NRK-52E大鼠肾细胞系
NRK-52E大鼠肾细胞系作为源自大鼠肾脏近曲小管的上皮细胞模型,因保留近曲小管te有的重吸收功能与代谢活性,在肾脏生理功能解析、肾小管损伤机制及相关疾病研究中占据重要地位,是探究肾脏近曲小管功能及疾病的理想实验工具。
细胞特性与来源背景:该细胞系源自大鼠肾脏近曲小管组织,经原代培养和纯化获得。细胞形态呈典型上皮样,多为立方形或多边形,胞体大小均匀(直径约 16-20μm),胞质丰富且呈嗜酸性,可见大量线粒体和内质网,约 15% 细胞有细小胞质突起,细胞核呈圆形,位于细胞中央,核仁清晰。生长方式为贴壁生长,呈单层铺路石样排列,接触抑制明显,传代后 24 小时贴壁率达 94%。核心参数符合正常肾近曲小管细胞特征:倍增时间约 56 小时,连续传代 20 次仍保持稳定生物学特性;表面标志物表达显著,γ- 谷氨酰转肽酶(GGT)阳性率 95%,细胞角蛋白 18(CK18)阳性率 93%,近曲小管特异性蛋白 megalin 阳性率 91%;具有正常二倍体核型(42 条染色体),无畸变;重吸收功能活跃,葡萄糖转运速率达 32nmol/(h・mg 蛋白),氨基酸吸收量达 28nmol/(h・10⁶细胞);可分泌肾损伤分子 1(KIM-1),基础分泌量 12ng/mL,损伤状态下分泌量显著增加;无微生物污染,细胞纯度 97%,确保实验结果可靠。
科研应用价值:在肾小管重吸收机制研究中,NRK-52E 细胞经胰岛素处理 48 小时后,钠 - 葡萄糖共转运体 2(SGLT2)表达量增加 3.2 倍,葡萄糖重吸收速率提升 58%,可模拟胰岛素对近曲小管糖重吸收的调控,为解析糖代谢相关肾脏疾病提供模型。
肾损伤机制研究方面,该细胞经shun铂(5μM)处理 24 小时后,乳酸脱氢酶(LDH)释放量增加 4.5 倍,活性氧(ROS)水平提升 62%,凋亡率达 40%;而经抗氧化剂处理后,细胞存活率提升 52%,氧化应激水平下降 55%,可模拟hua疗药物致肾损伤及保护过程,适用于探究肾损伤修复机制。
肾脏疾病研究领域,该细胞经高糖(30mM)处理后,转化生长因子 -β1(TGF-β1)表达量增加 3.8 倍,Ⅰ 型胶原蛋白分泌量提升 60%,α- 平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性率达 45%,能模拟糖尿病肾病中的肾小管间质纤维化过程,为研究代谢性肾病提供实验基础。此外,与肾成纤维细胞共培养时,成纤维细胞增殖速率增加 2.3 倍,胶原合成量提升 50%,可用于探究肾小管 - 间质相互作用在肾纤维化中的机制。
培养与保存规范:推荐使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基,添加 1% 非必需氨基酸、1% 抗生素混合液,培养环境为 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱。培养基每 2 天更换一次,维持细胞代谢活性。传代时,用 PBS 冲洗 2 次,加入专用细胞解离液,37℃孵育 8-10 分钟,待细胞间隙增大后轻吹脱落,传代比例 1:3-1:4,每 4-5 天传代一次,避免过度传代影响功能。
冻存液采用培养基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清混合液,细胞浓度调至 4×10⁶个 /ml,经程序降温(-20℃1 小时→-80℃过夜→液氮保存),复苏存活率 85% 以上,2-3 代恢复正常生长功能。运输采用干冰冷冻或培养瓶活细胞运输,收到后静置培养 24 小时,换液后观察细胞形态,确认无异常漂浮物且排列整齐后进行实验。该细胞系仅限科研使用,操作时避免频繁更换培养条件,以防影响代谢功能。
NRK-52E 大鼠肾细胞系以其稳定的近曲小管特性、完整的重吸收功能及典型的损伤应答,在肾脏生物学研究与疾病机制探索中作用显著,为揭示肾脏疾病机制和开发治疗药物提供可靠细胞模型。
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