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SK-N-SH SKNSH人神经母细胞瘤细胞系
产品型号:BY-0102
简要描述:

SK-N-SH [SKNSH]人神经母细胞瘤细胞系,多形态贴壁生长,具神经元和神经胶质分化潜能,表达神经标志物,增殖活跃,是神经母细胞瘤分化及药物研究的常用模型。

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详细介绍

SK-N-SH [SKNSH]人神经母细胞瘤细胞系

SK-N-SH [SKNSH]人神经母细胞瘤细胞系是研究神经母细胞瘤的经典模型,以兼具神经元和神经胶质分化潜能、表达多种神经标志物及稳定的增殖特性为显著特征,在神经母细胞瘤的发生机制、细胞分化及靶向药物研发中应用广泛,为解析神经母细胞瘤从原始神经嵴细胞恶性转化到肿瘤进展的过程提供了可靠实验工具。

来源与背景:该细胞系于 1970 年从一名 4 岁女性神经母细胞瘤患者的骨转移灶中分离建立,属于未分化型神经母细胞瘤细胞系。与原发灶来源的细胞系相比,其保留了神经母细胞瘤的转移特性,尤其适合研究神经母细胞瘤的远处转移机制。作为首ge被发现具有双向分化潜能的神经母细胞瘤细胞系,其长期传代后仍能保持这种特性,填bu了神经母细胞瘤分化研究模型的空白,至今仍是神经母细胞瘤细胞分化研究的重要参照。
细胞特性:形态上呈现多形性,主要有两种形态的细胞:一种是小型圆形细胞,类似未分化的神经母细胞;另一种是大型多极细胞,具有神经元样形态。细胞贴壁生长,部分区域可形成神经突样结构,细胞质丰富,可见神经颗粒,细胞核呈圆形或椭圆形,核仁明显,核质比约 1:1.2,具有神经母细胞瘤细胞的典型形态特征。核心特性体现为双向分化潜能,在特定诱导条件下(如加入视huang酸),可向神经元方向分化,表达神经元特异性烯醇化酶(NSE)、微管相关蛋白 2(MAP2)等神经元标志物;在另一些诱导条件下(如加入佛波酯),可向神经胶质细胞方向分化,表达胶质纤维酸性蛋白(GFAP),这种特性使其成为研究神经母细胞瘤细胞分化调控机制的理想模型;神经标志物表达,基础状态下即表达神经丝蛋白(NF)、突触素(Syn)等神经标志物,其中 NF 的表达水平是其他神经母细胞瘤细胞系的 1.5-2 倍;增殖与侵袭能力,体外培养时倍增时间约 48-60 小时,克隆形成率约 55%,裸鼠皮下接种后 3-4 周可形成肿瘤,成瘤率 100%,Transwell 实验中穿透基质膜的细胞数是正常神经嵴细胞的 5-7 倍,具有较强的侵袭能力。传代时采用常规消化液处理,因细胞贴壁程度不一,消化时间需控制在 2-4 分钟,传代比例 1:3-1:5,连续传代 50 次后仍保持双向分化潜能,但分化效率可能略有下降。
培养条件:适宜采用含 10% 胎牛血清的 MEM 培养基,添加 1% 非必需氨基酸和 1% 抗菌混合液以维持细胞活性。培养环境需控制在 37℃、5% CO₂饱和湿度,每 2-3 天更换一次培养基,细胞密度维持在 30%-70% 之间,过度汇合会导致细胞分化比例升高,未分化细胞比例下降 15%-20%。与其他肿瘤细胞系相比,其对诱导分化剂敏感,培养基中若加入 10μM 视huang酸,72 小时后即可观察到神经元样细胞比例增加(可达 40% 以上),传代时消化后需用含血清培养基终止反应,以保护细胞表面的分化相关受体,冻存液推荐含 10% DMSO 的胎牛血清,复苏后存活率可达 80% 以上,复苏后 24 小时贴壁率超过 85%。
检测鉴定:经微生物筛查,无支原体、细菌、真菌及常见病毒污染,符合实验细胞质量标准。免疫细胞化学检测显示,NF、Syn 呈阳性表达,NSE 在诱导后表达显著上调,GFAP 在特定诱导条件下呈阳性,符合神经母细胞瘤的分子表型。染色体核型分析呈现亚二倍体核型,存在 1 号染色体短臂缺失、17 号染色体三体等异常,与 60% 的神经母细胞瘤患者的遗传学改变吻合。功能验证实验中,经视huang酸处理后,细胞增殖速率下降 30%,神经突长度增加 2-3 倍,证实其分化潜能,与临床神经母细胞瘤在诱导分化治疗中的反应特征一致。
应用领域:在分化机制研究中,该细胞系被用于揭示神经母细胞瘤细胞分化的调控网络,研究发现 MYCN 基因扩增是其维持未分化状态的关键,沉默 MYCN 可使细胞自发向神经元方向分化,NSE 表达上调 2-3 倍,为理解神经母细胞瘤的分化阻滞机制提供了重要线索。在药物筛选方面,是评估神经母细胞瘤诱导分化药物的常用模型,通过检测药物对其分化比例、增殖速率及凋亡的影响,筛选有效的诱导分化药物,如视huang酸类药物可显著促进其分化,且与其他靶向药物联用具有协同效应。在转移机制研究中,该细胞系可用于探索神经母细胞瘤的转移途径,其高表达基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9),可降解神经周围基质,促进肿瘤细胞侵袭转移,靶向抑制这些酶可显著降低其侵袭能力,为开发抗转移药物提供潜在靶点。此外,该细胞系还可用于研究神经母细胞瘤与神经微环境的相互作用,其分泌的神经营养因子可影响周围神经细胞的功能,同时周围神经细胞分泌的因子也可促进其增殖,这种相互作用为研究神经母细胞瘤的微环境依赖性提供了实验基础。
与其他神经母细胞瘤细胞系(如 SH-SY5Y)相比,SK-N-SH 的优势在于其更强的双向分化潜能,能更全面地模拟神经母细胞瘤在不同分化阶段的特征。通过对该细胞系的研究,可为神经母细胞瘤的 “分化诱导治疗" 提供实验依据,推动神经母细胞瘤治疗策略的优化。

以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。

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