RH-35大鼠肝癌细胞系
RH-35大鼠肝癌细胞系作为源自大鼠肝癌组织的恶性上皮细胞模型，因具备显著的侵袭转移能力和稳定的肝内成瘤特性，在肝癌转移机制、肿瘤微环境互作及抗转移药物研发中具有重要价值，成为探究肝细胞癌恶性进展的关键实验工具。
细胞特性与来源背景：该细胞系源自大鼠化学诱导性肝癌，经原代培养和克隆化筛选建立。细胞形态呈上皮样，以多边形为主，部分呈梭形，胞体大小不均（直径约 15-25μm），胞质内可见脂滴样结构，约 15% 细胞呈现多核现象，细胞核畸形明显，核仁增大且数量达 2-4 个。生长方式为贴壁生长，呈杂乱无章的堆叠状排列，接触抑制wan全消失，传代后 24 小时贴壁率达 95%。核心参数表现出高侵袭性肝癌细胞特征：倍增时间约 36 小时，连续传代 50 次后增殖能力无明显衰减；染色体核型为超二倍体（染色体数 44-46 条），存在 11 号染色体长臂扩增现象；肝癌标志物甲胎蛋白（AFP）阳性率达 94%，细胞角蛋白 18（CK18）阳性率 91%，白蛋白表达量仅为正常肝细胞的 20%；Transwell 实验中穿膜细胞数是 CBRH-7919 细胞的 2.3 倍，体外划痕愈合率 48 小时达 85%；无微生物污染，细胞纯度达 97%，保障实验结果的可靠性。
科研应用价值：在转移机制研究中，RH-35 细胞经转化生长因子 -β（TGF-β）处理后，上皮间质转化（EMT）标志物 E - 钙粘蛋白表达量下降 62%，波形蛋白表达量增加 3.8 倍， RhoA GTP 酶活性增强 4.2 倍，可模拟肝癌细胞从原发灶脱离的分子过程，为解析肝内转移级联反应提供理想模型。
药物筛选领域，该细胞对基质金属蛋白酶抑制剂反应敏感，经 GM6001 处理后，侵袭能力下降 65%，肝内转移灶形成率降低 58%，适用于抗转移药物的活性评估。在肿瘤微环境研究方面，该细胞与肝星状细胞共培养时，结缔组织生长因子（CTGF）分泌量增加 5 倍，胶原蛋白合成量提升 4.3 倍，可用于探究肝癌 - 基质细胞互作介导的转移前微环境形成机制。
此外，将该细胞经脾静脉注射构建肝转移模型，2 周后肝内转移灶数达 8-12 个 / 只，转移率 100%，显著高于皮下接种模型，为体内评估抗转移药物提供精准模型。
培养与保存规范：推荐使用含 12% 胎牛血清的 MEM 培养基，添加 1% 谷an酰胺、0.1mM 非必需氨基酸及 1% 抗生素混合液，培养环境为 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱。培养基需每 2 天更换一次，维持细胞密度在 30%-70% 以保持高侵袭活性。传代时，采用细胞刮除法收集贴壁细胞，经 PBS 轻柔洗涤后吹打分散，传代比例 1:4-1:6，每 2-3 天传代一次，避免细胞密度过高导致 EMT 表型逆转。
冻存液配方为培养基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清，细胞浓度调整为 8×10⁶个 /ml，经程序降温（-20℃1 小时→-80℃过夜→液氮保存）后，复苏存活率达 90% 以上，3 代内可恢复原有转移能力。运输采用 T-75 培养瓶活细胞运输，收到细胞后需静置 6 小时再更换培养基，镜检确认细胞无聚团现象后进行实验。该细胞系仅限科研使用，操作需符合生物安全二级防护要求。
RH-35 大鼠肝癌细胞系以其突出的转移潜能、稳定的恶性表型及对微环境的高响应性，在肝癌转移研究领域具有不可替代的价值，为开发阻断肝内转移的新型治疗策略提供了可靠的细胞平台。
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