MLE-12小鼠肺上皮细胞系
MLE-12小鼠肺上皮细胞系源自转基因小鼠的肺组织，是研究肺上皮细胞功能与肺部疾病的重要模型。该细胞系保留了肺泡 Ⅱ 型上皮细胞的关键特性，如分泌表面活性物质、参与气体交换调节等，为探索肺组织稳态维持、损伤修复及相关疾病机制提供了稳定的实验载体。
在显微镜下，MLE-12 细胞呈贴壁生长，形态以立方形或多边形为主，细胞排列紧密，宛如覆盖在培养表面的 “肺泡上皮层"。细胞边界清晰，胞质丰富，内含特征性的板层小体 —— 这是肺泡 Ⅱ 型细胞储存表面活性物质的关键结构，通过电镜可观察到多层膜结构的板层小体。细胞直径约 10-15 微米，核呈圆形或椭圆形，位于细胞中央，核仁清晰。该细胞增殖速度中等，倍增时间约 48-72 小时，当融合度达到 80% 左右时需进行传代，传代时用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 混合液消化 3-5 分钟，按 1:3-1:5 比例接种，传代周期稳定，可在体外长期培养仍保持肺上皮细胞的表型。
培养 MLE-12 细胞需模拟肺部生理环境。基础培养基常选用 DMEM/F12 混合培养基，该培养基营养成分均衡，能满足肺上皮细胞的代谢需求；添加 2% 胎牛血清（FBS）—— 相较于其他细胞系，低血清浓度更利于维持其上皮特性，同时需加入胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒（ITS）混合添加剂，为细胞提供必需的微量元素和生长因子。培养箱需维持在 37℃、5% CO₂的条件下，pH 值控制在 7.2-7.4，通过培养基中的酚红指示剂可直观监测酸碱变化。值得注意的是，该细胞对培养环境中的氧气浓度较为敏感，低氧条件（如 5% 氧气）可模拟肺部缺氧病理状态，用于研究缺氧对细胞功能的影响。
在肺上皮细胞功能研究中，MLE-12 细胞系是解析表面活性物质合成与分泌机制的核心工具。表面活性物质由肺泡 Ⅱ 型细胞分泌，主要成分为磷脂和表面活性蛋白（如 SP-A、SP-B、SP-C、SP-D），其作用是降低肺泡表面张力，防止肺泡塌陷。MLE-12 细胞保留了合成和分泌这些物质的能力，科研人员通过检测不同刺激条件下表面活性蛋白的表达水平和磷脂含量，可探索其调控机制。例如，糖皮质激素可上调 MLE-12 细胞中 SP-B 的表达，这一过程与糖皮质激素受体介导的转录激活相关，为新生儿呼吸窘迫综合征的激素治疗提供实验依据。
在肺部疾病模型研究中，MLE-12 细胞系可模拟多种肺部疾病的病理状态。在急性肺损伤（ALI）模型中，用脂多糖（LPS）或肿瘤坏死因子 -α（TNF-α）刺激细胞，可诱导细胞分泌炎症因子（如 IL-6、IL-8），模拟炎症状态下肺上皮细胞的反应，研究炎症信号通路（如 NF-κB、MAPK）的激活机制；在肺纤维化模型中，转化生长因子 -β1（TGF-β1）可诱导 MLE-12 细胞向肌成纤维细胞转化，观察到 α- 平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达增加、胶原蛋白分泌增多，模拟肺纤维化过程中的上皮 - 间质转化（EMT）现象，为研究肺纤维化的分子机制提供体外模型。
在呼吸系统药物筛选领域，MLE-12 细胞系是评估药物对肺上皮细胞保护作用的重要模型。通过检测药物对细胞存活率、炎症因子分泌、表面活性物质合成等的影响，可筛选有效的候选药物。例如，中药成分huang芩苷可抑制 LPS 诱导的 MLE-12 细胞炎症因子释放，其机制与抑制 NF-κB 信号通路激活相关，这一发现为急性肺损伤的中药治疗提供了实验支持。此外，该细胞系还可用于评估吸入性药物的毒性，通过检测药物对细胞形态、活性及功能的影响，判断药物的肺部安全性，为药物研发提供参考。
在肺部感染研究中，MLE-12 细胞系可用于模拟病毒或细菌感染肺部的过程。流感病毒、肺炎链球菌等病原体可侵袭肺上皮细胞，利用 MLE-12 细胞可研究病原体的感染机制、细胞的抗病毒或抗菌免疫反应。例如，流感病毒感染 MLE-12 细胞后，可诱导细胞产生干扰素（IFN），激活抗病毒信号通路，通过检测这些信号分子的表达变化，可探索病毒与宿主细胞的相互作用，为抗病du药物的研发提供靶点。
前沿研究中，MLE-12 细胞系的应用不断拓展。在类器官构建中，将其与肺成纤维细胞、内皮细胞共培养，可形成三维 “肺类器官"，更真实地模拟肺组织的结构和功能，用于研究肺部疾病的发生发展及药物的作用效果；在单细胞测序研究中，通过解析细胞在不同病理状态下的基因表达变化，可发现新的疾病标志物和治疗靶点；在基因编辑研究中，利用 CRISPR 技术调控 MLE-12 细胞中特定基因的表达，可深入探究这些基因在肺上皮细胞功能及肺部疾病中的作用，为肺部疾病的精准治疗提供实验基础。
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