RNTEC/HL-025大鼠正常气管上皮细胞系
RNTEC/HL-025大鼠正常气管上皮细胞系作为源自大鼠气管黏膜组织的正常上皮细胞模型，因保留气管上皮的生理特性及分化功能，在气管黏膜屏障功能、气道损伤修复及呼吸系统疾病机制研究中具有重要价值，成为探究气管上皮生理功能及相关疾病的关键实验工具。
细胞特性与来源背景：该细胞系源自大鼠气管中段黏膜组织，经原代培养和纯化获得。细胞形态呈典型柱状，部分呈柱状纤毛样，胞体大小均匀（直径约 12-18μm，长度约 25-30μm），胞质呈弱嗜酸性，可见散在的分泌颗粒，约 8% 细胞顶端可见纤毛结构，细胞核呈椭圆形，位于细胞基底部，核仁小而清晰。生长方式为贴壁生长，呈单层有序排列，具有明显的接触抑制现象，传代后 24 小时贴壁率达 93%。核心参数表现出正常气管上皮细胞特征：倍增时间约 72 小时，连续传代 15 次后仍保持稳定的生物学特性；表面标志物表达du特，细胞角蛋白 18（CK18）阳性率达 96%，上皮细胞黏附分子（EpCAM）阳性率 94%，纤毛标志物 β- 微管蛋白 Ⅳ 阳性率 35%；具有正常的二倍体核型（染色体数 42 条），无染色体畸变；细胞间连接紧密，紧密连接蛋白 occludin、claudin-1 表达丰富，可形成完整的上皮屏障，跨上皮电阻值达 380Ω・cm²；能分泌黏液蛋白 MUC5AC，基础分泌量达 45ng/mL；无微生物污染，细胞纯度达 96%，保障实验结果的可靠性。
科研应用价值：在气管黏膜修复研究中，RNTEC/HL-025 细胞经表皮生长因子（EGF）处理 48 小时后，迁移速率增加 60%，增殖活性提升 45%，纤毛再生率达 30%，可模拟气管黏膜损伤后的修复过程，为解析气道上皮再生机制提供理想模型。
在呼吸系统疾病研究方面，该细胞经香烟烟雾提取物处理后，炎症因子 IL-6 分泌量增加 4.2 倍，肿瘤坏死因子 -α（TNF-α）表达量提升 3.8 倍，紧密连接蛋白 occludin 表达量下降 40%，可模拟慢性阻塞性肺疾病中气管上皮的损伤过程，适用于探究气道炎症的发病机制。
气道屏障功能研究领域，该细胞在脂多糖（LPS）刺激下，跨上皮电阻值下降 35%，黏液蛋白 MUC5AC 分泌量增加 2.5 倍，抗氧化酶 SOD 活性下降 30%，能很好地模拟细菌感染引起的气道屏障破坏，为评估气道保护药物的疗效提供实验基础。此外，该细胞与气道平滑肌细胞共培养时，平滑肌细胞收缩相关蛋白表达量增加 2.8 倍，可用于探究上皮 - 平滑肌相互作用在气道收缩中的调控机制。
培养与保存规范：推荐使用含 10% 胎牛血清的 Bronchial Epithelial Cell Growth Medium 培养基，添加 0.1ng/mL 表皮生长因子（EGF）、0.5μg/mL 氢化ke的松及 1% 抗生素混合液，培养环境为 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱。培养基需每 2-3 天更换一次，以维持细胞的分化状态。传代时，用 PBS 冲洗细胞 2 次，加入专用细胞解离液，37℃孵育 10-12 分钟，待细胞间隙增大后轻轻吹打使细胞脱落，传代比例为 1:2-1:3，每 6-7 天传代一次，避免过度传代导致纤毛分化能力下降。
冻存液采用培养基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液，细胞浓度调整为 2×10⁶个 /ml，经程序降温（-20℃1 小时→-80℃过夜→液氮保存）后，复苏存活率达 85% 以上，3-4 代内可恢复正常的生长和分泌功能。运输采用干冰冷冻运输或培养瓶活细胞运输，收到细胞后需静置培养 24 小时，更换培养基后观察细胞形态，确认无异常漂浮物且排列整齐后进行实验。该细胞系仅限科研使用，操作时需避免频繁更换培养环境，以防细胞形态及功能改变。
RNTEC/HL-025 大鼠正常气管上皮细胞系以其稳定的生理特性、典型的气管上皮功能及黏液分泌能力，在气管生物学研究与呼吸系统疾病机制探索中发挥着重要作用，为揭示气道疾病的发病机制和开发新型治疗药物提供了可靠的细胞模型。
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