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首页-产品系统-细胞-细胞系-BY-1404RM-S1猕猴皮肤细胞系

RM-S1猕猴皮肤细胞系
产品型号:BY-1404
简要描述:

RM-S1猕猴皮肤细胞系,成纤维样,贴壁生长,保留皮肤细胞特性,对痘病毒等敏感,支持复制,适用于皮肤病毒研究、创伤修复及药物筛选。

  • 厂家实力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 质量保障

    Quality Assurance

详细介绍

RM-S1猕猴皮肤细胞系
RM-S1猕猴皮肤细胞系是从健康猕猴皮肤组织分离建立的永生化成纤维细胞系,因保留灵长类皮肤细胞的典型生物学特征,且对皮肤嗜性病毒具有高度敏感性,成为皮肤病毒研究、创伤修复机制探索及外用药物筛选的重要模型。其稳定的增殖能力与组织特异性功能,为皮肤疾病研究提供了接近人类生理环境的实验平台。
一、细胞起源与生物学特性
  1. 来源与建立背景

RM-S1 细胞系源自成年猕猴的背部皮肤组织,通过胶原酶消化法获得原代成纤维细胞,经端粒酶转染永生化处理后建立稳定细胞系(“RM" 代表猕猴,“S1" 为皮肤来源的首ge克隆株)。该细胞系保留了皮肤成纤维细胞的表型特征,其建立填bu了灵长类皮肤成纤维细胞模型的空白,为研究人类皮肤疾病提供了更具参考价值的替代模型。
  1. 形态与生长特征

细胞呈典型成纤维样形态,贴壁生长时呈长梭形,排列呈放射状或漩涡状,胞质均匀,细胞核呈椭圆形位于细胞中央。在 37℃、5% CO₂条件下,使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养基,倍增时间约 36-42 小时,传代比例 1:2 至 1:3,每周换液 2 次以维持细胞密度在 3×10⁴-1×10⁵个 /cm²。细胞冻存复苏存活率超 90%,连续传代 50 次后生长特性无显著变化,核型分析显示保留猕猴二倍体特征(2n=42),染色体畸变率<5%,符合实验细胞质量标准。
  1. 功能特性

  • 表型标志物表达:高表达成纤维细胞特异性标志物,如波形蛋白(Vimentin)、α- 平滑肌肌动蛋白(α-SMA),免疫荧光阳性率>95%;同时表达皮肤组织特异性蛋白,如 Ⅰ 型胶原蛋白、纤维连接蛋白,分泌量分别达 20μg/10⁶细胞 / 天和 15μg/10⁶细胞 / 天,接近原代皮肤成纤维细胞水平。

  • 病毒敏感性:对皮肤嗜性病毒具有高度敏感性,尤其对猴痘病毒、牛痘病毒的感染效率达 90% 以上,病毒滴度可达 10⁶-10⁷ PFU/mL,感染后 24 小时即可观察到典型细胞病变(胞质内包涵体形成、细胞肿胀);对人乳头瘤病毒(HPV)的支持能力突出,可维持病毒 episome 形式存在,为皮肤病毒潜伏感染研究提供模型。

  • 创伤修复相关功能:在体外划痕实验中,细胞迁移速率达 50μm / 小时,可在 48 小时内完成划痕闭合;受损伤刺激后,转化生长因子 -β1(TGF-β1)分泌量提升 3 倍,促进胶原蛋白合成,模拟体内创伤修复过程。

二、核心应用领域
  1. 皮肤病毒感染机制研究

  • 病毒入侵与扩散研究:利用 RM-S1 细胞模拟皮肤微环境,解析猴痘病毒的皮肤传播机制。通过荧光标记病毒实验,观察到病毒通过细胞间连接扩散,依赖 E-cadherin 介导的细胞黏附,阻断该分子后病毒扩散效率下降 70%,为阻断皮肤病毒传播提供靶点。

  • 潜伏感染模型构建:因可支持 HPV 持续感染,可用于研究病毒潜伏机制。例如,HPV16 在 RM-S1 细胞中可稳定潜伏 60 天以上,通过检测 E6/E7 蛋白的低水平表达,发现其通过表观遗传修饰(如 DNA 甲基化)维持潜伏状态,为开发潜伏感染干预药物提供依据。

  1. 创伤修复与皮肤再生研究

  • 修复机制解析:通过构建 RM-S1 细胞与角质形成细胞共培养模型,研究皮肤创伤修复的细胞间相互作用。发现成纤维细胞分泌的肝细胞生长因子(HGF)可促进角质形成细胞迁移,中和 HGF 后修复效率下降 50%,证实其在表皮再生中的关键作用。

  • 再生材料评估:可用于测试新型生物材料的兼容性与促修复能力。例如,将胶原蛋白 - 壳聚糖支架与 RM-S1 细胞共培养,细胞在支架上的增殖率比单纯培养提升 2 倍,支架降解产物可促进 TGF-β1 分泌,为皮肤再生材料优化提供数据。

  1. 外用药物筛选与安全性评价

  • 抗病du药物筛选:基于对猴痘病毒的高敏感性,构建 96 孔板药物筛选模型,日均可检测 300 种化合物。筛选出的阿xi洛韦衍生物对病毒的 EC₅₀=2μM,且对细胞毒性低(CC₅₀>100μM),动物实验显示其可缩短猴痘皮损愈合时间 30%,为皮肤病毒感染治疗提供候选药物。

  • 化妆品与外用制剂安全性测试:替代动物实验用于皮肤刺激性评估,通过检测药物对 RM-S1 细胞活力、乳酸脱氢酶释放的影响,结合 IL-6 分泌水平,建立皮肤刺激性评分标准,与兔皮肤刺激实验结果一致性达 85%,符合 3R 原则(减少、替代、优化)。

三、培养与实验操作要点
  1. 基础培养方案

  • 培养基:DMEM/F12(1:1)培养基添加 10% 胎牛血清、1% 非必需氨基酸,pH 维持在 7.2-7.4,可加入 5ng/mL 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)促进细胞增殖。

  • 传代流程:当细胞融合度达 80% 时,弃旧培养基,PBS 洗涤 2 次,加入 0.25% yi酶 - EDTA 溶液,37℃孵育 3 分钟至细胞变圆,加入含血清的培养基终止消化,按 1:3 比例接种至新培养瓶,避免过度融合导致细胞形态改变。

  • 冻存保护:取对数生长期细胞,用含 10% DMSO 的wan全培养基重悬至密度 1×10⁶个 /mL,程序降温后液氮保存,复苏时 37℃水浴快速解冻,直接接种至预热培养基(无需离心),传代 1 次后即可用于实验。

  1. 病毒感染与创伤模型操作

  • 病毒接种:细胞以 5×10⁴个 / 孔接种 24 孔板,培养 24 小时至融合度 70%,用无血清培养基稀释病毒(MOI=0.1),37℃吸附 2 小时,换含 2% 血清的维持液,每日观察细胞病变,72 小时后通过蚀斑实验测定病毒滴度。

  • 划痕实验:细胞铺满 6 孔板后,用 200μL 枪头垂直划痕,PBS 洗涤去除脱落细胞,加入含 1% 血清的培养基,0 小时和 48 小时拍照,ImageJ 软件计算划痕闭合率。

四、优势与局限性
  • 优势

  1. 组织特异性强:保留皮肤成纤维细胞的功能特征,较通用细胞系(如 Vero)更适合皮肤相关研究,结果参考价值更高。

  1. 灵长类模型优势:与人类皮肤细胞的同源性高(基因序列一致性>95%),研究结果对人类疾病的转化价值优于啮齿类细胞模型。

  1. 功能多样性:既可用于病毒研究,又能支撑创伤修复与药物测试,适用范围广泛。

  • 局限性

  1. 增殖能力有限:传代超过 60 次后增殖速率下降约 20%,需定期复苏早期冻存细胞。

  1. 培养成本较高:需添加生长因子维持功能,培养基成本高于普通细胞系。

  1. 病毒谱局限:对非皮肤嗜性病毒(如呼吸道病毒)敏感性低,应用范围受限。

五、研究意义与展望
RM-S1 猕猴皮肤细胞系的建立为皮肤生物学研究提供了重要工具,其在猴痘病毒等皮肤传染病研究中的应用,为疫情防控提供了关键实验数据;在创伤修复研究中,助力解析皮肤再生机制,推动了再生医学材料的开发。未来,通过基因编辑技术引入人源化基因(如 HPV 受体),可进一步提升模型的临床相关性;结合 3D 生物打印技术构建 “皮肤类器官",有望模拟完整皮肤结构,为皮肤疾病研究与药物开发提供更接近体内环境的实验平台。

以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。

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