JEG-3-VP16-TNFa耐VP16绒癌细胞系
JEG-3-VP16-TNFa耐VP16绒癌细胞系以 JEG-3/VP16 耐药株为基础,通过基因工程技术导入肿瘤坏死因子 α(TNFα)基因改造而成。这一改造旨在探索 TNFα 在耐药绒癌细胞中的双重作用,为攻克绒癌耐药难题、解析肿瘤微环境调控机制提供du特研究模型。
在生物学特性上,JEG-3-VP16-TNFα 细胞保留了原始耐药株上皮样贴壁生长的形态特征,但 TNFα 基因的稳定表达显著改变了细胞行为。显微镜下观察,细胞形态出现明显变化,部分细胞体积增大、形态不规则,伪足增多且伸展活跃,细胞间连接更加松散,呈现出更强的迁移倾向。细胞增殖速率虽未wan全突破耐药导致的限制,但 TNFα 的持续分泌激活了细胞内 NF-κB、MAPK 等信号通路,增强了细胞代谢活性和抗凋亡能力。同时,细胞表面黏附分子表达上调,促使其与细胞外基质及免疫细胞的相互作用发生改变,进一步重塑肿瘤微环境。
该细胞系的耐药与 TNFα 表达机制紧密关联。耐药方面,JEG-3-VP16-TNFα 细胞依旧维持着 P - 糖蛋白、多药耐药相关蛋白的高表达水平,能够快速外排进入细胞的 VP16 等hua疗药物;DNA 损伤修复系统持续高效运作,及时修复hua疗药物造成的 DNA 损伤。而 TNFα 的表达则呈现复杂的生物学效应:一方面,低浓度 TNFα 可通过激活 NF-κB 信号通路,上调抗凋亡蛋白 Bcl-2 表达,增强细胞耐药性;另一方面,高浓度 TNFα 能够诱导肿瘤细胞凋亡,同时招募并激活巨噬细胞、NK 细胞等免疫细胞,增强机体抗肿瘤免疫反应。此外,TNFα 还可促进肿瘤血管生成,调节细胞外基质成分,为肿瘤细胞的生存和转移创造有利条件。
在细胞培养过程中,JEG-3-VP16-TNFα 细胞需使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养基,培养环境控制在 37℃、5% 二氧化碳的恒温恒湿培养箱中。为确保 TNFα 基因稳定表达,需定期利用抗生素筛选和 Western blot、ELISA 等技术对细胞进行鉴定。当细胞融合度达到 80% - 90% 时,按 1:3 - 1:5 的比例进行传代。
在科研与医药领域,JEG-3-VP16-TNFα 细胞系发挥着重要作用。科研人员借助该细胞系深入研究耐药与肿瘤微环境之间的相互作用机制,探索逆转耐药的新靶点;在药物研发方面,其用于评估新型hua疗药物、靶向 TNFα 疗法或联合治疗方案对耐药绒癌细胞的作用效果,为绒癌耐药患者的临床治疗提供理论依据和实践指导,推动绒癌治疗技术的创新与发展。
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