RPMI 8226 [RPMI-8226]人多发性骨髓瘤细胞系
RPMI 8226 [RPMI-8226]人多发性骨髓瘤细胞系是研究多发性骨髓瘤（MM）生物学特性及治疗策略的经典模型，因具备典型的浆细胞表型和分泌单克隆免疫球蛋白的特性，在 MM 发病机制、骨髓微环境互作及药物研发领域应用广泛，为解析 MM 的 “克隆增殖 - 骨损伤" 双重病理特征提供了可靠工具。
来源与背景：该细胞系于 1966 年从一名 53 岁男性 MM 患者的外周血中分离建立，是首ge被广泛认可的 MM 细胞系。与其他血液肿瘤细胞系（如 U266）相比，其更贴近临床 MM 的浆细胞分化特征，尤其适合研究 MM 的骨髓浸润机制，为探索 “B 淋巴细胞恶性转化 - 浆细胞失控增殖" 的分子关联提供了理想样本，填bu了 MM 克隆演化研究模型的空白。其明确的来源和长期传代稳定性，使其成为 MM 基础研究与临床转化的重要桥梁，至今仍是国际上使用zui广泛的 MM 研究模型之一。
细胞特性：形态上呈圆形或椭圆形，悬浮生长为主，部分细胞因黏附性呈现轻微聚集，细胞质丰富，可见较多粗面内质网（浆细胞分泌抗体的特征结构），细胞核呈偏位圆形，核仁明显，核质比约 1:1.5，具有浆细胞的典型形态特征。核心特性体现为单克隆免疫球蛋白分泌，可持续分泌 IgGκ 型免疫球蛋白，培养液中 IgG 浓度可达 5-10μg/ml，通过 ELISA 检测可稳定量化，反映 MM 的 “浆细胞功能异常" 特征，为研究免疫球蛋白过量分泌的病理机制提供了便利；浆细胞标志物表达，高表达 CD38、CD138（ Syndecan-1），部分表达 CD45，不表达 B 细胞标志物 CD19，符合终末分化浆细胞的分子表型；骨髓微环境依赖性，与骨髓基质细胞共培养时，增殖速率提升 2-3 倍，破骨细胞活化因子（如 RANKL）分泌增加，模拟 MM 细胞与骨髓微环境的 “相互促进" 关系，裸鼠腹腔接种后 4-6 周可形成骨髓浸润性肿瘤，伴随溶骨性病变，重现临床 MM 的骨损伤特征。传代时无需消化处理，直接吹打分散聚集细胞即可，传代比例 1:3-1:5，连续传代 50 次后仍保持免疫球蛋白分泌能力，但分泌量可能下降 10%-15%。
培养条件：适宜采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培养基，添加 2mM 谷an酰胺和 1% 抗菌混合液以维持细胞活性。培养环境需控制在 37℃、5% CO₂饱和湿度，每 2-3 天更换一次培养基，细胞密度维持在 2×10⁵-1×10⁶个 /ml 之间，密度过高会导致细胞活力下降，免疫球蛋白分泌减少。与其他悬浮细胞系相比，其对营养条件较敏感，培养基中需维持葡萄糖浓度在 4.5g/L，过低会抑制细胞增殖及抗体分泌，传代时通过离心（1000rpm，5 分钟）收集细胞，用新鲜培养基重悬后接种，冻存液推荐含 10% DMSO 的胎牛血清，复苏后存活率可达 85% 以上，复苏后 24 小时即可恢复正常增殖及分泌功能。
检测鉴定：经微生物筛查，无支原体、细菌、真菌及常见病毒污染，符合实验细胞质量标准。流式细胞术检测显示，CD38、CD138 阳性率均超过 90%，CD19 阴性，符合 MM 细胞的免疫表型特征。染色体核型分析呈现亚二倍体核型，存在 14 号染色体易位（t (11;14)）、13 号染色体缺失等异常，与 60% 的 MM 患者的遗传学改变吻合。功能验证实验中，经 IL-6 处理后，细胞增殖速率提升 40%，CD138 表达上调，证实其对骨髓微环境细胞因子的响应能力，与临床 MM 依赖 IL-6 生存的特征一致。
应用领域：在发病机制研究中，该细胞系常用于解析 MM 的骨损伤机制，研究发现其分泌的破骨细胞活化因子可通过 RANKL/RANK 通路促进破骨细胞分化，抑制成骨细胞活性，导致骨吸收与骨形成失衡，为理解 MM 的溶骨性病变提供了关键线索。在药物研发方面，适用于评估抗 MM 药物的疗效，通过检测药物对细胞增殖、免疫球蛋白分泌及破骨细胞活化的影响，筛选能同时抑制肿瘤生长和骨损伤的候选药物，如某些蛋白酶体抑制剂可显著降低其存活及 RANKL 分泌。在耐药机制研究中，是探索 MM 治疗抵抗的常用模型，通过构建耐药亚株发现，ABC 转运蛋白（如 ABCG2）过表达与药物外排相关，抑制 ABCG2 可增强其对hua疗药物的敏感性。此外，该细胞系可用于研究 MM 与免疫系统的相互作用，将其与 T 细胞共培养，可观察到 T 细胞功能受抑，为解析 MM 的免疫逃逸机制提供实验基础。
该细胞系的优势在于能稳定模拟 MM 的浆细胞表型及与骨髓微环境的互作特征，为研究 MM 的 “克隆增殖 - 骨微环境破坏" 调控网络提供了理想模型。通过与其他 MM 细胞系的对比实验，可清晰识别不同亚型 MM 在免疫球蛋白分泌及骨损伤潜能上的差异，为 MM 的精准治疗提供实验依据。
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