HBZY-1大鼠肾小球系膜细胞系
HBZY-1大鼠肾小球系膜细胞系作为源自大鼠肾小球系膜区的正常系膜细胞模型,因保留肾小球系膜细胞的收缩功能及基质代谢特性,在肾小球滤过功能调控、肾脏纤维化机制及肾小球疾病病理研究中具有重要价值,成为探究肾小球系膜生理功能及相关疾病的关键实验工具。
细胞特性与来源背景:该细胞系源自大鼠肾小球系膜组织,经原代培养和纯化获得。细胞形态呈梭形或星形,胞体大小均匀(直径约 18-22μm),胞质丰富且呈弱嗜酸性,可见较多的微丝和粗面内质网,约 25% 细胞可见细长的胞质突起相互连接,细胞核呈椭圆形,位于细胞中央,核仁清晰。生长方式为贴壁生长,呈放射状或漩涡状排列,具有一定的接触抑制,传代后 24 小时贴壁率达 92%。核心参数表现出正常肾小球系膜细胞特征:倍增时间约 70 小时,连续传代 18 次后仍保持稳定的生物学特性;表面标志物表达du特,α- 平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性率达 95%,系膜细胞特异性标志物硫酸ruan骨素蛋白聚糖(versican)阳性率 93%,血小板源性生长因子受体 β(PDGFRβ)阳性率 90%;具有正常的二倍体核型(染色体数 42 条),无染色体畸变;可分泌 Ⅰ 型和 Ⅳ 型胶原蛋白,基础分泌量分别达 65ng/mL 和 45ng/mL;具有收缩功能,在血管紧张素 Ⅱ 刺激下收缩率达 35%;无微生物污染,细胞纯度达 96%,保障实验结果的可靠性。
科研应用价值:在肾小球滤过功能调控研究中,HBZY-1 细胞经血管紧张素 Ⅱ 处理 48 小时后,细胞收缩率增加 40%,细胞外基质面积占比提升 35%,可模拟系膜细胞收缩对肾小球滤过率的影响,为解析肾小球滤过功能调控机制提供理想模型。
在肾脏纤维化研究方面,该细胞经转化生长因子 -β1(TGF-β1)处理后,Ⅰ 型胶原蛋白分泌量增加 2.8 倍,α-SMA 表达量提升 55%,细胞增殖速率增加 40%,可模拟肾小球系膜增生性肾炎中的系膜细胞活化过程,适用于探究肾脏纤维化的分子机制。
肾小球疾病研究领域,该细胞经高糖(30mM)处理后,氧化应激水平提升 60%,炎症因子 IL-6 分泌量增加 4.2 倍,细胞凋亡率达 32%,能很好地模拟糖尿病肾病中的系膜细胞损伤,为探究糖尿病肾病的发病机制提供实验基础。此外,该细胞与肾小球内皮细胞共培养时,内皮细胞的血管内皮生长因子(VEGF)表达量增加 3 倍,可用于探究系膜细胞 - 内皮细胞相互作用在肾小球损伤中的调控机制。
培养与保存规范:推荐使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基,添加 2mM 谷an酰胺、1% 胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒混合液及 1% 抗生素混合液,培养环境为 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱。培养基需每 2-3 天更换一次,以维持细胞的正常功能。传代时,用 PBS 冲洗细胞 2 次,加入 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 混合液,37℃孵育 8-10 分钟,待细胞间隙增大后轻轻吹打使细胞脱落,传代比例为 1:3-1:4,每 6-7 天传代一次,避免过度传代导致收缩功能下降。
冻存液采用培养基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液,细胞浓度调整为 2×10⁶个 /ml,经程序降温(-20℃1 小时→-80℃过夜→液氮保存)后,复苏存活率达 85% 以上,3-4 代内可恢复正常的生长和分泌功能。运输采用干冰冷冻运输或培养瓶活细胞运输,收到细胞后需静置培养 24 小时,更换培养基后观察细胞形态,确认无异常漂浮物且排列整齐后进行实验。该细胞系仅限科研使用,操作时需避免频繁更换培养条件,以防影响其收缩特性。
HBZY-1 大鼠肾小球系膜细胞系以其稳定的系膜细胞特性、完整的收缩与分泌功能,在肾小球生物学研究与肾脏疾病机制探索中发挥着重要作用,为揭示肾小球疾病的发病机制和开发肾脏保护药物提供了可靠的细胞模型。
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