T84人结直肠癌细胞系
T84人结直肠癌细胞系是研究结直肠癌及肠屏障功能的重要模型，因具备典型的肠上皮细胞极性和稳定的屏障特性，在结直肠癌发病机制、肠黏膜屏障功能及药物转运研究领域应用广泛，为解析结直肠癌的 “恶性增殖 - 屏障破坏" 双重特征提供了可靠工具。
来源与背景：该细胞系于 1977 年从一名 61 岁男性结直肠癌患者的肺转移灶中分离建立，虽源自转移灶，但保留了丰富的肠上皮细胞特征。与其他结直肠癌细胞系（如 Caco-2）相比，其更贴近临床结直肠癌的上皮表型，尤其适合研究结直肠癌对肠屏障功能的影响，为探索 “肿瘤细胞 - 肠黏膜微环境相互作用" 提供了理想样本，填bu了结直肠癌与肠屏障关联研究模型的空白。其明确的转移来源和长期传代稳定性，使其成为结直肠癌转移与肠屏障功能研究的重要桥梁。
细胞特性：形态上呈柱状上皮样，贴壁生长，可形成连续的单层细胞，细胞排列紧密，呈极性分布，顶端可见微绒毛结构，细胞质丰富，细胞核呈椭圆形，位于细胞基底部，具有肠上皮细胞的典型形态特征。核心特性为强极性与屏障功能，体外培养可形成高电阻值的单层细胞屏障，跨上皮电阻（TEER）可达 1000-1500Ω・cm²，显著高于多数结直肠癌细胞系，紧密连接蛋白（如 occludin、claudin-1）表达丰富，能有效限制溶质自由通过，模拟正常肠黏膜的屏障功能；肠上皮标志物表达，高表达细胞角蛋白 20（CK20）、黏蛋白 1（MUC1），部分表达绒毛蛋白（villin），符合结肠上皮细胞的分子表型；中等增殖与侵袭能力，体外培养时细胞倍增时间约 72-80 小时，克隆形成率约 35%，低于高度恶性的结直肠癌细胞系（如 HCT116），Transwell 实验中侵袭能力中等，能分泌少量基质金属蛋白酶（MMP-7），模拟结直肠癌转移过程中的侵袭特性。传代时采用常规消化液处理，传代比例 1:2-1:3，因细胞连接紧密，需适当延长消化时间，连续传代 50 次后仍保持极性和屏障功能，但 TEER 值可能下降 10%-15%。
培养条件：适宜采用含 10% 胎牛血清的 DMEM/Ham's F12 混合培养基，添加 2mM 谷an酰胺和 1% 抗菌混合液以维持细胞活性。培养环境需控制在 37℃、5% CO₂饱和湿度，每 2-3 天更换一次培养基，细胞密度维持在 50%-80% 之间，过度汇合会影响细胞极性。与其他肿瘤细胞系不同，其对培养表面的适应性较强，在胶原包被的培养板上生长更佳，能增强细胞极性和屏障功能。传代时用常规消化液处理 5-6 分钟，轻柔吹打避免损伤细胞极性结构，冻存液推荐含 10% DMSO 的胎牛血清，复苏后存活率可达 80% 以上，但屏障功能需在复苏后 3-5 天才能wan全恢复。
检测鉴定：经微生物筛查，无支原体、细菌、真菌及常见病毒污染，符合实验细胞质量标准。免疫荧光检测显示，紧密连接蛋白 occludin 在细胞顶端呈线性表达，CK20 阳性，CK7 阴性，符合结肠上皮细胞的免疫表型特征。跨上皮电阻测定证实其高 TEER 值，荧光素异硫氰酸酯（FITC）标记的右旋糖酐通透性实验显示其低通透性，验证其屏障功能。染色体核型分析呈现亚三倍体核型，存在 17 号染色体三体、8 号染色体缺失等异常，与临床结直肠癌转移患者的遗传学改变部分吻合。功能验证实验中，经肿瘤坏死因子 -α（TNF-α）处理后，TEER 值显著下降，紧密连接蛋白表达减少，模拟炎症或肿瘤微环境对肠屏障的破坏；裸鼠腹腔接种后可侵袭肠壁组织，病理检查可见肿瘤细胞破坏肠黏膜屏障，证实其体内侵袭特性。
应用领域：在发病机制研究中，该细胞系常用于解析结直肠癌对肠屏障功能的影响，研究发现其分泌的某些细胞因子（如 IL-6）可降低自身及邻近正常肠上皮细胞的 TEER 值，破坏紧密连接结构，为理解结直肠癌如何突破肠屏障提供了关键线索。在药物转运研究中，是评估药物经肠吸收的常用模型，因其具备完整的屏障功能和转运蛋白表达，可用于研究药物的跨上皮转运机制，如某些口服药物通过该细胞系的转运效率与体内吸收情况高度相关，为药物剂型优化提供实验依据。在药物筛选方面，适用于评估结直肠癌治疗药物对肠屏障功能的影响，通过检测药物对 TEER 值及紧密连接蛋白的影响，筛选既能抑制肿瘤生长又不破坏肠屏障的候选药物，如某些靶向 EGFR 的抑制剂对其屏障功能影响较小。此外，该细胞系可用于研究结直肠癌转移与肠黏膜免疫的相互作用，与巨噬细胞共培养可诱导其屏障功能下降，促进肿瘤细胞侵袭，为解析转移微环境的形成机制提供实验基础。
该细胞系的优势在于能稳定维持肠上皮极性和屏障功能，为研究 “结直肠癌发生发展中肠屏障的动态变化" 提供了理想模型。通过与其他低屏障功能的结直肠癌细胞系的对比实验，可清晰区分结直肠癌不同阶段的屏障功能差异，为结直肠癌的早期诊断和治疗提供实验依据。
总之，T84 人结直肠癌细胞系凭借其典型的肠上皮特征和稳定的屏障功能，成为连接结直肠癌研究与肠屏障功能研究的重要工具，为解析结直肠癌的发病机制、开发新型治疗药物及保护肠屏障功能提供了坚实的实验基础。
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