除血液和杂质。接着,加入专用胚胎肺细胞分散液,在 37℃环境中处理 25-35 分钟,期间每隔 8 分钟轻柔吹打,促使细胞充分分散。收集细胞悬液后,经 70μm 细胞滤网过滤,再以 900r/min 的转速离心 6 分钟,弃去上清液,用含有 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养液重悬细胞,接种于包被胶原蛋白的培养瓶中,放置在 37℃、5% CO₂的恒温培养箱内进行原代培养。培养初期,通过差速贴壁法去除成纤维细胞等杂细胞,每 36 小时更换一次培养液,当细胞汇合度达到 75% 左右时进行传代操作。目前,该细胞系已稳定传代至 30 代以上,细胞活力始终保持在 80% 以上。
该细胞系呈现典型的胚胎肺上皮细胞形态,多数细胞呈多边形,部分呈短梭形,胞体饱满,排列呈片状或团状,胞质内可见细小的分泌颗粒,细胞核呈圆形或椭圆形,位于细胞中央,具有较强的贴壁生长特性。在生长特性方面,研究发现 TS-EL-1 细胞在含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养液中生长状态最佳,相较于其他血清浓度的培养液,细胞增殖速度提高约 18%。最适宜的培养温度为 37℃,与哺乳动物体温一致;在此条件下,细胞群体倍增时间最短,约为 68 小时。历经 20 代传代后,细胞形态和增殖速率未出现明显变化,核型分析显示其染色体数目稳定,维持树鼩正常的染色体数目,遗传背景可靠,稳定保留了胚胎肺细胞的固有特性。
在功能特性方面,免疫荧光检测清晰显示,TS-EL-1 细胞高表达胚胎肺上皮细胞特异性标志物,如表面活性蛋白 A、细胞角蛋白 18 和 TTF-1,确凿证实了其胚胎肺上皮细胞属性。该细胞系具备一定的分泌功能,能合成和分泌表面活性物质相关成分,在模拟胚胎肺脏的功能成熟过程中发挥着重要作用。当 TS-EL-1 细胞受到肺发育相关细胞因子刺激时,细胞增殖相关基因如 PCNA 的表达量显著上调,同时分化相关蛋白的合成增加,展现出良好的响应能力,为研究胚胎肺细胞的生长分化调控机制提供了关键线索。此外,该细胞系对缺氧环境表现出敏感性,在低氧条件下,细胞增殖速率下降,缺氧诱导因子 HIF-1α 的表达量升高,为探究胚胎肺脏对缺氧的适应机制提供了良好的实验材料。
TS-EL-1 树鼩胚胎肺细胞系在多个研究领域展现出广泛的应用价值。在胚胎肺发育研究中,通过对该细胞系进行基因编辑实验,成功揭示了 FOXA2 基因在树鼩胚胎肺细胞分化过程中的关键调控作用。在比较胚胎学研究方面,借助该细胞系与其他动物胚胎肺细胞系的对比分析,清晰阐明了不同物种胚胎肺发育的差异及其分子机制。在医学研究领域,基于该细胞系建立的药物筛选模型,已用于评估多种影响胚胎肺发育药物的安全性和有效性,为先天性肺部疾病的病因研究和药物研发提供了有力支持。
作为稳定可靠的树鼩胚胎肺细胞模型,TS-EL-1 不仅为树鼩胚胎肺发育研究提供了重要的技术支撑,推动了相关学术研究的深入发展,还有助于提升对树鼩这种模式生物的研究水平,为人类胚胎肺发育异常及相关疾病的研究和治疗提供了有价值的参考,在基础研究和临床应用领域均具有重要意义。
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