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MS1小鼠胰岛内皮细胞系
产品型号:BY-0627
简要描述:

MS1小鼠胰岛内皮细胞系源自 C57BL/6 小鼠胰岛,贴壁生长,保留内皮细胞特性,参与胰岛血管构建,是糖尿病血管病变及胰岛微环境研究的常用模型。

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详细介绍

MS1小鼠胰岛内皮细胞系

MS1小鼠胰岛内皮细胞系源自 C57BL/6 小鼠胰岛的微血管内皮细胞,因保留特性且血管形成能力稳定,成为胰岛生物学与糖尿病研究的关键模型。其兼具内皮细胞的通用特征与胰岛微血管的特异性功能,为解析胰岛血管网络构建、胰岛 - 血管相互作用及糖尿病血管病变机制提供了理想工具。

显微镜下,MS1 细胞呈贴壁生长,形态以梭形和多边形为主,宛如铺展在培养皿上的 “星芒状网络"。细胞直径约 12-18 微米,胞质丰富且含少量 Weibel-Palade 小体 —— 这是内皮细胞储存 vWF 因子的典型结构,经免疫荧光染色呈点状分布;细胞核呈卵圆形,位于细胞中央,核质比约 1:2.5,染色质均匀细腻,核仁不明显,展现出稳定的增殖特性。细胞倍增时间约 48-56 小时,较其他内皮细胞系稍慢,当融合度达到 70% 时需传代,传代时用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 溶液处理 1-2 分钟,按 1:3 比例接种,连续培养 40 代仍能保持内皮细胞标志物的高表达。
培养 MS1 细胞需模拟胰岛微血管微环境。基础培养基选用 DMEM(低糖),其低糖特性可避免高糖对胰岛内皮细胞的功能损伤;添加 10% 胎牛血清提供生长因子,其中血管内皮生长因子(VEGF)前体对维持细胞的血管形成能力至关重要。培养环境需严格控制在 37℃、5% CO₂,pH 值稳定在 7.3-7.5,通过培养基中的酚红指示剂监测酸碱变化。与主动脉内皮细胞相比,MS1 细胞对胰岛素更敏感,添加 100 nM 胰岛素可使细胞增殖率提高 30%,血管样结构形成能力增强 2 倍,这与胰岛微环境中高胰岛素浓度的生理特征高度吻合。
在胰岛血管构建机制研究中,MS1 细胞系是解析血管新生调控网络的核心模型。其在 Matrigel 基质上可自发形成管腔样结构 —— 接种后 6 小时出现细胞聚集,12 小时形成线性排列,24 小时构建完整的网状血管结构,这一过程与体内胰岛血管的分支形成高度一致。实验显示,该过程依赖 VEGF-A/VEGFR2 信号轴的激活:VEGF-A 处理可使细胞的 VEGFR2 磷酸化水平上调 5 倍,管腔形成数量增加 3 倍;而 VEGFR2 抑制剂处理则会wan全阻断血管形成,证实其在胰岛血管发生中的驱动作用。此外,MS1 细胞表达高丰度的血小板衍生生长因子 - BB(PDGF-BB),可招募周细胞覆盖血管外壁,共同构建稳定的血管网络,敲除 PDGF-BB 后周细胞覆盖率下降 60%,血管结构稳定性降低 50%,揭示胰岛血管成熟的关键调控机制。
在糖尿病研究中,MS1 细胞系能模拟高糖环境下的胰岛血管病变。高糖(30 mM)处理 72 小时后,细胞出现明显功能异常:血管样结构形成率下降 50%,屏障功能受损(通透性增加 40%),同时促炎因子 IL-6 分泌量上调 3 倍,黏附分子 ICAM-1 表达量增加 2 倍。这些变化与糖尿病患者胰岛微血管的病理特征高度一致 —— 毛细血管基底膜增厚、血管通透性增加导致胰岛水肿,最终影响 β 细胞功能。研究发现,高糖通过激活细胞内 PKCβ/NF-κB 通路诱发上述病变,使用 PKCβ 抑制剂可使细胞功能恢复 60%,为糖尿病血管并发症的靶向治疗提供了实验依据。此外,该细胞系可与胰岛 β 细胞共培养构建 “胰岛 - 血管" 交互模型,高糖条件下共培养体系中 β 细胞的胰岛素分泌量下降 40%,而改善 MS1 细胞功能(如添加 VEGF)可使 β 细胞分泌功能恢复 50%,证实胰岛血管功能与 β 细胞存活的密切关联。
在药物筛选领域,MS1 细胞系是评估促血管新生与血管保护药物的理想模型。其在 Matrigel 上的管腔形成实验可快速筛选促血管生成药物,例如,人参皂gān Rg3 处理可使血管分支点数增加 40%,管腔长度延长 30%,通过 ImageJ 软件量化分析药物活性。在糖尿病血管保护药物筛选中,该细胞系能有效反映药物的多靶点作用,如黄连素不仅抑制高糖诱导的 IL-6 分泌(下降 70%),还可上调抗氧化酶 SOD 表达(增加 2 倍),同时改善细胞屏障功能,体现多通路协同保护效应。此外,MS1 细胞系可用于评估药物对胰岛血管 -β 细胞交互作用的影响,如姜黄素处理可使共培养体系中 β 细胞的胰岛素分泌量增加 50%,优于单纯作用于 β 细胞的药物效果,为糖尿病治疗药物的研发提供了更全面的评价体系。
在胰岛移植研究中,MS1 细胞系可优化移植胰岛的血管重建效率。将 MS1 细胞与胰岛共同包埋于海藻酸钠微球中移植,可见移植物内血管新生速度较单纯胰岛移植加快 2 倍,术后 7 天即可形成功能性血管网络,胰岛素分泌功能恢复时间缩短 50%。实验证实,MS1 细胞分泌的肝细胞生长因子(HGF)可促进胰岛 β 细胞存活,使移植后 β 细胞存活率提高 40%,这一 “胰岛 - 血管" 共移植策略为提高胰岛移植成功率提供了新方案。此外,该细胞系可用于研究移植后的免疫排斥反应,激活的 T 细胞可通过识别 MS1 细胞表面的 MHCⅠ 类分子引发免疫攻击,导致血管破坏,而使用 CTLA4-Ig 阻断 T 细胞激活可使移植物血管存活率提高 60%,为移植免疫调控提供了关键证据。
培养过程中,MS1 细胞的功能稳定性需重点维护。长期高糖培养(超过 10 代)会导致细胞出现不可逆的功能退化,建议定期在正常糖浓度培养基中恢复培养。检测细胞纯度时,通过流式细胞术检测 CD31、vWF 等内皮标志物,确保阳性率不低于 95%,同时排除平滑肌细胞、成纤维细胞等杂细胞污染。冻存时使用含 10% DMSO、20% 血清的冻存液,梯度降温至 - 80℃后转入液氮保存,复苏存活率可达 75% 以上,复苏后需传代 1-2 次再用于血管形成实验,以恢复细胞活性。

前沿研究中,该细胞系的应用持续拓展。单细胞测序分析发现,MS1 细胞存在两个功能亚群 —— 增殖亚群(占 45%)和功能亚群(占 55%),功能亚群高表达血管形成相关基因,为理解胰岛内皮细胞的异质性提供了新视角;在类器官构建中,将其与胰岛 β 细胞、间充质细胞共培养,可形成具有完整血管网络的 “胰岛类器官",其胰岛素分泌对葡萄糖的响应性较无血管类器官提高 3 倍,更接近体内胰岛功能;在基因编辑领域,通过 CRISPR 技术敲入荧光蛋白基因,可实时追踪移植后血管新生过程,为评估促血管生成药物的体内效果提供可视化工具。

以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。

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