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V79中国仓鼠肺细胞系
产品型号:BY-1367
简要描述:

V79中国仓鼠肺细胞系,成纤维样,贴壁生长,突变率低且代谢活跃,对诱变剂敏感,适用于基因突变测试、细胞毒性评估及辐射效应研究。

  • 厂家实力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 质量保障

    Quality Assurance

详细介绍

V79中国仓鼠肺细胞系
V79中国仓鼠肺细胞系是源自中国仓鼠肺组织的永生化细胞模型,因成纤维样形态典型、自发突变率低且代谢活性强,成为基因突变测试、细胞毒性评估及辐射生物学研究的重要工具。其保留肺成纤维细胞的核心特征,兼具遗传背景稳定与环境响应敏感的双重优势,为体外遗传毒理学研究提供了标准化实验平台。
一、细胞来源与基本特性
  • 来源与永生化:该细胞系源自中国仓鼠成年肺组织,经原代培养与克隆筛选获得永生化株系,“V79" 命名源自早期克隆编号。原代细胞通过酶解法分离,经 50 代连续传代筛选出增殖稳定的单克隆,永生化过程未引入外源基因,主要依赖体外培养压力实现,全基因组测序显示其与原代肺成纤维细胞遗传相似度>97%,核型分析证实染色体数目为 2n=22,核型稳定性优于多数成纤维细胞系(传代 100 次核型畸变率<2%)。

  • 形态与增殖:体外培养呈典型成纤维样形态,贴壁生长时呈长梭形,胞体细长且胞质伸展明显,细胞排列呈平行或漩涡状;悬浮培养易聚集成团,故以贴壁培养为主。37℃、5% CO₂条件下,增殖周期约 24-28 小时,较 CHL 细胞更短,适应含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基,传代 150 次以上生长速率衰减<10%,自发突变率<1×10⁻⁶,冻存复苏后存活率超 88%。

  • 功能特征:核心优势在于低背景突变与高代谢活性:HGPRT(次黄piao呤鸟piao呤磷酸核糖转移酶)基因自发突变率极低(<5×10⁻⁷),便于基因突变事件的检测;Ⅰ 相代谢酶(如 CYP1A1)表达量较 CHL 细胞高 30%,可直接代谢部分前致突变物,无需额外添加代谢活化系统,符合 OECD 476 基因突变测试指南要求。同时,其对辐射损伤响应灵敏,γ 射线照射后 DNA 双链断裂标志物 γH2AX 焦点形成效率较普通细胞高 25%。

二、核心应用领域
  1. 基因突变测试

该细胞系是哺乳动物细胞基因突变试验的标gan模型,广泛用于化学品与环境污染物的致突变性评估。在 HGPRT 基因突变试验中,受试物处理后可通过 6 - 硫代鸟piao呤抗性克隆计数量化突变率,对甲基磺酸乙酯等标准诱变剂的检测灵敏度达 100%,结果变异系数<8%。在 TK 基因突变试验中,其可同时检测点突变与染色体畸变,为诱变剂作用机制分析提供更全面数据;在新药研发早期,其能快速筛选出具有潜在致突变风险的候选化合物,筛选效率较细菌回复突变试验提升 40%。
  1. 细胞毒性与代谢研究

因代谢活性强,V79 细胞成为细胞毒性与代谢交互作用研究的理想模型。通过中性红摄取法或 ATP 含量测定,可精准评估受试物的细胞毒性(IC50 测定误差<5%),对脂溶性化合物的代谢转化效率较 CHL 细胞高 20%,能更真实反映体内毒性效应。在纳米材料毒性研究中,其可通过胞内 ROS 水平检测反映纳米颗粒的氧化损伤潜力(如 50nm TiO₂颗粒可诱导 ROS 升高 2.1 倍),为纳米材料的构效关系分析提供依据。
  1. 辐射生物学效应研究

该细胞系对电离辐射与紫外线敏感,是辐射损伤机制研究的常用模型。在 γ 射线照射实验中,其存活曲线的 D0 值(平均致死剂量)为 1.2Gy,较 CHL 细胞低 30%,便于辐射敏感性分析;紫外线照射后,其核苷酸切除修复速率可通过溴脱氧尿苷掺入实验量化,为 DNA 损伤修复机制研究提供可视化平台。在辐射防护剂筛选中,其能快速评估候选药物对辐射诱导突变的抑制效应(如氨lin汀可使突变率降低 55%),加速辐射防护药物的研发进程。
三、培养方法
  • 贴壁培养操作

  1. 复苏:冻存管 37℃水浴 1 分钟解冻,转移至含 10mL 预热培养基(DMEM+10% 胎牛血清)的离心管,1000rpm 离心 5 分钟,重悬后接种至 T75 瓶,37℃、5% CO₂培养,24 小时贴壁率超 90%。

  1. 换液:接种 24 小时后首ci换液,去除未贴壁细胞,此后每 2 天换液一次,维持细胞密度在 1×10⁴-5×10⁴个 /cm²(密度过高会降低代谢活性)。

  1. 传代:融合度达 70%-80% 时,弃培养基,PBS 清洗 2 次,加 2mL 细胞解离液,37℃孵育 2 分钟,镜检细胞脱落后加 8mL 培养基终止,按 1:5 比例传代,避免过度融合导致形态改变。

  • 基因突变测试流程

  1. 细胞准备:对数期细胞以 2×10⁵个 / 皿接种 100mm 培养皿,培养 24 小时后加入受试物,处理 4-24 小时(依受试物特性调整)。

  1. 表达培养:去除受试物,新鲜培养基培养 7-10 天(让突变表型表达),期间每 3 天换液一次。

  1. 突变克隆计数:加入选择培养基(含 6 - 硫代鸟piao呤 5μg/mL),培养 10-14 天后计数抗性克隆,计算突变频率(每 10⁶存活细胞的突变克隆数)。

  • 冻存流程:取对数生长期细胞,1000rpm 离心 5 分钟,冻存液(70% DMEM+20% 胎牛血清 + 10% DMSO)重悬至 6×10⁶个 /mL,分装冻存管,程序降温盒 - 80℃过夜后移至液氮,保存期超 5 年,复苏后传代 1-2 次即可用于实验。

四、优势与局限性
  • 优势:自发突变率低(<1×10⁻⁶),基因突变检测准确性高;代谢活性强,可直接代谢多数前致突变物;对辐射与化学诱变剂敏感性高,检测下限低;传代稳定性好,150 代内生物学特性无显著改变;培养周期短,实验效率优于 CHL 细胞。

  • 局限性:成纤维细胞特性限制其在上皮细胞特异性毒性研究中的应用;部分水溶性极差的受试物需添加助溶剂(可能影响代谢活性);长期传代(>180 次)可能出现代谢酶活性下降(约 15%),需定期复苏早期冻存株。

五、研究意义
V79 细胞系的建立为哺乳动物细胞基因突变研究提供了高灵敏度模型,其低背景突变与高代谢活性的特性推动了遗传毒理学测试体系的标准化。在基础研究中,其助力阐明化学诱变剂与辐射的致突变机制,为 DNA 损伤修复通路研究提供关键工具;在应用领域,其作为国际认可的遗传毒性测试模型,支撑了数千种化学品的安全性评估,尤其在新药研发与环境污染物风险评价中发挥不可替代作用,是连接体外毒理学研究与人类健康风险评估的重要桥梁。

以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。

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