LA795小鼠肺腺癌细胞系
LA795小鼠肺腺癌细胞系源自 T739 近交系小鼠的自发性肺腺癌组织,1979 年首ci分离建立,因能稳定模拟肺腺癌的侵袭转移特性,成为肺癌研究领域的经典模型,在肿瘤转移机制解析、抗肿瘤药物研发及肺癌发病机制研究中应用广泛。
该细胞系呈现典型的肺腺癌细胞形态与表型特征。显微镜下,细胞呈多边形或上皮样,贴壁生长时排列紧密,形成不规则的细胞单层,部分区域可见重叠生长,核质比高,细胞核呈卵圆形或不规则形,核仁明显且数量较多,胞质丰富,可见嗜酸性颗粒,这些形态特征与人类肺腺癌的病理切片表现高度吻合。免疫表型分析显示,细胞高表达肺腺癌相关标志物细胞角蛋白 18(CK18)和癌胚抗原(CEA),同时表达表皮生长因子受体(EGFR),这种表型特征使其能模拟人类 EGFR 阳性肺腺癌的生物学行为,为靶向治疗研究提供理想模型。
体外培养体系中,LA795 细胞展现出稳定的生长性能与侵袭潜能。最适培养条件为含 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 培养基,在 37℃、5% CO₂环境下,传代周期约 48-72 小时,对数生长期细胞活力可达 90% 以上。其显著特点是具有强侵袭能力,在 Transwell 侵袭实验中,24 小时内穿透 Matrigel 基质膜的细胞数是正常肺上皮细胞的 8 倍以上,且能分泌高水平的基质金属蛋白酶(MMP-2 和 MMP-9),这些酶通过降解细胞外基质促进侵袭,这种特性使其成为研究肺癌侵袭机制的理想工具。此外,该细胞系冻存复苏效率高,液氮冻存后复苏存活率超过 85%,连续传代 30 次后,形态与功能特性无明显改变,保证了实验的稳定性。
LA795 细胞的核心价值体现在其强转移潜能与肺靶向定植特性。作为肺腺癌细胞系,其保留了肿瘤细胞的恶性增殖与转移能力,在软琼脂集落形成实验中,集落形成率达 45%,显著高于其他肺癌细胞系。更重要的是,该细胞具有du特的肺转移倾向 —— 通过尾静脉接种于 T739 小鼠后,7-10 天即可在肺部形成明显转移灶,转移率高达 90%,而其他器官转移率不足 10%,这种肺靶向转移特性与人类肺腺癌的远处转移模式高度一致,为研究肺癌转移的器官特异性机制提供了不可替代的模型。
在肺癌发病机制研究中,LA795 细胞为解析恶性增殖信号通路提供了关键线索。基因组分析显示,该细胞系存在 EGFR 基因的扩增与过度表达,其蛋白水平是正常肺上皮细胞的 6 倍以上,通过持续激活下游 PI3K/Akt 和 MAPK/ERK 信号通路,推动细胞周期进程并抑制凋亡。同时,细胞中抑癌基因 PTEN 的表达量下调 70%,进一步增强 PI3K/Akt 通路的活性,这种 “EGFR 激活 + PTEN 缺失" 的分子特征与人类肺腺癌的常见突变谱高度吻合,为开发 EGFR 靶向药物提供了理论依据。
在转移机制研究中,LA795 细胞的应用贯穿转移 cascade 的各个阶段。研究发现,细胞高表达趋化因子受体 CXCR4,其配体 CXCL12 在小鼠肺部高表达,这种 “受体 - 配体" 的特异性结合引导肿瘤细胞向肺部定向迁移,使用 CXCR4 拮抗剂处理后,肺转移灶数量减少 60%,证实其在转移定植中的关键作用。此外,该细胞可分泌血管内皮生长因子(VEGF),在转移灶周围诱导新生血管形成,免疫荧光显示转移灶内微血管密度是正常肺组织的 5 倍以上,这种血管生成能力为转移灶的生长提供营养支持。
在体内模型构建中,LA795 细胞可建立多种肺癌模型。皮下接种可形成实体瘤模型,肿瘤生长速度均匀,6 周后平均体积可达 1000mm³,适用于评估药物对原发灶的抑制作用;尾静脉接种建立的肺转移模型,可动态观察转移灶的形成过程,通过活体成像技术监测转移灶的数量与大小变化;而肺原位接种模型则能更真实地模拟肺癌的原发微环境,肿瘤在肺组织内呈浸润性生长,伴随胸膜侵犯,与人类肺癌的临床病理特征高度一致。
在药物研发领域,LA795 细胞是评估抗肿瘤药物 efficacy 的重要工具。体外实验显示,EGFR 抑制剂可显著抑制其增殖,半数抑制浓度(IC50)达 0.5μM,且能阻断 Akt 和 ERK 的磷酸化,证实靶向 EGFR 的有效性。同时,该细胞系可用于筛选抗转移药物,如从中药中提取的皂苷类化合物,能抑制 MMP-2 和 MMP-9 的活性,使 Transwell 侵袭细胞数减少 70%,在肺转移模型中,可使转移灶数量降低 50%,为开发抗转移药物提供了实验依据。
随着精准医学的发展,LA795 细胞系与基因编辑技术结合产生了更精准的研究模型。通过 CRISPR/Cas9 技术敲除 EGFR 基因后,细胞增殖速率下降 60%,肺转移能力几乎wan全丧失,证实 EGFR 在肿瘤进展中的核心作用;而恢复 PTEN 基因表达则可显著抑制细胞侵袭,使裸鼠移植瘤体积缩小 50%,为基因治疗策略提供了实验支持。这些基因工程化细胞系进一步拓展了 LA795 模型的应用边界,使其在肺癌研究中持续发挥重要作用。
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