Wrh-f2大鼠肝癌细胞系
Wrh-f2大鼠肝癌细胞系作为源自大鼠自发性肝癌组织的恶性上皮细胞模型，因具备显著的肝内转移潜能和药物抵抗特性，在肝癌侵袭转移机制、耐药性研究及抗肿瘤药物筛选中具有重要价值，成为探究肝细胞癌恶性进展的关键实验工具。
细胞特性与来源背景：该细胞系源自大鼠自发性肝癌组织，经原代培养和克隆化筛选建立。细胞形态呈上皮样，多为多边形或短梭形，部分细胞呈现不规则形态，胞体大小不均（直径约 20-25μm），胞质丰富，可见较多嗜酸性颗粒，约 15% 细胞呈现多核现象，细胞核大而畸形，核仁明显且数量较多（2-4 个）。生长方式为贴壁生长，呈杂乱堆叠状排列，无接触抑制，传代后 24 小时贴壁率达 94%。核心参数表现出肝癌细胞特征：倍增时间约 38 小时，连续传代 40 次后仍保持稳定的增殖能力；染色体核型为亚二倍体（染色体数 38-40 条），存在多条染色体易位和缺失现象；肝癌特异性标志物甲胎蛋白（AFP）阳性率达 90%，白蛋白表达量为正常肝细胞的 28%；具有较强的侵袭能力，Transwell 实验中穿膜细胞数是普通肝癌细胞系的 2.5 倍；对常用hua疗药物阿mei素的耐药指数为 3.2，表现出明显的药物抵抗特性；无微生物污染，细胞纯度达 97%，保障实验结果的可靠性。
科研应用价值：在肝癌转移机制研究中，Wrh-f2 细胞经肝细胞生长因子（HGF）处理 48 小时后，基质金属蛋白酶 - 9（MMP-9）活性增强 4.5 倍，上皮间质转化标志物 N - 钙粘蛋白表达量增加 3.8 倍，迁移能力提升 60%，可模拟肝癌细胞在肝内的侵袭转移过程，为解析肝癌转移的分子机制提供理想模型。
药物耐药性研究方面，该细胞在长期低剂量阿mei素处理后，多药耐药基因 1（MDR1）表达量增加 5.2 倍，细胞内药物蓄积量下降 45%，凋亡率降低 60%，可用于探究肝癌细胞获得性耐药的形成机制，为逆转肝癌耐药的药物研发提供实验基础。
在抗肿瘤药物筛选领域，该细胞对靶向药物索拉非尼的敏感性较低，半数抑制浓度（IC50）为 12μmol/L，是敏感细胞系的 3 倍，经联合用药处理后，凋亡率提升至 58%，适用于评估联合用药方案的抗肝癌效果。此外，将该细胞接种于大鼠肝脏，2 周后肝内转移灶数达 6-8 个，肺转移率达 40%，可用于构建肝癌多器官转移模型，评估药物对转移灶的抑制作用。
培养与保存规范：推荐使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基，添加 1% 非必需氨基酸、1mM 丙酮酸钠及 1% 抗生素混合液，培养环境为 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱。培养基需每 2 天更换一次，以维持细胞的高活性。传代时，用 PBS 冲洗细胞 2 次，加入专用细胞解离液，37℃孵育 8-10 分钟，待细胞间隙增大后轻轻吹打使细胞脱落，传代比例为 1:3-1:5，每 2-3 天传代一次，避免细胞过度密集影响其侵袭能力。
冻存液采用培养基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液，细胞浓度调整为 6×10⁶个 /ml，经程序降温（-20℃1 小时→-80℃过夜→液氮保存）后，复苏存活率达 85% 以上，2-3 代内可恢复正常的增殖和侵袭能力。运输采用 T-25 培养瓶活细胞运输，收到细胞后需静置培养 24 小时，更换培养基后观察细胞形态，确认无异常漂浮物后进行实验。该细胞系仅限科研使用，操作需符合生物安全二级防护要求。
Wrh-f2 大鼠肝癌细胞系以其显著的转移潜能、药物抵抗特性及稳定的生物学特征，在肝癌转移与耐药研究领域发挥着重要作用，为揭示肝癌恶性进展机制和开发新型治疗策略提供了可靠的细胞平台。
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