CHO-5-HT1B中国仓鼠卵巢细胞系，上皮样，贴壁生长，稳定表达 5-HT1B 受体，可介导 5 - 羟色胺信号，适用于该受体功能研究、神经通路分析及相关药物筛选。

来源与构建：该细胞系以 CHO-K1 细胞为亲本，通过慢病毒载体介导将人 5-HT1B 受体基因导入细胞基因组，经嘌呤霉素抗性筛选及单克隆纯化获得稳定株，“5-HT1B" 明确标识其表达的靶受体，与普通 CHO 细胞形成功能区分。构建过程中采用 EF1α 启动子驱动表达，结合信号肽优化序列，显著提升受体膜定位效率，确保 90% 以上的 5-HT1B 受体定位于细胞膜表面。

形态与增殖：体外培养呈典型上皮样形态，贴壁生长，细胞呈多边形，排列规则，边界清晰，核质比正常。在 37℃、5% CO₂条件下，增殖稳定，传代周期约 24-30 小时，可适应含 10% 胎牛血清的 F12K 培养基，无需特殊营养因子，传代 50 次以上仍能维持 5-HT1B 受体高表达（表达量为亲本细胞的 30-50 倍），受体活性无明显衰减。

表达特征：5-HT1B 受体为 G 蛋白偶联受体（GPCR），膜表达量达（2.0-2.5）×10⁵分子 / 细胞（流式细胞术检测），对 5-HT 的亲和力高（解离常数 Kd≈3×10⁻⁹ M），激活后可有效抑制腺苷酸环化酶活性，降低胞内 cAMP 水平（5-HT 刺激后 cAMP 浓度下降 60%-70%），并激活 MAPK/ERK 通路，功能活性接近人脑组织来源的天然受体。

优势：5-HT1B 受体表达稳定，长期传代后功能活性波动＜10%，实验重复性优于原代神经细胞；遗传背景清晰，与 CHO-K1 细胞同源性高，便于通过亲本对照排除非特异性效应；仅表达 5-HT1B 单一受体亚型，无内源性 5-HT 受体干扰，实验结果特异性强；培养条件简单，可实现大规模扩增，适合高通量药物筛选。

局限性：作为非神经来源细胞，缺乏神经元te有的胞内环境，可能影响部分受体调控机制（如与神经元特异性蛋白的相互作用）；受体信号通路的物种差异（仓鼠 vs 人类）可能导致部分药物的活性评估存在偏差，需结合人源神经细胞验证；高表达受体可能导致配体敏感性过高，实验需严格控制药物浓度。

培养条件：常规使用含 10% 胎牛血清的 F12K 培养基，添加 2μg/mL 嘌呤霉素维持抗性筛选，37℃、5% CO₂培养箱中生长良好。传代时控制融合度在 70%-80%，采用温和消化方法分离细胞，避免机械损伤影响受体膜定位。进行功能实验前，建议用无血清培养基饥饿处理 16-24 小时，减少血清成分对 GPCR 信号的干扰。

质控与安全：定期通过流式细胞术检测受体膜表达量，放射性配体结合实验验证亲和力，确保受体功能稳定；STR 鉴定排除交叉污染，支原体检测阴性。冻存使用含 10% DMSO 的wan全培养基，液氮保存可维持活性 5 年以上，复苏后传代 2 次即可用于实验。