J774A.1小鼠单核巨噬细胞系
J774A.1小鼠单核巨噬细胞系源自 BALB/c 小鼠的腹水瘤，是通过克隆化培养建立的连续细胞系，因保留了单核巨噬细胞的典型功能特征，在炎症反应、病原体清除、免疫调节及吞噬机制研究中被广泛应用。
该细胞系具有典型的单核巨噬细胞形态与表型特征。显微镜下，细胞呈不规则形或阿米巴样，以贴壁生长为主，部分细胞呈半悬浮状态，细胞体积较大，直径约 15-25μm，核质比适中，细胞核呈肾形或马蹄形，染色质疏松，可见 1-2 个明显核仁，胞质丰富，含大量嗜天青颗粒和空泡，这些形态特征与体内成熟巨噬细胞高度一致。免疫表型分析显示，细胞高表达巨噬细胞特异性标志物 CD11b、F4/80 和 CD68，同时表达模式识别受体如 Toll 样受体 4（TLR4）和清道夫受体 A（SR-A），这些受体是巨噬细胞识别病原体和异物的关键分子基础，使其能对脂多糖（LPS）等病原体相关分子模式（PAMPs）产生强烈应答。
体外培养体系中，J774A.1 细胞展现出稳定的生长性能与功能活性。最适培养条件为含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基，在 37℃、5% CO₂环境下，传代周期约 48 小时，对数生长期细胞活力可达 90% 以上。其显著特点是具有强贴壁能力，传代时需用细胞解离液处理，处理时间较其他细胞长（约 5-8 分钟），以确保细胞wan全脱落。该细胞系对营养条件要求较低，在血清浓度降至 5% 时仍能保持正常增殖，且能在无血清培养基中短期存活（3-5 天）。冻存复苏性能优异，液氮冻存后复苏存活率超过 85%，连续传代 50 次后，形态与功能特性无明显改变，保证了实验的稳定性与可重复性。
J774A.1 细胞的核心价值体现在其强大的吞噬功能与炎症应答能力。作为专职吞噬细胞，其可高效吞噬多种颗粒物质，如乳胶珠、细菌、凋亡细胞等，在荧光标记乳胶珠吞噬实验中，30 分钟内吞噬率可达 60% 以上，2 小时达 90%，吞噬过程依赖于细胞骨架的重排，微管抑制剂秋水仙素可使其吞噬率下降 70%，证实微管在吞噬泡形成中的关键作用。在病原体清除实验中，该细胞对大肠杆菌等具有强效吞噬与杀伤能力，吞噬后 1 小时内细菌存活率下降 80%，同时伴随活性氧（ROS）和一氧化氮（NO）的大量产生，这些效应分子是其杀菌的重要机制。
在炎症反应机制研究中，该细胞系是探索炎症信号通路的理想模型。经 LPS 刺激后，J774A.1 细胞可迅速激活 NF-κB 和 MAPK 信号通路，表现为 IκBα 磷酸化降解和 p38、ERK1/2 磷酸化水平升高，6 小时内促炎细胞因子如 TNF-α、IL-6 和 IL-1β 的 mRNA 水平上调 50-100 倍，蛋白分泌量达 μg 级，这种强烈的炎症应答模拟了体内巨噬细胞对细菌感染的反应过程。研究发现，TLR4 是介导 LPS 应答的关键受体，敲除 TLR4 后，LPS 诱导的细胞因子分泌减少 90% 以上，证实其在革兰氏阴性菌感染引发炎症中的核心作用。
在免疫调节研究中，J774A.1 细胞可通过分泌细胞因子调节其他免疫细胞的功能。与 T 淋巴细胞共培养时，其分泌的 IL-12 可促进 Th1 细胞分化，使 IFN-γ 分泌增加 5 倍；而在 IL-4 刺激下，该细胞可极化为 M2 型巨噬细胞，高表达 IL-10 和 TGF-β，抑制 T 细胞增殖，这种表型可塑性使其能模拟体内巨噬细胞的双向免疫调节作用 —— 既启动抗感染免疫，又参与免疫耐受维持。此外，其可通过表达 PD-L1 与 T 细胞表面 PD-1 结合，诱导 T 细胞耗竭，这种负向调节机制在肿瘤微环境研究中具有重要意义。
在病原体感染机制研究中，J774A.1 细胞是多种胞内病原体的易感宿主。其对李斯特菌、结核分枝杆菌等具有高度易感性，细菌可在细胞内存活并复制，如李斯特菌感染后 6 小时，胞内细菌数量增加 10 倍以上，且能逃逸吞噬体进入胞质繁殖，这种感染模型为研究胞内菌的致病机制提供了理想平台。通过分析细胞对病原体的识别、吞噬及杀伤过程，可揭示宿主抗胞内菌感染的免疫机制，如发现自噬通路可清除胞内结核分枝杆菌，自噬抑制剂处理后，胞内细菌存活量增加 2 倍，证实自噬在抗感染中的作用。
在药物筛选领域，J774A.1 细胞是评估抗炎药物和抗感染药物活性的重要工具。体外实验显示，非甾体抗炎药可抑制 LPS 诱导的 PGE2 合成，IC50 为 10μM；而 TLR4 拮抗剂则能阻断 LPS 引起的 NF-κB 激活，使 TNF-α 分泌减少 80%。针对巨噬细胞吞噬功能的药物筛选中，发现某些天然化合物可增强其对肿瘤细胞的吞噬能力，吞噬率提升 40%，为肿liu治疗药物研发提供了线索。
随着基因编辑技术的应用，J774A.1 细胞系被赋予了更精准的研究功能。通过 CRISPR/Cas9 技术敲除其 NLRP3 基因，可构建炎症小体缺陷模型，用于验证 NLRP3 炎症小体在炎症反应中的作用；而导入荧光标记的吞噬相关蛋白（如 LC3），则可实时观察吞噬与自噬的动态过程，这种基因工程化细胞系进一步拓展了其在免疫生物学和细胞生物学研究中的应用范围。
详细介绍
产品咨询
联系我们
