LDG-2大耳山羊肾细胞系
LDG-2大耳山羊肾细胞系作为针对大耳山羊肾脏组织的特异性细胞模型，在牛科动物肾脏发育机制、排泄功能调控及肾脏疾病研究领域具有重要价值。它的建立为深入探究大耳山羊肾细胞的物质代谢规律、水盐平衡调节机制以及肾脏疾病的发生路径等提供了稳定的体外研究平台，对大耳山羊健康养殖和牛科动物肾脏生物学研究意义重大。
大耳山羊作为牛科常见的家畜，其肾脏具有适应山区丘陵环境的结构与功能，肾细胞作为肾脏的基本功能单位，在滤过血液、重吸收营养、排泄代谢废物等方面发挥核心作用。大耳山羊肾细胞的离子转运特性、代谢调节模式与其他牛科动物既有共性又有特异性，传统的肾脏研究多依赖整体动物实验，难以精准解析细胞层面的调控机制。原代肾细胞培养存在存活时间短、功能稳定性差、传代受限等问题，因此建立 LDG-2 大耳山羊肾细胞系，成为解析大耳山羊肾脏生理功能及病理变化、推动牛科动物肾脏研究的重要突破口。
LDG-2 大耳山羊肾细胞系的建立经过了严谨规范的操作流程。选取健康的新生大耳山羊，在无菌条件下取出肾脏皮质组织，去除被膜、血管及结缔组织。将肾组zhi剪切成 1mm³ 左右的小块，用含双抗的磷酸盐缓冲液反复冲洗以清除血液和杂质。加入肾细胞专用分散液，在 37℃条件下处理 30-40 分钟，期间每隔 8 分钟轻轻吹打一次使细胞充分分散。收集细胞悬液，经 70μm 细胞滤网过滤后，1000r/min 离心 8 分钟，弃上清，用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养液重悬细胞，接种于培养瓶中，置于 37℃、5% CO₂恒温培养箱中进行原代培养。培养初期，每 24 小时更换一次培养液以去除非贴壁细胞，待细胞汇合度达 80% 时进行传代，目前该细胞系已稳定传代至 45 代以上，细胞活力保持在 85% 以上。
该细胞系呈现典型的上皮样形态，细胞呈多边形或不规则圆形，排列紧密呈铺路石样，胞质丰富且含有细小的颗粒，细胞核呈圆形或椭圆形，位于细胞中央，具有较强的贴壁生长能力。生长特性研究显示，LDG-2 细胞在 DMEM 培养液中生长状态最佳，相较于其他培养液，细胞增殖速度提高约 20%；最适培养温度为 37℃，与哺乳动物体温一致；当胎牛血清浓度为 10% 时，细胞群体倍增时间最短，约为 60 小时。传代至 35 代后，细胞形态和增殖速率无明显变化，核型分析表明其染色体数目稳定（保持大耳山羊正常的 60 条染色体），遗传背景可靠，仍保留肾细胞的特性。
在功能特性方面，LDG-2 大耳山羊肾细胞系展现出丰富的肾细胞功能。免疫荧光检测发现，细胞高表达肾上皮细胞特异性标志物如细胞角蛋白 18、钠钾 ATP 酶，证实其肾上皮细胞属性。该细胞系具有一定的物质转运能力，对葡萄糖、氨基酸等营养物质的重吸收效率稳定，且能主动转运钠离子、钾离子等，这对研究大耳山羊肾脏的物质代谢和水盐平衡调节机制具有重要意义。同时，LDG-2 细胞在受到高浓度尿素刺激时，会出现渗透压调节相关基因表达上调的现象，如 AQP2 基因表达量显著增加，体现出良好的渗透压适应能力，为研究大耳山羊肾脏对体内代谢废物的耐受机制提供了理想模型。此外，该细胞系对常见的山羊肾脏病原体如肾棒状杆菌表现出敏感性，感染后会出现细胞活力下降、形态改变等特征，为研究病原体与肾细胞的相互作用提供了良好材料。
LDG-2 大耳山羊肾细胞系在多个研究领域应用广泛。在肾脏发育研究中，通过对该细胞系进行基因敲除实验，揭示了 E-cadherin 基因在大耳山羊肾上皮细胞分化中的关键调控作用；在比较生理学研究方面，利用该细胞系与其他牛科动物肾细胞系的对比分析，阐明了不同牛科动物肾脏功能的差异及调控机制；在兽医临床研究中，建立了基于该细胞系的药物筛选模型，已用于评估多种肾毒性药物对大耳山羊肾细胞的损伤效应。
作为稳定可靠的大耳山羊肾细胞模型，LDG-2 不仅填bu了牛科家畜肾细胞长期体外培养的空白，更为大耳山羊肾脏疾病防控和牛科动物肾脏功能研究提供了重要工具，推动了大耳山羊健康养殖技术的发展和牛科动物比较生理学研究的深入，对提升畜牧业养殖效益和学术研究水平具有重要意义。
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