RAW 264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞系
RAW 264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞系作为免疫学与肿瘤学研究的经典模型,自 1978 年从 Abelson 鼠白血病病毒诱发的肿瘤中分离后,便凭借稳定的生物学特性成为科研领域的 “常客"。其永生化特性突破了原代巨噬细胞传代限制,同时保留单核巨噬细胞的核心功能,为长期实验提供了可靠保障。
在细胞形态与生长特性上,RAW 264.7 展现出du特的 “双重性格"。显微镜下,多数细胞呈圆形悬浮状态,宛如培养基中漂浮的微型 “救生圈";部分细胞则半贴壁生长,伸出长短不一的伪足,呈现梭形或多边形,这种形态可塑性与其吞噬功能密切相关。细胞直径约 10-20 微米,胞质内富含溶酶体和吞噬小泡,这些 “消化车间" 使其能高效吞噬病原体或异物。当细胞密度达到 1×10⁶-2×10⁶个 / 毫升时,需按 1:3-1:5 比例传代,传代时无需yi酶消化,仅需轻轻吹打即可使半贴壁细胞脱落,传代周期 2-3 天,操作便捷性显著优于多数贴壁细胞。
培养体系的优化是维持 RAW 264.7 活性的关键。基础培养基选用高糖 DMEM,其葡萄糖浓度(4.5g/L)能满足细胞高代谢需求;10% 胎牛血清需经热灭活处理(56℃,30 分钟),以去除补体等可能干扰细胞功能的成分。培养箱内 37℃、5% CO₂的环境模拟小鼠体内生理状态,而培养基 pH 需维持在 7.2-7.4,可通过酚红指示剂颜色变化直观监测。值得注意的是,该细胞对血清质量敏感,更换血清批次时需*行预实验,避免因生长因子差异导致细胞功能异常。
在实验应用中,RAW 264.7 的 “多功能性" 得以充分彰显。吞噬功能检测是其标志性实验:将荧光标记的乳胶微球或大肠杆菌与细胞共孵育,通过流式细胞术或荧光显微镜可定量分析吞噬效率,该模型常用于评估中药提取物、纳米材料对吞噬功能的调控作用。在炎症模型构建中,用 100ng/mL LPS 刺激 24 小时,细胞上清中 TNF-α、IL-6 等促炎因子浓度可提升数十倍,结合 Western blot 检测 NF-κB 磷酸化水平,能清晰反映炎症信号通路激活状态。
前沿研究中,RAW 264.7 的应用持续拓展。在免疫检查点研究中,其表面 PD-L1 分子的表达调控机制成为热点,通过 CRISPR 技术敲除相关基因,可探索巨噬细胞在肿瘤免疫逃逸中的作用;在细胞焦亡研究中,该细胞经 NLRP3 炎症小体激活后,会出现典型的焦亡形态(细胞膜破裂、释放 IL-1β),为炎症性疾病的靶向治疗提供线索。此外,其与肿瘤细胞共培养模型,能模拟肿瘤微环境中巨噬细胞的极化过程,助力解析 “M1 型(抗肿瘤)-M2 型(促肿瘤)" 转化机制,为肿瘤免yi治疗提供新靶点。
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