JEG-3/VP16人绒癌细胞耐药细胞系
JEG-3/VP16人绒癌细胞耐药细胞系是在 JEG-3 人绒癌细胞系基础上,通过逐步递增浓度的依tuo泊苷(VP16)长期诱导筛选而获得。依tuo泊苷作为临床常用的hua疗药物,通过抑制拓扑异构酶 Ⅱ 的活性,干扰 DNA 复制和转录,从而发挥抗癌作用。但在长期药物压力下,JEG-3 细胞发生适应性改变,逐步获得对依tuo泊苷及其他多种hua疗药物的耐受性,最终形成稳定的耐药细胞株 JEG-3/VP16。
从生物学特性来看,JEG-3/VP16 细胞仍保持上皮样形态,以贴壁方式生长,但其细胞形态和生长特性与亲本 JEG-3 细胞存在差异。在显微镜下,JEG-3/VP16 细胞体积增大,细胞核与细胞质比例改变,细胞间连接更为松散。相较于 JEG-3 细胞,JEG-3/VP16 细胞增殖速度有所减缓,这可能是由于耐药机制的建立消耗了部分细胞能量,同时也使得细胞对药物的敏感性降低。此外,JEG-3/VP16 细胞的侵袭和迁移能力也发生变化,耐药特性的获得可能重塑了细胞外基质的相互作用,影响其在体内的转移潜能。
JEG-3/VP16 细胞的耐药机制复杂且多元。其一,细胞内药物外排泵蛋白如 P - 糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)的高表达,可将进入细胞内的hua疗药物主动泵出,降低细胞内药物浓度;其二,细胞内 DNA 损伤修复机制增强,能够快速修复依tuo泊苷等药物导致的 DNA 损伤,维持基因组稳定性;其三,细胞凋亡通路受阻,抗凋亡蛋白 Bcl-2 家族表达上调,促凋亡蛋白 Bax 等表达下调,使得细胞难以启动凋亡程序,从而逃避药物诱导的死亡;其四,细胞内信号通路的改变,如 PI3K/AKT、MAPK 通路异常激活,增强细胞的存活和耐药能力 。
在细胞培养方面,JEG-3/VP16 细胞同样使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养基,培养条件为 37℃、5% 二氧化碳的恒温恒湿环境。但为维持其耐药特性,在培养过程中需定期添加低浓度的依tuo泊苷进行筛选压力维持。当细胞融合度达到 80% - 90% 时,需及时按 1:3 - 1:5 的比例进行传代。
在科研与医药领域,JEG-3/VP16 耐药株是研究绒癌耐药机制的重要模型。科研人员通过对比其与亲本 JEG-3 细胞的基因表达谱、蛋白质组学差异,挖掘关键耐药基因和信号通路;在药物研发方面,该耐药株用于筛选能够逆转耐药的新型药物或联合用药方案,评估药物对耐药细胞的杀伤效果,为克服绒癌hua疗耐药、提高临床治疗效果提供理论依据和实践指导。
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