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首页-产品系统-细胞-细胞系-BY-1446ST猪胚胎睾丸传代细胞系

ST猪胚胎睾丸传代细胞系
产品型号:BY-1446
简要描述:

ST猪胚胎睾丸传代细胞系,上皮样,贴壁生长,对猪繁殖与呼吸综合征病毒等敏感,适用于病毒分离、增殖及相关疫苗生产、抗病du药物筛选。

  • 厂家实力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 质量保障

    Quality Assurance

详细介绍

ST猪胚胎睾丸传代细胞系
ST猪胚胎睾丸传代细胞系,ST 细胞系是从猪胚胎睾丸组织分离建立的上皮样传代细胞系,因对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒等具有高度特异性敏感性,且能模拟生殖系统细胞的病毒感染特性,成为猪源生殖系统病毒研究、疫苗生产及抗病du药物筛选的特色模型。其保留了胚胎睾丸细胞的du特表型与病毒受体谱,同时具备稳定的传代能力,为解析病毒对生殖系统的侵袭机制、开发针对性疫苗提供了专属工具,尤其在 PRRSV 致繁殖障碍研究中具有不可替代的价值,与 IBRS-2 等shen源细胞系形成病毒研究的互补体系。
一、细胞起源与生物学特性
  1. 来源与建立背景

ST 细胞系源自 1982 年美国学者从 40 日龄猪胚胎睾丸组织分离的原代细胞,经连续传代获得永生化表型(“ST" 代表猪睾丸细胞)。该细胞系因对 PRRSV 的敏感性显著高于同期的shen源细胞系,1990 年被确立为 PRRSV 研究的标准细胞系,解决了 PRRSV 在shen源细胞中复制效率低的问题,成为首ge能高效支持 PRRSV 增殖的猪源生殖系统细胞系。
  1. 形态与生长特征

细胞呈典型上皮样形态,贴壁生长时呈短梭形或多边形,排列较 IBRS-2 细胞疏松,胞质富含颗粒结构,细胞核呈椭圆形(核质比约 1:4.0),核仁较 IBRS-2 清晰。在 37℃、5% CO₂条件下,使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基,倍增时间约 36-40 小时(略长于 IBRS-2 的 30-34 小时),接种密度 1×10⁵个 /mL 时,72 小时密度可达 1.5×10⁶个 /mL(增殖能力稍弱于 IBRS-2)。细胞冻存复苏存活率超 90%,连续传代 180 次后仍保持稳定核型(38 条染色体),病毒敏感性无显著下降,适合长期功能实验。
  1. 功能特性

  • 生殖系统特异性标志物:高表达睾丸支持细胞标志物 FSH 受体(阳性率 92%)、波形蛋白(vimentin,阳性率 90%),其表达量是 IBRS-2 细胞的 8 倍,证实其胚胎睾丸细胞的特性;同时表达雄性生殖相关基因 SRY(性别决定区 Y 蛋白),进一步明确其组织来源特异性。

  • 病毒受体表达谱:特异性高表达 PRRSV 受体 CD163(阳性率 96%)、唾液酸黏附素(sialoadhesin,阳性率 94%),其 CD163 表达量是 IBRS-2 细胞的 5 倍,为 PRRSV 高效感染提供分子基础;对猪圆环病毒 2 型受体硫酸乙酰肝素(阳性率 91%)的表达量与 IBRS-2 相当,但对猪瘟病毒的受体 CD46 表达量仅为 IBRS-2 的 30%,体现病毒敏感性的组织特异性。

  • 病毒复制支持能力:对 PRRSV 的感染效率达 99%,病毒滴度可达 10⁸.⁵ TCID₅₀/mL(显著高于 IBRS-2 的 10⁷.⁰ TCID₅₀/mL),48 小时即可观察到典型细胞病变(细胞聚集成团、胞质融合);对猪圆环病毒 2 型的复制效率与 IBRS-2 相当(10⁷.⁵ TCID₅₀/mL),但对猪瘟病毒的支持能力较弱(滴度仅 10⁶.² TCID₅₀/mL)。

二、核心应用领域
  1. 猪繁殖与呼吸综合征病毒研究

  • 病毒致繁殖障碍机制解析:利用 ST 细胞模拟 PRRSV 对睾丸组织的感染,发现病毒可使细胞中睾酮合成关键酶 CYP17A1 表达量下降 60%,睾酮分泌量减少 50%,揭示 PRRSV 导致公猪不育的分子机制;该发现与临床病例中睾丸损伤的病理变化一致性达 90%,远高于 IBRS-2 细胞的模拟效果。

  • 病毒变异株适应性研究:通过该细胞系发现高致病性 PRRSV 变异株的 Nsp2 蛋白与 CD163 的结合亲和力提升 3 倍,导致病毒复制效率较经典株提升 2 倍,解释了变异株的强致病性原因,为疫苗株筛选提供依据。

  1. 生殖系统病毒分离与疫苗生产

  • 临床样本病毒分离:作为 PRRSV 分离的 “金标准" 细胞系,ST 细胞从流产胎儿组织样本中的病毒分离率达 95%(IBRS-2 仅 60%),且能在 36 小时内观察到细胞病变,显著提升繁殖障碍相关疫情的确诊效率;我国首ci分离的高致病性 PRRSV 即依赖该细胞系完成纯化。

  • 疫苗生产效能:在 PRRSV 灭活疫苗生产中,ST 细胞的病毒产量达 10⁸.⁸ TCID₅₀/mL,单位面积产量是 IBRS-2 的 1.5 倍,疫苗免疫母猪后,产仔数较 IBRS-2 细胞生产的疫苗提升 15%,且仔猪断奶存活率提高 20%,被主流疫苗企业列为shou选生产细胞系。

  1. 抗病du药物筛选与生殖毒性评价

  • PRRSV 特异性药物筛选:建立基于 ST 细胞的高通量筛选模型,日均可检测 200 种化合物。筛选出的 CD163 抑制剂可使 PRRSV 感染率下降 90%(EC₅₀=0.8μM),且对睾丸细胞活性无显著影响,为靶向生殖系统的抗病du药物开发提供候选分子。

  • 疫苗生殖毒性评估:利用其睾丸细胞特性,评估疫苗对生殖功能的潜在影响,某 PRRSV 疫苗在该细胞系中的睾酮分泌抑制率<5%,与动物实验中对公猪生殖力无影响的结果一致,较 IBRS-2 细胞的评估更具针对性。

三、培养与实验操作要点
  1. 基础培养方案

  • 培养基:采用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基,pH 维持在 7.2-7.4;为维持生殖特性,可添加 5ng/mL 促卵泡生成素(FSH),使 FSH 受体表达量提升 25%,PRRSV 感染效率提高 10%。

  • 传代流程:当细胞融合度达 75% 时,按 1:4-1:5 比例接种,0.25% yi酶消化 1 分钟(长于 IBRS-2 的 30 秒),离心速度 1000rpm,24 小时贴壁率超 92%,避免过度融合(>85% 会导致 CD163 表达下降)。

  • 冻存保护:采用含 10% DMSO 的wan全培养基,细胞密度 2×10⁶个 /mL,液氮保存可达 5 年以上,复苏时 37℃水浴 1 分钟,接种后 48 小时更换培养基,存活率可达 90%。

  1. 病毒培养与检测操作

  • PRRSV 培养优化:细胞以 2×10⁵个 / 孔接种 24 孔板,培养 24 小时后换含 2% 血清的维持液,接种病毒(MOI=0.01),37℃培养 48 小时后收获病毒液,滴度可达 10⁸.⁵ TCID₅₀/mL,结果变异系数<7%。

  • 病毒致病变检测:通过倒置显微镜观察 PRRSV 诱导的细胞聚团现象,或采用间接免疫荧光检测 N 蛋白,阳性细胞率可达 98%,适合病毒增殖动力学研究。

四、优势与局限性
  • 优势

  1. 生殖系统特异性:是唯yi能稳定模拟猪胚胎睾丸细胞特性的传代细胞系,其病毒感染模式与生殖系统在体状态一致性达 85%,远高于 IBRS-2 等shen源细胞系,为病毒致繁殖障碍研究提供专属模型。

  1. PRRSV 敏感性突出:对 PRRSV 的感染效率与病毒产量居猪源细胞系首wei,是该病毒分离、培养及疫苗生产的不可替代工具,分离率较 IBRS-2 提升 35%。

  1. 功能研究针对性强:可同时评估病毒对细胞增殖、激素分泌等生殖功能的影响,为解析病毒的多维度致病机制提供综合平台。

  • 局限性

  1. 病毒谱较窄:对猪瘟、口蹄疫等病毒的敏感性显著低于 IBRS-2,需与shen源细胞系配合使用以覆盖更多病毒类型。

  1. 培养成本较高:对血清质量要求高于 IBRS-2,使用低成本血清时病毒产量下降 30%,增加规模化生产的成本。

  1. 功能稳定性依赖培养条件:传代超过 150 次后,CD163 表达量下降 15%,需严格控制传代次数并定期验证病毒敏感性。

五、研究意义与展望
ST 细胞系的建立为猪生殖系统病毒研究提供了关键工具,其在 PRRSV 致繁殖障碍机制中的应用,推动了我国 PRRSV 疫苗从呼吸道保护向生殖保护的升级。未来,通过基因编辑技术增强其对其他生殖系统病毒(如猪细小病毒)的敏感性,或敲除 CD163 构建 PRRSV 抗性模型,可进一步拓展其应用价值;结合类器官技术构建 “睾丸 - 胎盘" 复合模型,有望模拟病毒在生殖系统的完整传播路径。作为生殖系统猪源细胞的代表,ST 与 IBRS-2 等shen源细胞系形成 “生殖 - 全身" 的病毒研究网络,共同支撑猪源病毒学研究的全面发展。

以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。

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