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CHO-K1-S2-HSA中国仓鼠卵巢细胞系
产品型号:BY-1329
简要描述:

CHO-K1-S2-HSA中国仓鼠卵巢细胞系,上皮样,贴壁生长,稳定表达 S2-HSA 融合蛋白,适用于该蛋白功能研究、相关通路分析及生物制药领域的应用。

  • 厂家实力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 质量保障

    Quality Assurance

详细介绍

CHO-K1-S2-HSA中国仓鼠卵巢细胞系
CHO-K1-S2-HSA中国仓鼠卵巢细胞系是经基因工程改造的 CHO-K1 衍生株,通过导入 S2-HSA 融合基因构建而成,能稳定表达 S2-HSA 融合蛋白,因表达效率高、功能特异性强,成为重组蛋白研究与生物制药的重要模型。其保留了 CHO-K1 细胞遗传稳定、易培养的优势,同时赋予了靶向生产 S2-HSA 融合蛋白的能力,为该蛋白的功能解析及相关应用开发提供了精准工具。
一、细胞构建与基本特性
  • 来源与构建:该细胞系源自 CHO-K1 细胞(CHO 细胞的经典亚株),通过载体介导(如含 EF1α 启动子的表达质粒)将 S2-HSA 融合基因导入细胞,经嘌呤霉素抗性筛选及单克隆纯化获得稳定株。“S2-HSA" 代表其表达的融合蛋白(S2 片段与人类血清白蛋白的融合产物),明确标识其功能特性,确保蛋白表达的均一性与持续性。

  • 形态与增殖:体外培养呈典型上皮样形态,贴壁生长,细胞呈多边形,排列紧密,形态与亲本 CHO-K1 细胞一致。在 37℃、5% CO₂条件下,增殖稳定,传代周期约 24-30 小时,可适应含 10% 胎牛血清的 F12K 培养基,兼容无血清培养体系,传代 50 次以上仍能维持稳定形态与活性,贴壁能力强,为大规模培养提供便利。

  • 表达特征:S2-HSA 融合蛋白主要分泌至细胞外培养基中,表达量可达 10-15μg/10⁶细胞 / 24 小时(通过 ELISA 检测),长期传代(>40 代)后表达量波动<10%。该融合蛋白保留 S2 片段的生物学活性与 HSA 的半衰期延长特性,能与特异性抗体结合,且翻译后修饰(如糖基化)与天然蛋白一致,为功能研究与应用开发奠定基础。

二、核心应用领域
  1. 重组融合蛋白功能研究

该细胞系是解析 S2-HSA 融合蛋白功能的理想模型。通过纯化培养基中的融合蛋白,可研究其与靶分子的相互作用(如表面等离子体共振实验),明确 S2 片段的生物学活性及 HSA 的增效作用。例如,在研究 S2 片段的抗病毒机制时,其能稳定提供高纯度融合蛋白,通过病毒中和实验验证其抑制活性,为功能机制提供量化数据。
  1. 生物制药与蛋白生产

在生物制药领域,该细胞系因高效表达 S2-HSA 融合蛋白,成为该蛋白工业化生产的优选细胞基质。S2-HSA 融合蛋白兼具 S2 片段的功能活性与 HSA 的长半衰期,在抗病毒、抗炎等领域有潜在应用价值。其可通过悬浮培养技术放大至生物反应器,蛋白产量比常规 CHO-K1 细胞高 3-5 倍,且产物纯度达 95% 以上,显著降低下游纯化成本,为候选药物的临床前研究提供充足原料。
  1. 蛋白表达系统优化研究

该细胞系可用于重组蛋白表达系统的优化探索。通过分析 S2-HSA 融合基因的整合位点、启动子活性及 mRNA 稳定性,可筛选更高效的表达元件;或通过基因编辑技术(如 CRISPR/Cas9)优化细胞代谢通路,进一步提升蛋白产量。例如,敲除细胞内蛋白酶相关基因后,融合蛋白降解率降低 20%,为提高重组蛋白表达效率提供新策略。
三、优势与局限性
  • 优势:S2-HSA 融合蛋白表达稳定,分泌效率高,便于纯化;遗传背景清晰,与 CHO-K1 细胞同源性高,实验重复性好;兼容贴壁与悬浮培养,可规模化生产,满足工业化需求;蛋白翻译后修饰接近天然状态,生物活性保留完整,适合临床前研究。

  • 局限性:长期培养需维持抗性筛选压力,增加培养成本;融合蛋白的糖基化模式与人类细胞存在细微差异,可能影响部分功能研究的外推性;对培养基中血清成分敏感,无血清适应需 6-8 周的驯化周期。

四、培养与实验注意事项
  • 培养条件:基础培养基为含 10% 胎牛血清的 F12K 培养基,添加嘌呤霉素(2μg/mL)维持抗性筛选,同时加入谷an酰胺与非必需氨基酸促进增殖。传代时控制融合度在 60%-70%,用 EDTA - yi酶温和消化,避免过度处理影响细胞活性。悬浮培养可采用无血清培养基,逐步降低血清浓度至 0.5%,最终细胞密度可达 3×10⁶个 /mL。

  • 蛋白纯化与检测:收集培养上清后,通过 Protein A 亲和层析纯化 S2-HSA 融合蛋白,纯度可达 95% 以上;通过 Western blot 验证蛋白分子量,ELISA 检测浓度,确保蛋白质量。冻存时使用含 10% DMSO 的wan全培养基,液氮保存,复苏后传代 2 次待状态稳定后再用于实验,保证结果可靠性。

五、研究意义
CHO-K1-S2-HSA 细胞系的建立为 S2-HSA 融合蛋白的研究与应用提供了标准化工具,推动了重组融合蛋白在生物制药领域的开发进程。在基础研究中,其助力阐明了融合蛋白的表达调控机制,为优化重组蛋白生产系统提供了线索;在应用领域,其为 S2-HSA 融合蛋白的临床前研究提供了充足原料,加速了相关候选药物的研发周期。随着细胞培养技术与基因编辑手段的结合,该细胞系有望在精准蛋白生产与个性化医疗研究中发挥更大作用。

以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。

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