Hep3B人肝癌细胞系
Hep3B人肝癌细胞系源于人体肝细胞癌组织，是研究肝癌发生发展机制、评估抗癌药物疗效的经典细胞模型。显微镜下，Hep3B 细胞呈现典型的上皮样癌细胞形态，多为多边形或不规则形，以贴壁方式紧密附着在培养瓶底部，细胞间连接紧密，常堆叠形成多层细胞集落，部分区域可见细胞呈 “铺路石" 样排列。细胞胞质丰富，染色后呈嗜酸性，内部线粒体、内质网等细胞器异常发达，为癌细胞快速增殖提供能量与物质基础；细胞核大且深染，核质比例失调，核仁明显且数目增多，还可见异常核分裂象，彰显其恶性肿瘤细胞的特性。
Hep3B 细胞的培养需要严格把控各个环节。在培养基选择上，常用含 10% 优质胎牛血清的高糖 DMEM 培养基。高糖 DMEM 为细胞提供葡萄糖、氨基酸等丰富营养物质，满足其旺盛的代谢需求；10% 的胎牛血清中富含生长因子、激素和多种活性物质，能够促进细胞贴壁、增殖。同时，添加 1% 的青mei素 - 链mei素双抗溶液，防止细菌污染，确保细胞健康生长。培养环境至关重要，将细胞置于 37℃、5% 二氧化碳的恒温培养箱中，37℃模拟人体体温，为细胞内酶促反应提供适宜温度；5% 的二氧化碳可维持培养液 pH 值稳定在 7.2 - 7.4，保障细胞内酸碱平衡和正常代谢。当细胞汇合度达到 80% - 90% 时，需及时进行传代。使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 溶液消化细胞，消化时将培养瓶置于显微镜下观察，待细胞变圆、间隙增大时，立即加入含血清的培养基终止消化，通过离心去除旧培养液，用新鲜培养基重悬细胞，传代比例一般控制在 1:3 - 1:5 。若需长期保存细胞，则进行冻存操作，采用 90% 胎牛血清与 10% 二甲基亚砜混合冻存液，将细胞重悬后，先置于 - 80℃冰箱过夜，再转入液氮中长期保存，整个过程遵循程序降温原则，减少细胞损伤。在培养过程中，需定期对细胞进行检测，包括观察细胞形态、检测细胞活力（如台盼蓝染色法）、测定细胞生长曲线等，确保细胞状态良好，维持细胞系的生物学特性稳定。
从生物学特性来看，Hep3B 细胞具有旺盛的增殖能力，细胞周期调控异常，Cyclin D1、CDK4 等细胞周期蛋白高表达，驱动细胞快速通过 G1 期进入 S 期，在适宜条件下，细胞倍增时间约为 24 - 36 小时。其内部 Wnt/β-catenin、PI3K/AKT 等信号通路异常激活，Wnt/β-catenin 通路激活后，β-catenin 蛋白在细胞质中大量积累并转入细胞核，激活下游促癌基因的转录；PI3K/AKT 通路则抑制细胞凋亡，增强细胞代谢活性，促进癌细胞的存活与增殖。此外，Hep3B 细胞还具备较强的侵袭转移能力，能够分泌基质金属蛋白酶 MMP-2 和 MMP-9，降解细胞外基质成分，为癌细胞迁移创造条件。
在科研应用领域，Hep3B 细胞系发挥着不可替代的作用。在肝癌发病机制研究中，科研人员借助该细胞系深入探究基因突变与肝癌发生发展的关系；在药物研发方面，它是筛选抗肝癌药物的重要工具，无论是传统hua疗药物，还是新型靶向药物、免yi治疗药物，都需在 Hep3B 细胞上进行初步的药效评估，以确定药物对肝癌细胞的抑制效果和作用机制，助力开发更有效的肝癌治疗方案。
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