LT04小鼠胚胎干细胞系
在胚胎干细胞研究领域,LT04小鼠胚胎干细胞系凭借其稳定的干细胞特性与良好的发育潜能,成为探索胚胎发育机制、干细胞分化调控及再生医学研究的重要实验模型,为干细胞生物学领域的基础研究与应用转化提供了可靠的细胞平台。
细胞特性与来源背景:该细胞系来源于 129/Sv 小鼠囊胚内细胞团,经体外分离培养与克隆筛选建立。细胞形态呈现典型的胚胎干细胞特征,多为圆形或椭圆形,细胞核大而明显,核质比约 1:1.3,核仁清晰可见,细胞紧密聚集形成边界整齐的克隆状生长,克隆内部细胞排列紧密,形态均一。核心参数表现稳定:qun体倍增时间约 20-24 小时,连续传代 50 次后仍保持正常的二倍体核型(40 条染色体,XY 性别决定);干细胞特异性标志物 Oct4、Sox2、Nanog 的表达水平较高,经免疫荧光染色检测均呈强阳性,且碱性磷酸酶染色阳性率达 98%,表明其未分化状态稳定;细胞纯度达 97%,无细菌、真菌、支原体及病毒污染,为实验结果的可靠性和重复性提供了有力保障。
科研应用价值:在胚胎发育机制研究中,LT04 细胞可在体外模拟早期胚胎发育过程,通过定向诱导分化为内、中、外三个胚层的细胞,为解析胚胎发育过程中细胞命运决定的分子机制提供了理想模型。在干细胞分化调控研究方面,该细胞系对多种诱导因子反应敏感,例如在特定诱导条件下可高效分化为神经细胞,分化率达 85% 以上,且分化后的细胞具有典型的神经细胞形态和功能特征,为研究神经分化的调控网络提供了重要工具。此外,LT04 细胞系可用于构建嵌合体小鼠,将其注射到囊胚中后,能够参与胚胎的各种组织器官形成,嵌合率达 78%,为研究胚胎干细胞在体内的发育潜能及功能提供了有效的体内实验模型,同时也为基因编辑研究提供了稳定的细胞载体。
培养与保存规范:培养时,推荐使用含 15% 胎牛血清的 DMEM 基础培养基,添加 1% 非必需氨基酸、0.1mM β- 巯基乙醇、1000U/ml LIF(白血病抑制因子)及 1% 抗生素混合液,以维持细胞的未分化状态。培养环境为 37℃、5% CO₂、95% 湿度的恒温培养箱,需每日观察细胞生长状态,及时更换培养基。传代时采用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化,待细胞克隆边缘出现松动、细胞间连接减弱时终止消化,传代比例为 1:4-1:6,每 2-3 天传代一次,避免细胞过度密集导致分化。冻存时,冻存液配方为基础培养基 + 20% 胎牛血清 + 10% DMSO,将细胞悬浮于冻存液中,经程序降温后放入液氮中保存,复苏后细胞存活率可达 92% 以上,且能快速恢复增殖能力和未分化特性。运输方式可选择干冰冷冻运输或 T-25 培养瓶活细胞运输,收到细胞后需按照标准流程进行处理和培养。需要注意的是,该细胞系仅限用于科研目的,禁止用于临床治疗及相关应用。
LT04 小鼠胚胎干细胞系以其稳定的干细胞特性、良好的分化潜能和可靠的培养性能,在胚胎干细胞相关研究领域发挥着重要作用,为推动干细胞生物学的发展和相关应用研究提供了坚实的细胞模型支持。
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