ALLRPISC2012大鼠胰岛干细胞系
ALLRPISC2012大鼠胰岛干细胞系作为源自大鼠胰岛组织的成体干细胞模型,因具备显著的胰岛细胞分化潜能及稳定的干细胞特性,在胰岛发育机制、糖尿病病理及细胞治疗研究中具有重要价值,成为探究胰岛干细胞功能及相关疾病治疗的关键实验工具。
细胞特性与来源背景:该细胞系源自大鼠胰岛组织,经胶原酶消化结合流式分选(基于 Ngn3 标志物)获得。细胞形态呈圆形或椭圆形,胞体较小,直径约 10-15μm,胞质透亮,可见少量颗粒,细胞核呈圆形,核质比高,核仁明显。生长方式为贴壁生长,呈集落状分布,边缘细胞向外伸展,传代后 24 小时贴壁率达 88%。核心参数表现出胰岛干细胞特征:倍增时间约 65 小时,连续传代 25 次后仍保持稳定的干细胞特性;表面标志物表达du特,神经元素 3(Ngn3)阳性率达 95%,配对盒基因 6(Pax6)阳性率 93%,干细胞标志物 Sox2 阳性率 89%,而成熟胰岛细胞标志物胰岛素(Insulin)、胰高血糖素(Glucagon)在基础状态下阳性率均低于 2%;具有正常的二倍体核型(染色体数 42 条),无染色体异常;无微生物污染,细胞纯度达 96%,保障实验结果的可靠性。
科研应用价值:在胰岛发育研究中,ALLRPISC2012 细胞经视huang酸处理 5 天后,Ngn3 表达量增加 4.2 倍,胰岛前体细胞标志物 NeuroD 表达量提升 3.8 倍,可模拟胰岛细胞的早期分化过程,为解析胰岛细胞谱系形成机制提供理想模型。
在胰岛 β 细胞再生研究方面,该细胞在含烟xian胺、β 细胞素的分化培养基诱导下,18 天后胰岛素阳性细胞率达 45%,形成类胰岛样细胞团,培养液中胰岛素分泌量达 120μU/mL,且对葡萄糖刺激呈现剂量依赖性响应,高糖环境下胰岛素释放量是低糖环境的 3.2 倍,可用于探究胰岛 β 细胞再生的分子调控机制。
糖尿病研究领域,将该细胞移植到链脲佐菌素诱导的糖尿病模型大鼠腹腔内,6 周后大鼠空腹血糖水平下降 55%,血清胰岛素水平提升 48%,移植细胞在脾脏部位形成功能性胰岛样结构,未出现肿瘤形成,体现了其在糖尿病细胞治疗中的应用潜力。此外,该细胞在高糖环境下,抗氧化酶 SOD 活性下降 35%,凋亡率增加 28%,可用于探究高糖诱导的胰岛干细胞损伤机制。
培养与保存规范:推荐使用含 12% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养基,添加 15ng/mL 干细胞因子(SCF)、10ng/mL 白细胞抑制因子(LIF)及 1% 抗生素混合液,培养环境为 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱。培养基需每 2 天更换一次,以维持干细胞特性。传代时,用 PBS 冲洗细胞 2 次,加入适量细胞解离液(不含yi酶成分),37℃孵育 6-8 分钟,待集落边缘细胞脱落,轻轻吹打分离细胞,传代比例为 1:2,每 6-7 天传代一次,避免细胞过度分散影响集落形成能力。
冻存液采用培养基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液,细胞浓度调整为 3×10⁶个 /ml,经程序降温(-20℃1 小时→-80℃过夜→液氮保存)后,复苏存活率达 86% 以上,3-4 代内可恢复正常的生长和分化能力。运输采用干冰冷冻运输或培养瓶活细胞运输,收到细胞后需静置培养 24 小时,更换培养基后观察细胞集落形态,确认无异常漂浮物后进行实验。该细胞系仅限科研使用,操作需符合生物安全规范。
ALLRPISC2012 大鼠胰岛干细胞系以其稳定的胰岛干细胞特性、强大的 β 细胞分化潜能及良好的安全性,在胰岛生物学研究与糖尿病细胞治疗探索中发挥着重要作用,为揭示胰岛发育机制和开发糖尿病新型治疗策略提供了可靠的细胞平台。
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