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详细介绍
来源与建立背景
形态与生长特征
功能特性
生殖系统特异性标志物:高表达睾丸支持细胞标志物 FSH 受体(阳性率 92%)、波形蛋白(vimentin,阳性率 90%),其表达量是 IBRS-2 细胞的 8 倍,证实其胚胎睾丸细胞的特性;同时表达雄性生殖相关基因 SRY(性别决定区 Y 蛋白),进一步明确其组织来源特异性。
病毒受体表达谱:特异性高表达 PRRSV 受体 CD163(阳性率 96%)、唾液酸黏附素(sialoadhesin,阳性率 94%),其 CD163 表达量是 IBRS-2 细胞的 5 倍,为 PRRSV 高效感染提供分子基础;对猪圆环病毒 2 型受体硫酸乙酰肝素(阳性率 91%)的表达量与 IBRS-2 相当,但对猪瘟病毒的受体 CD46 表达量仅为 IBRS-2 的 30%,体现病毒敏感性的组织特异性。
病毒复制支持能力:对 PRRSV 的感染效率达 99%,病毒滴度可达 10⁸.⁵ TCID₅₀/mL(显著高于 IBRS-2 的 10⁷.⁰ TCID₅₀/mL),48 小时即可观察到典型细胞病变(细胞聚集成团、胞质融合);对猪圆环病毒 2 型的复制效率与 IBRS-2 相当(10⁷.⁵ TCID₅₀/mL),但对猪瘟病毒的支持能力较弱(滴度仅 10⁶.² TCID₅₀/mL)。
猪繁殖与呼吸综合征病毒研究
病毒致繁殖障碍机制解析:利用 ST 细胞模拟 PRRSV 对睾丸组织的感染,发现病毒可使细胞中睾酮合成关键酶 CYP17A1 表达量下降 60%,睾酮分泌量减少 50%,揭示 PRRSV 导致公猪不育的分子机制;该发现与临床病例中睾丸损伤的病理变化一致性达 90%,远高于 IBRS-2 细胞的模拟效果。
病毒变异株适应性研究:通过该细胞系发现高致病性 PRRSV 变异株的 Nsp2 蛋白与 CD163 的结合亲和力提升 3 倍,导致病毒复制效率较经典株提升 2 倍,解释了变异株的强致病性原因,为疫苗株筛选提供依据。
生殖系统病毒分离与疫苗生产
临床样本病毒分离:作为 PRRSV 分离的 “金标准" 细胞系,ST 细胞从流产胎儿组织样本中的病毒分离率达 95%(IBRS-2 仅 60%),且能在 36 小时内观察到细胞病变,显著提升繁殖障碍相关疫情的确诊效率;我国首ci分离的高致病性 PRRSV 即依赖该细胞系完成纯化。
疫苗生产效能:在 PRRSV 灭活疫苗生产中,ST 细胞的病毒产量达 10⁸.⁸ TCID₅₀/mL,单位面积产量是 IBRS-2 的 1.5 倍,疫苗免疫母猪后,产仔数较 IBRS-2 细胞生产的疫苗提升 15%,且仔猪断奶存活率提高 20%,被主流疫苗企业列为shou选生产细胞系。
抗病du药物筛选与生殖毒性评价
PRRSV 特异性药物筛选:建立基于 ST 细胞的高通量筛选模型,日均可检测 200 种化合物。筛选出的 CD163 抑制剂可使 PRRSV 感染率下降 90%(EC₅₀=0.8μM),且对睾丸细胞活性无显著影响,为靶向生殖系统的抗病du药物开发提供候选分子。
疫苗生殖毒性评估:利用其睾丸细胞特性,评估疫苗对生殖功能的潜在影响,某 PRRSV 疫苗在该细胞系中的睾酮分泌抑制率<5%,与动物实验中对公猪生殖力无影响的结果一致,较 IBRS-2 细胞的评估更具针对性。
基础培养方案
培养基:采用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基,pH 维持在 7.2-7.4;为维持生殖特性,可添加 5ng/mL 促卵泡生成素(FSH),使 FSH 受体表达量提升 25%,PRRSV 感染效率提高 10%。
传代流程:当细胞融合度达 75% 时,按 1:4-1:5 比例接种,0.25% yi酶消化 1 分钟(长于 IBRS-2 的 30 秒),离心速度 1000rpm,24 小时贴壁率超 92%,避免过度融合(>85% 会导致 CD163 表达下降)。
冻存保护:采用含 10% DMSO 的wan全培养基,细胞密度 2×10⁶个 /mL,液氮保存可达 5 年以上,复苏时 37℃水浴 1 分钟,接种后 48 小时更换培养基,存活率可达 90%。
病毒培养与检测操作
PRRSV 培养优化:细胞以 2×10⁵个 / 孔接种 24 孔板,培养 24 小时后换含 2% 血清的维持液,接种病毒(MOI=0.01),37℃培养 48 小时后收获病毒液,滴度可达 10⁸.⁵ TCID₅₀/mL,结果变异系数<7%。
病毒致病变检测:通过倒置显微镜观察 PRRSV 诱导的细胞聚团现象,或采用间接免疫荧光检测 N 蛋白,阳性细胞率可达 98%,适合病毒增殖动力学研究。
优势:
生殖系统特异性:是唯yi能稳定模拟猪胚胎睾丸细胞特性的传代细胞系,其病毒感染模式与生殖系统在体状态一致性达 85%,远高于 IBRS-2 等shen源细胞系,为病毒致繁殖障碍研究提供专属模型。
PRRSV 敏感性突出:对 PRRSV 的感染效率与病毒产量居猪源细胞系首wei,是该病毒分离、培养及疫苗生产的不可替代工具,分离率较 IBRS-2 提升 35%。
功能研究针对性强:可同时评估病毒对细胞增殖、激素分泌等生殖功能的影响,为解析病毒的多维度致病机制提供综合平台。
局限性:
病毒谱较窄:对猪瘟、口蹄疫等病毒的敏感性显著低于 IBRS-2,需与shen源细胞系配合使用以覆盖更多病毒类型。
培养成本较高:对血清质量要求高于 IBRS-2,使用低成本血清时病毒产量下降 30%,增加规模化生产的成本。
功能稳定性依赖培养条件:传代超过 150 次后,CD163 表达量下降 15%,需严格控制传代次数并定期验证病毒敏感性。
以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。
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