Sprague Dawley(SD)大鼠骨髓间充质干细胞系
Sprague Dawley(SD)大鼠骨髓间充质干细胞系作为从 SD 大鼠骨髓中分离纯化的成体干细胞模型,因具有稳定的增殖能力和多谱系分化潜能,在干细胞基础研究及临床前转化应用中占据重要地位,成为探究间充质干细胞功能调控及组织再生机制的关键实验工具。
细胞特性与来源背景:该细胞系源自 SD 大鼠股骨与胫骨骨髓腔,经全骨髓贴壁法结合差速传代纯化建立。原代培养 24 小时可见少量细胞贴壁,48 小时后贴壁细胞伸展为长梭形,呈典型成纤维细胞样形态,胞体均匀,突起细长,细胞核呈卵圆形,核质比适中。生长方式为贴壁生长,呈放射状或栅栏状排列,传代后 24 小时贴壁率达 92%。核心参数表现出间充质干细胞特征:倍增时间约 52 小时,连续传代 35 次后仍保持正常二倍体核型(染色体数 42 条);表面标志物谱du特,CD29、CD90 免疫荧光阳性率分别为 97% 和 95%,造血细胞标志物 CD34、CD45 表达阴性(阳性率 < 2%);体外连续培养 50 天仍维持干细胞表型,无明显衰老迹象;无微生物污染,细胞纯度达 96%,保障实验结果的可靠性。
科研应用价值:在多向分化研究中,SD 大鼠骨髓间充质干细胞展现出优异的分化潜能。成骨诱导 14 天后,碱性磷酸酶活性较对照组升高 7.5 倍,茜素红染色显示大量矿化结节形成,骨桥蛋白 mRNA 表达量增加 9 倍;成脂诱导 12 天后,油红 O 染色阳性细胞率达 68%,脂联素分泌量增加 11 倍,可wan美模拟间充质干细胞向骨和脂肪细胞的分化过程,为干细胞命运决定机制研究提供理想模型。
组织修复研究方面,该细胞在炎症因子刺激下,白细胞介素 - 10(IL-10)分泌量增加 4.2 倍,肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)抑制率达 58%,可通过免疫调节促进组织修复。在大鼠肝纤维化模型中,输注该细胞 4 周后,肝纤维化程度减轻 45%,白蛋白水平提升 32%;在皮肤缺损修复实验中,可加速创面愈合,上皮化率提高 38%,体现了其在多组织修复中的应用潜力。
药物筛选领域,该细胞对成骨诱导剂反应敏感,经地塞mi松处理后,Runx2 转录因子活性增强 6 倍,成骨分化效率提升 50%,适用于骨质shu松治疗药物的活性评估。此外,通过基因修饰该细胞可高效表达治疗性蛋白,在脊髓损伤模型中,分泌神经营养因子的工程化细胞可促进轴突再生,运动功能评分提高 40%,为细胞治疗研究提供新策略。
培养与保存规范:推荐使用含 15% 胎牛血清的 α-MEM 培养基,添加 5ng/ml 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及 1% 抗生素混合液,培养环境为 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱。培养基需每 3 天更换一次,换液时保留 50% 旧培养基以维持细胞因子微环境。
传代时,当细胞融合度达 70%-80% 时进行操作,用 PBS 轻柔冲洗 2 次,加入 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化液,37℃孵育 4 分钟,待细胞边缘收缩后加入含血清培养基终止消化,传代比例 1:4-1:6,每 4-5 天传代一次,避免过度融合导致分化。
冻存采用 90% 胎牛血清 + 10% DMSO 的冻存液,细胞浓度调整为 2×10⁶个 /ml,经程序降温(-1℃/min)至 - 80℃,24 小时后转入液氮保存,复苏存活率达 88% 以上,3 代后可wan全恢复分化潜能。运输采用干冰冷冻运输或活细胞专用运输盒,收到细胞后需静置培养 12 小时再换液,确保细胞状态稳定。该细胞系仅限科研使用,操作需符合干细胞研究伦理规范。
SD 大鼠骨髓间充质干细胞以其稳定的生物学特性、高效的分化能力及良好的动物模型兼容性,在再生医学研究中具有不可替代的价值,为干细胞临床转化研究提供了可靠的实验平台。
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