MML小鼠肺成纤维细胞系
在呼吸系统疾病研究与组织修复机制探索领域,MML小鼠肺成纤维细胞系凭借其典型的成纤维细胞特征与稳定的体外功能,成为研究肺纤维化、肺部炎症及肺组织再生的重要实验模型,为解析肺部疾病的病理生理过程提供了可靠的细胞平台。
细胞特性与来源背景:该细胞系源自 C57BL/6 小鼠的正常肺组织,经原代培养与纯化建立。细胞形态呈现典型的成纤维细胞特征,多为长梭形或星形,胞质丰富,细胞核呈椭圆形,位于细胞中央,核仁清晰。细胞排列疏松,生长过程中呈放射状或漩涡状分布,具有明显的贴壁生长特性,传代后 24 小时贴壁率达 95%。核心参数表现稳定:qun体倍增时间约 24-28 小时,连续传代 40 次后仍保持正常的二倍体核型(40 条染色体,XX 性别决定);成纤维细胞特异性标志物波形蛋白(Vimentin)免疫荧光染色呈强阳性,而角蛋白(Cytokeratin)染色阴性,纯度达 96%;无细菌、真菌、支原体及病毒污染,保障了实验结果的可靠性。
科研应用价值:在肺纤维化机制研究中,MML 细胞在转化生长因子 -β1(TGF-β1)诱导下可向肌成纤维细胞转化,α- 平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达量显著上调,胶原分泌量增加 2.3 倍,模拟了肺纤维化过程中的关键病理变化,为筛选抗纤维化药物提供了理想模型。在肺部炎症研究方面,该细胞系对脂多糖(LPS)刺激敏感,可大量分泌肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)、白细胞介素 - 6(IL-6)等炎症因子,24 小时分泌量分别达 85pg/ml 和 120pg/ml,适用于探究肺部炎症的调控网络。此外,在肺组织修复研究中,MML 细胞具有促进上皮细胞迁移的能力,划痕愈合实验显示其条件培养基可使肺上皮细胞 24 小时愈合率提高 40%,为研究肺损伤后的修复机制提供了重要工具。
培养与保存规范:推荐使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 高糖培养基,添加 1% 抗生素混合液预防污染,培养环境为 37℃、5% CO₂饱和湿度的恒温培养箱。传代时采用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化,待细胞形态变圆、间隙增大时终止消化,传代比例为 1:3-1:5,每 3-4 天传代一次,避免细胞融合度过高(超过 80%)导致的功能改变。冻存液配方为基础培养基 + 10% DMSO+20% FBS,经程序降温后存入液氮,复苏后细胞存活率可达 90% 以上,3 代内即可恢复正常增殖能力。运输方式可选择干冰冻存管运输或 T-25 培养瓶活细胞运输,收到细胞后需立即更换培养基,观察 24 小时确认细胞状态良好后再进行后续操作。该细胞系仅限科研使用,禁止用于临床诊疗相关研究。
MML 小鼠肺成纤维细胞系以其稳定的生物学特性、明确的功能表型及便捷的培养条件,在肺部疾病基础研究与药物研发中发挥着重要作用,为揭示肺组织稳态调控机制与开发新型治疗策略提供了有力支撑。
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