RSC-96大鼠雪旺细胞系
RSC-96大鼠雪旺细胞系作为源自大鼠周围神经的雪旺细胞模型,因保留雪旺细胞te有的髓鞘形成能力和神经再生支持功能,在周围神经损伤修复及神经退行性疾病研究中具有核心价值,成为探究神经胶质细胞生物学特性及神经再生机制的关键实验工具。
细胞特性与来源背景:该细胞系源自大鼠坐骨神经雪旺细胞,经原代培养和永生化处理建立。细胞形态在静息状态下呈长梭形,胞体细长,两端有分支状突起,细胞核呈椭圆形,位于细胞中央,核仁清晰;在神经再生诱导下,细胞体积增大 20%,突起延伸长度可达胞体直径的 8 倍。生长方式为贴壁生长,呈栅栏状或漩涡状排列,具有中度接触抑制,传代后 24 小时贴壁率达 93%。核心参数表现出雪旺细胞特征:倍增时间约 48 小时,连续传代 50 次后仍保持正常二倍体核型(染色体数 42 条);雪旺细胞特异性标志物 S-100 蛋白、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光阳性率分别为 96% 和 89%,神经胶质标志物 P0 蛋白表达丰富;基础状态下神经生长因子(NGF)分泌量达 22ng/10⁶细胞 / 24h,脑源性神经营养因子(BDNF)释放量为 18ng/10⁶细胞 / 24h;无微生物污染,细胞纯度达 97%,保障实验结果的可靠性。
科研应用价值:在周围神经再生研究中,RSC-96 细胞与背根神经节神经元共培养时,可形成髓鞘样结构,髓鞘碱性蛋白(MBP)表达量在 7 天后增加 5.3 倍,轴突生长速度提升 3.2 倍,能模拟体内雪旺细胞包裹轴突形成髓鞘的过程,为解析髓鞘形成机制提供理想模型。神经损伤修复研究方面,该细胞在血小板源性生长因子(PDGF)刺激下,迁移能力增强 45%,NGF 分泌量增加 2.8 倍,经 Akt 抑制剂处理后,神经再生支持功能下降 62%,可直观反映雪旺细胞在神经修复中的调控机制,助力促神经再生药物筛选。在神jing病理性疼痛研究领域,该细胞经脂多糖(LPS)刺激后,肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)分泌量增加 7.2 倍,环氧合酶 - 2(COX-2)表达量上升 4.8 倍,激活的雪旺细胞可通过分泌炎症因子促进感觉神经元敏化,适用于探究神经痛的外周机制。此外,将该细胞与聚乳酸 - 羟基乙酸共聚物(PLGA)支架复合培养,可构建组织工程神经移植物,用于评估其在体内修复神经缺损的效果。
培养与保存规范:推荐使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 混合培养基,添加 2ng/ml 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及 1% 抗生素混合液,培养环境为 37℃、5% CO₂饱和湿度的恒温培养箱。诱导髓鞘形成时,需加入 50ng/ml 维生素 C 和 10ng/ml 三碘甲状腺原氨酸(T3),处理时间为 7-14 天,髓鞘相关蛋白表达量可提升 3.5 倍。培养基需每 2-3 天更换一次,避免营养成分耗尽。传代时采用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化液处理,37℃孵育 6-8 分钟,待细胞突起回缩后加入含血清的培养基终止消化,传代比例为 1:3-1:4,每 4-5 天传代一次,维持细胞融合度在 60%-70% 以保持正常功能。冻存液配方为基础培养基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清,经程序降温(-20℃1 小时→-80℃过夜→液氮保存)后,复苏细胞存活率达 90% 以上,3 代内可恢复正常的突起延伸能力。运输采用 T-25 培养瓶活细胞运输,收到细胞后需静置培养 24 小时,更换培养基后观察细胞突起形态,确认无异常漂浮物后进行后续实验。该细胞系仅限科研使用,操作时需避免频繁晃动培养瓶,防止细胞突起断裂。
RSC-96 大鼠雪旺细胞系以其稳定的神经胶质细胞功能、明确的神经再生支持作用及易于培养的优势,在周围神经研究与组织工程领域发挥着重要作用,为揭示神经损伤修复机制和开发新型神经再生疗法提供了可靠的细胞平台。
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