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首页-产品系统-细胞-细胞系-BY-1388MPH1猴孤雌胚胎干细胞系

MPH1猴孤雌胚胎干细胞系
产品型号:BY-1388
简要描述:

MPH1猴孤雌胚胎干细胞系,源自未受精卵细胞,表达多能性标志物,具有三胚层分化潜能,适用于发育生物学研究、疾病模型构建及再生医学探索。

  • 厂家实力

    Manufacturer Strength
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  • 质量保障

    Quality Assurance

详细介绍

MPH1猴孤雌胚胎干细胞系
MPH1猴孤雌胚胎干细胞系,MPH1 细胞系是源自猴未受精卵细胞的孤雌胚胎干细胞系,因保留胚胎干细胞的多能性特征、可定向分化为三胚层细胞,且避免了伦理争议,成为发育生物学研究、疾病模型构建及再生医学探索的重要工具。其du特的单倍体遗传背景与全能分化潜能,为哺乳动物早期发育机制及细胞治疗研究提供了理想模型。
一、细胞起源与生物学特性
  1. 来源与建立机制

MPH1 源自猴次级卵母细胞经孤雌激活(如电刺激或化学诱导)形成的囊胚内细胞团(ICM),通过体外培养获得稳定传代的干细胞系(“MPH" 代表孤雌多能干细胞,“1" 为首ge成功建系编号)。其形成无需精子参与,基因组均来自母本,核型为单倍体向二倍体转化的稳定核型(2n=42),与正常受精来源的胚胎干细胞相比,具有均一的母源遗传背景,可排除父源基因干扰。
  1. 形态与生长特征

细胞呈典型胚胎干细胞形态,圆形或多角形,核质比高,细胞排列紧密形成集落状,边缘清晰。在 37℃、5% CO₂条件下,需培养在饲养层细胞(如小鼠胚胎成纤维细胞 MEF)上,使用含 15% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养基(添加 bFGF 维持多能性),倍增时间约 36-48 小时,传代比例 1:3 至 1:5,每周换液 3-4 次以维持集落完整性。细胞冻存复苏存活率超 80%,液氮保存 5 年后仍保持多能性标志物表达。
  1. 多能性与分化特性

  • 标志物表达:高表达胚胎干细胞核心多能性标志物,包括 Oct4(阳性率>95%)、Nanog(阳性率>90%)、Sox2(阳性率>92%),通过免疫荧光与流式细胞术可稳定检测。

  • 分化潜能:在体外可自发分化为三胚层细胞 —— 外胚层(神经细胞,表达 β-III tubulin)、中胚层(心肌细胞,)、内胚层(肝细胞,表达 ALB),分化效率分别达 85%、70%、65%;在体内可形成畸胎瘤,包含毛发、软骨、腺体等三胚层衍生组织。

  • 遗传稳定性:长期传代(<50 代)后核型畸变率<5%,表观遗传修饰(如 H3K4me3)模式与早期胚胎细胞高度相似,优于部分体细胞核移植来源的干细胞系。

二、核心应用领域
  1. 发育生物学基础研究

  • 母源基因功能解析:MPH1 的纯母源基因组特性,使其成为研究母源效应基因(如 MATER、NPM2)在早期胚胎发育中作用的专属模型。通过 CRISPR-Cas9 敲除母源特异性基因,可观察其对细胞分化、胚胎着床的影响,已发现 3 个新的母源基因调控囊胚形成的关键通路。

  • X 染色体失活研究:作为雌性来源干细胞,其 X 染色体失活模式与正常胚胎干细胞存在差异(单条 X 染色体持续活化),为解析 X 染色体剂量补偿机制提供了du特视角,相关研究揭示了 lncRNA Xist 在灵长类 X 失活中的保守性与物种特异性。

  1. 疾病模型构建与药物筛选

  • 单基因遗传病模型:通过基因编辑技术引入人类遗传病相关突变(如亨廷顿舞蹈症的 HTT 基因 CAG 重复扩增),可构建与人类病理特征高度相似的细胞模型。例如,携带 SOD1 突变的 MPH1 分化的运动神经元,表现出与肌萎suo侧索硬化(ALS)患者相似的凋亡特征,用于筛选神经保护药物的灵敏度达 90%。

  • 药物毒性评估:其分化的心肌细胞可用于检测药物对心脏的毒性(如 QT 间期延长),与传统动物模型相比,药物反应一致性提高 40%;分化的肝细胞可模拟药物代谢过程,预测药物肝毒性的准确率达 82%,为临床前药物安全性评价提供替代方案。

  1. 再生医学与细胞治疗探索

  • 免疫兼容细胞来源:因孤雌来源的细胞表面抗原性较低,其分化的细胞(如神经前体细胞)在同种异体移植中免疫排斥反应强度较普通干细胞低 30%,已在猴帕金森病模型中验证其移植后存活时间延长至 180 天,运动功能改善率达 60%。

  • 组织工程种子细胞:分化的软骨细胞与支架材料结合,可构建具有生物活性的软骨组织,修复猴关节软骨缺损的成功率达 75%;分化的视网膜色素上皮细胞(RPE)可用于治疗黄斑变性,动物实验显示光敏感度提升 40%,为细胞替代疗法提供种子细胞。

三、培养与实验操作要点
  1. 基础培养方案

  • 培养基:DMEM/F12 培养基添加 15% 胎牛血清、20ng/mL bFGF、1% 非必需氨基酸,pH 维持在 7.2-7.4,每 24 小时更换一次以保持因子活性。

  • 传代流程:当集落直径达 200-300μm 时,用细胞解离液处理 5 分钟,机械吹打分散为小细胞团(含 5-10 个细胞),接种至经明胶包被的培养皿(铺有 MEF 饲养层),避免单细胞传代导致分化。

  • 冻存保护:取对数生长期细胞,用含 10% DMSO、20% 血清的培养基重悬至密度 1×10⁶ cells/mL,程序降温至 - 80℃后转移至液氮,复苏时 37℃水浴快速解冻,离心去除 DMSO 以减少细胞损伤。

  1. 定向分化诱导

  • 神经细胞分化:在培养基中加入 10μM 全反式维甲酸,培养 7 天后形成神经球,继续分化 14 天可获得成熟神经元,通过添加 BDNF 可提高突触形成率至 60%。

  • 心肌细胞分化:采用 Wnt 信号通路调控法,先加入 CHIR99021(3μM)培养 3 天,再加入 IWR-1(5μM)培养 5 天,心肌细胞跳动率可达 70%,持续跳动时间超 30 天。

四、优势与局限性
  • 优势

  1. 伦理兼容性高:源自未受精卵,避免了胚胎破坏争议,更易被科研伦理审查接受,尤其适用于灵长类干细胞研究。

  1. 遗传背景均一:纯母源基因组减少了遗传异质性对实验结果的干扰,数据重复性(CV<8%)优于受精来源的干细胞系。

  1. 分化潜能稳定:三胚层分化效率长期保持稳定,体外诱导体系成熟,便于标准化操作。

  • 局限性

  1. 分化潜能限制:与正常胚胎干细胞相比,其向某些细胞类型(如生殖细胞)的分化效率较低(<10%),可能与父源基因缺失相关。

  1. 免疫排斥风险:虽抗原性较低,但仍存在同种异体排斥,需结合基因编辑(如敲除 HLA 基因)进一步降低排斥反应。

  1. 传代限制:传代超过 50 代后多能性标志物表达下降约 20%,需定期筛选高多能性亚克隆。

五、研究意义与展望
MPH1 细胞系的建立为灵长类干细胞研究开辟了新路径:其孤雌来源特性在解决伦理争议的同时,提供了研究母源基因功能的du特模型,推动了哺乳动物早期发育机制的解析。在转化医学领域,其低免疫原性与稳定分化潜能使其成为细胞治疗的理想候选,尤其在神经退行性疾病、器官损伤修复等领域展现出临床应用潜力。未来,通过结合表观遗传修饰与 3D 类器官技术,MPH1 有望构建更接近体内的组织模型,为精准医学与再生医学的发展提供关键支撑,同时为人类胚胎干细胞研究提供重要的灵长类替代模型。

 以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。

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