Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞系
Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞系源自 BALB/c 小鼠骨髓瘤细胞系 P3X63Ag8 的突变株，因丧失抗体分泌能力且融合率高，成为单克隆抗体制备的核心工具细胞，在免疫学、肿瘤学及生物制药领域应用广泛。
该细胞系具有典型的骨髓瘤细胞形态与表型特征。显微镜下，细胞呈圆形或椭圆形，悬浮生长，部分细胞聚集成小团，核质比高，染色质疏松，可见 1-2 个明显核仁，胞质较少且呈嗜碱性。免疫表型分析显示，其表达 B 淋巴细胞分化抗原 CD19、CD20，但不表达免疫球蛋白重链和轻链，这一特性与其抗体分泌缺陷的表型一致，也正是这一特征使其在杂交瘤技术中不ke或缺 —— 与 B 淋巴细胞融合后，既能保留骨髓瘤细胞的无限增殖能力，又能借助 B 细胞的抗体合成基因，实现特异性单克隆抗体的持续分泌。
Sp2/0-Ag14 细胞的生长特性使其适合大规模培养。在含 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 培养基中，37℃、5% CO₂条件下，细胞增殖迅速，传代周期约 24-36 小时，对数生长期细胞活力可达 95% 以上。与其他骨髓瘤细胞系相比，其对培养环境适应性更强，在无血清培养基中仍能维持一定增殖能力，便于后期抗体纯化工艺的优化。此外，该细胞系遗传背景稳定，连续传代 50 次后仍保持融合能力与缺陷型表型，为杂交瘤制备的稳定性提供了保障。
作为杂交瘤技术的 “黄金搭档"，Sp2/0-Ag14 细胞的核心优势在于高效融合能力与筛选标记。其携带次黄piao呤 - 鸟piao呤磷酸核糖转移酶（HGPRT）缺陷型突变，在 HAT（次黄piao呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶）选择培养基中无法存活；而正常 B 淋巴细胞虽能利用 HAT 合成核酸，但体外存活时间有限。两者融合形成的杂交瘤细胞，既继承了骨髓瘤细胞的无限增殖能力，又获得 B 细胞的 HGPRT 表达，可在 HAT 培养基中选择性存活，这一机制使杂交瘤筛选效率大幅提升，显著降低非特异性克隆的干扰。
在单克隆抗体制备流程中，Sp2/0-Ag14 细胞的应用贯穿关键环节。免疫后的小鼠脾脏 B 淋巴细胞与该细胞在聚乙二醇（PEG）或电融合技术介导下融合，经 HAT 培养基筛选后，通过有限稀释法或流式分选获得单克隆杂交瘤，再经 ELISA 检测抗体效价与特异性，最终筛选出高效分泌目标抗体的细胞株。例如，在抗新guan病毒 Spike 蛋白单克隆抗体制备中，该细胞系与免疫小鼠的 B 细胞融合后，可快速获得能特异性识别病毒抗原的杂交瘤，为诊断试剂与中和抗体药物研发提供核心材料。
除抗体研发外，Sp2/0-Ag14 细胞在肿瘤机制研究中也有重要价值。其作为 B 淋巴细胞恶性转化的模型，可用于探究骨髓瘤发病的分子机制 —— 研究发现，该细胞系中 NF-κB 信号通路持续激活，通过调控抗凋亡基因 Bcl-2、 Survivin 的表达维持细胞存活，这一机制与人类多发性骨髓瘤的病理特征高度相似，为开发 NF-κB 抑制剂提供了理想的筛选模型。
在生物制药领域，Sp2/0-Ag14 细胞衍生的杂交瘤可通过悬浮培养或生物反应器大规模生产单克隆抗体，其分泌的抗体纯度高、特异性强，广泛应用于临床诊断（如肿瘤标志物检测）、靶向治疗（如抗 CD20 单抗治疗淋巴瘤）及基础研究中的抗原检测（如免疫荧光、Western blot）。近年来，通过基因工程改造该细胞系，使其表达人源化抗体恒定区，可降低鼠源抗体的免疫原性，推动单克隆抗体药物的临床转化。
此外，该细胞系在免疫学基础研究中也发挥作用。通过构建携带特定抗原基因的 Sp2/0-Ag14 细胞，可作为抗原呈递细胞研究 T 细胞活化机制；或与 T 细胞共培养，观察骨髓瘤细胞对免疫细胞功能的抑制作用，解析肿瘤免疫逃逸的分子策略，为免疫检查点抑制剂的研发提供理论依据。
随着细胞培养技术的进步，Sp2/0-Ag14 细胞的无血清悬浮培养体系日益成熟，结合基因编辑技术实现抗体表达量的定向提升，使其在单克隆抗体制备中的效率与产量持续优化，为生物制药行业的发展提供了强大助力。
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