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PC-12大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系
PC-12大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系在神经生物学与肿瘤研究领域应用广泛,凭借其兼具肾上腺嗜铬细胞与神经元的双重特性,成为探究神经分化机制、儿茶酚胺分泌调控及肿瘤细胞恶性转化的重要实验模型,为神经内分泌相关研究提供了可靠的细胞工具。
细胞特性与来源背景:该细胞系源自大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤组织,经原代培养和克隆化建立。未分化状态下细胞呈多角形或上皮样,胞质内可见嗜铬颗粒,细胞核呈圆形,位于细胞中央,核仁明显;经诱导后呈现神经元样形态,长出细长突起,胞体缩小,核质比增大。生长方式为贴壁生长,部分细胞轻微悬浮,传代后 24 小时贴壁率约 92%。核心参数表现稳定:倍增时间约 72 小时,连续传代 60 次后仍保持异常染色体核型(染色体数约 43-45 条);神经内分泌标志物如羟化酶(TH)、多巴胺 β- 羟化酶(DBH)免疫荧光染色呈强阳性,细胞纯度达 94%;无细菌、真菌、支原体及病毒污染,确保实验结果的可靠性。
科研应用价值:在神经分化研究中,PC-12 细胞经神经生长因子(NGF)诱导后,72 小时内神经元突起长度可达胞体直径的 5 倍以上,微管相关蛋白 2(MAP2)表达量增加 3.8 倍,可模拟神经元分化过程,为解析神经突起生长的分子机制提供理想模型。儿茶酚胺分泌调控方面,该细胞在高钾溶液刺激下,肾上腺素释放量增加 2.7 倍,能很好地模拟嗜铬细胞的分泌功能,助力交感神经调控机制的探究。肿瘤研究领域,该细胞高表达原癌基因 c-Myc,其 mRNA 水平较正常肾上腺细胞升高 4.1 倍,经相关药物处理后凋亡率达 58%,适用于评估抗肿瘤药物的疗效及耐药机制。此外,将细胞与施万细胞共培养,可构建体外神经 - 内分泌交互模型,用于研究神经递质对激素分泌的调节作用。
培养与保存规范:推荐使用含 10% 马血清和 5% 胎牛血清的 RPMI-1640 培养基,添加 1% 抗生素混合液预防污染,培养环境为 37℃、5% CO₂饱和湿度的恒温培养箱。培养基需每 3 天更换一次,诱导分化时加入 50ng/ml NGF,每 2 天更换一次诱导培养基。传代时采用含 EDTA 的消化液处理,37℃孵育 5-8 分钟,待细胞间隙增大后加入含血清的培养基终止消化,传代比例为 1:2-1:3,每 5-7 天传代一次,维持细胞融合度在 60%-70% 以保持分化潜能。冻存液配方为基础培养基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清,经程序降温(-20℃1 小时→-80℃过夜→液氮保存)后,复苏细胞存活率达 88% 以上,4-5 代内可恢复正常的分化能力。运输采用干冰冻存管或 T-25 培养瓶活细胞运输,收到细胞后需静置培养 24 小时,更换培养基后观察细胞形态,确认无异常漂浮物后进行后续实验。该细胞系仅限科研使用,禁止用于临床诊疗相关研究。
PC-12 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系以其du特的神经分化潜能、明确的分泌特性及易于培养的优势,在神经生物学与肿瘤学交叉研究中发挥着不可替代的作用,为推动神经内分泌领域研究的发展提供了有力支持。
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