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详细介绍
细胞来源:源自人肺巨细胞癌组织,经体外传代培养、低转移能力特异性筛选及克隆化纯化,经实验验证(Transwell转移实验、裸鼠移植实验)确认其低转移潜能,确保细胞维持肺巨细胞癌核心特征及低转移表型。
形态特征:呈多形性,以巨细胞样形态为主,贴壁生长,细胞体积较大,胞质丰富,细胞核大且形态不规则,部分可见多核,显微镜下可见清晰的细胞轮廓,无杂细胞污染,生长状态稳定,增殖速率适中(低于高转移肺巨细胞癌细胞株)。
功能特性:具备稳定的增殖能力和低转移表型,体外侵袭、迁移能力显著低于高转移肺巨细胞癌细胞株,MMP-2、MMP-9等促转移因子表达水平较低,E-钙粘蛋白等抑转移因子表达相对较高,可模拟人低转移型肺巨细胞癌的正常生理代谢、生长规律及低转移特性,长期传代不发生明显的转移表型改变,符合相关实验与研发需求,可用于转移调控机制研究。
纯度与活性:细胞纯度≥95%,活率≥90%,经专用细胞消化液处理后可稳定传代,传代3-5代内细胞形态、活性及低转移表型保持稳定,无明显衰老或表型异常,可维持典型的该细胞株特征。
无菌检测:经支原体、细菌、真菌检测均为阴性,无外源污染物,可直接用于实验培养,保障实验结果的可靠性。
高纯度:采用专用细胞消化液结合低转移能力筛选技术,有效去除杂细胞、高转移细胞及正常肺组织细胞,确保细胞纯度,减少杂细胞对实验结果的干扰,尤其保证低转移表型的稳定性。
低转移表型稳定:优化的体外培养体系,全程严格控制温度、湿度及营养条件,最da程度保留细胞的低转移潜能,细胞侵袭、迁移能力稳定,批次间差异小,长期传代可稳定维持低转移特性,适配肿瘤转移相关实验。
操作便捷:提供完整的细胞培养说明书,配套专用肺癌细胞培养基,细胞复苏后可直接接种培养,无需复杂的预处理步骤,贴壁培养方式适配常规实验室条件,节省实验时间。
适用性广:可用于人肺巨细胞癌发病机制研究、低转移肿瘤特性探究、肿瘤转移调控机制研究(如PI3K/Akt信号通路、MMPs家族调控等)、抗肿瘤药物筛选与毒性评价、肿瘤转移相关指标检测、免疫分析实验及相关诊断试剂研发等多种实验场景,兼容常规细胞实验操作(如Western Blot、免疫荧光、Transwell侵袭/迁移实验、ELISA等)。
稳定性强:严格的质量控制体系,每批次细胞均进行活性、纯度、无菌性及转移表型检测,批内、批间差异小,重复实验结果一致性良好,有效降低实验误差,适配长期培养及各类科研实验需求。
细胞冻存状态:置于-80℃冰箱短期储存(1-3个月),长期储存(超过3个月)需转移至液氮(-196℃)中,避免反复冻融,防止细胞活性丧失、低转移表型异常,肺巨细胞癌细胞对冻融敏感,需严格遵循储存规范。
复苏后细胞:复苏后的细胞需立即接种至含预热专用培养基的培养瓶,置于37℃、5% CO₂培养箱中贴壁培养,避免长时间放置在室温或低温环境,影响细胞贴壁与活性,防止低转移表型改变。
配套培养基:专用肺癌细胞培养基需置于2-8℃冷藏避光储存,严禁冷冻,开封后建议在1个月内使用完毕,使用前需置于室温平衡30分钟,避免温度差异影响细胞生长及低转移表型稳定性。
细胞复苏:将冻存管从液氮或-80℃冰箱中取出,立即放入37℃水浴锅中快速解冻(1-2分钟),解冻后迅速用无菌吸管转移至含预热培养基的离心管中,离心(350 g,5分钟)后弃上清,重悬细胞后接种至培养瓶,全程无菌操作,动作轻柔,避免污染与细胞损伤,肺巨细胞癌细胞较为脆弱,需减少机械损伤,防止表型异常。
细胞培养:培养环境需严格控制为37℃、5% CO₂,湿度保持在95%以上;采用贴壁培养方式,培养基更换频率为每2-3天1次,可根据细胞密度适当调整;传代比例建议为1:2-1:3,传代时采用专用细胞消化液处理,消化时间控制在3-5分钟,避免消化过度损伤细胞,消化后需用专用终止液终止消化反应,确保细胞活性及低转移表型稳定。
样本处理:若用于转移相关检测、蛋白提取或药物作用实验,细胞收集后需全程低温处理(4℃),避免高温导致蛋白降解、活性丧失,确保实验结果准确性;细胞裂解液需按照说明书步骤配制,避免杂质干扰检测结果,尤其注意保护促/抗转移相关蛋白的活性。
无菌操作:全程严格遵循无菌实验规范,实验器具需提前灭菌,操作过程中避免手接触细胞及培养基,防止细菌、支原体污染;若发现培养基浑浊、细胞形态异常(如漂浮、变形、贴壁不良),需立即丢弃,避免污染扩散,肺巨细胞癌细胞抗污染能力较弱,需加强无菌管控。
表型维持:培养过程中可定期通过Transwell侵袭/迁移实验、Western Blot等方法检测细胞转移能力及相关分子(如MMP-2、MMP-9、E-钙粘蛋白等)表达水平,确保细胞维持低转移表型;若出现转移能力增强等表型异常,需及时调整培养条件或更换新鲜培养基。
细胞冻存:冻存细胞时,需使用专用冻存液(含10% DMSO+40%培养基+50%胎牛血清),缓慢降温(4℃ 30分钟→-20℃ 1小时→-80℃过夜→液氮长期储存),避免降温过快导致细胞内冰晶形成,损伤细胞结构,提升复苏成活率及后续低转移表型稳定性。
本产品仅用于科研用途,不用于临床诊断、治疗等医学用途;实验废弃物(含细胞的培养基、离心液、细胞裂解液等)需按照生物安全规范妥善处理,避免环境污染。
产品有效期详见外包装盒,超过有效期的细胞严禁使用;使用过程中若出现细胞活性下降、表型异常、污染等情况,可联系技术支持获取解决方案。
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