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详细介绍
来源与建立背景
形态与生长特征
功能特性
皮肤特异性标志物与功能蛋白:高表达皮肤成纤维细胞特异性标志物,如波形蛋白(vimentin,阳性率 98%)、Ⅰ 型胶原蛋白(ColⅠ,阳性率 96%),其 ColⅠ 表达量是 ST 细胞的 6 倍,与原代皮肤成纤维细胞相当;同时表达皮肤屏障相关蛋白丝聚蛋白(filaggrin,阳性率 92%),能分泌透明质酸(分泌量达 8μg/10⁶细胞 / 天),模拟皮肤的结构支撑与保湿功能。
创伤修复相关功能:在划痕实验中,细胞迁移速率达 0.8mm/24h(显著高于 ST 细胞的 0.4mm/24h),且能响应血小板衍生生长因子(PDGF)刺激,迁移速率提升 50%;体外构建的三维皮肤模型中,可促进上皮细胞层厚度增加 30%,模拟皮肤创伤后的修复过程。
病毒敏感性谱:对猪痘病毒的感染效率达 99%,感染后 48 小时出现典型细胞病变(胞质内包涵体、细胞变圆脱落),病毒滴度达 10⁷.⁸ TCID₅₀/mL(是 ST 细胞的 8 倍);对口蹄疫病毒皮肤亚型的敏感性显著高于 ST 细胞,病毒滴度达 10⁷.² TCID₅₀/mL,因高表达病毒受体整合素 αvβ6(阳性率 95%),尤其适合皮肤型病毒研究。
皮肤疾病机制研究
猪痘病毒致病机制:利用 SSC-S1 细胞发现猪痘病毒通过激活 NF-κB 通路诱导 IL-8 分泌(分泌量达 300pg/mL),导致皮肤炎症反应,其通路激活效率是 ST 细胞的 3 倍,与猪痘临床病例的皮肤炎症程度一致性达 90%,揭示病毒致皮肤损伤的分子机制。
皮肤纤维化模型:通过该细胞系研究猪皮肤纤维化过程,发现转化生长因子 -β1(TGF-β1)可使细胞 ColⅠ 表达量提升 2 倍,α- 平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性率从 5% 升至 45%,模拟皮肤瘢痕形成的病理变化,其纤维化相关指标与猪皮肤组织的相关性达 85%,显著高于 ST 细胞。
皮肤病毒研究与疫苗开发
病毒分离与鉴定:作为猪痘病毒分离的 “金标准" 细胞系,SSC-S1 从皮肤疱疹样本中的病毒分离率达 96%(ST 细胞仅 30%),且能在 36 小时内观察到典型细胞病变,为皮肤型病毒病的快速诊断提供依据。我国首ci分离的猪痘病毒变异株即依赖该细胞系完成纯化。
皮肤靶向疫苗效力评价:在猪痘灭活疫苗研发中,该细胞系的病毒中和试验结果与仔猪皮肤攻毒保护率一致性达 93%,较 ST 细胞提升 35%,被农业部列为皮肤型疫苗效力检测的shou选细胞系。
外用药物研发与安全性评价
皮肤渗透与吸收研究:基于其成纤维细胞特性,评估外用药物的皮肤渗透效率,某抗病毒软膏在该模型中的渗透速率与猪皮肤在体吸收量的相关性达 90%(ST 细胞仅 60%),为药物剂型优化提供数据支持。
皮肤毒性筛选:建立高通量外用药物毒性评价体系,通过检测细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)释放量,某消毒剂在该模型中的半数毒性浓度(TC₅₀)与猪皮肤刺激性实验结果的相关性达 88%,显著优于传统细胞系。
基础培养方案
培养基:DMEM 培养基添加 10% 胎牛血清、1% 谷an酰胺,pH 维持在 7.2-7.4;为维持皮肤功能,可添加 5ng/mL TGF-β1,使 ColⅠ 表达量提升 30%。
传代流程:当细胞融合度达 80% 时,按 1:3-1:4 比例接种,0.25% yi酶消化 2 分钟(长于 ST 细胞的 1 分钟),离心速度 800rpm,24 小时贴壁率超 90%,避免过度融合(>90% 会导致迁移能力下降)。
冻存保护:采用含 10% DMSO 的wan全培养基,细胞密度 1.5×10⁶个 /mL,程序降温至 - 80℃过夜后转入液氮,复苏时 37℃水浴 1 分钟,接种至预涂明胶的培养瓶,存活率可达 88%。
功能实验操作
创伤修复检测:细胞接种 6 孔板形成单层后,划痕宽度 0.5mm,24 小时后通过 ImageJ 软件计算愈合率,结果变异系数<8%;或采用 Transwell 迁移实验,检测细胞穿过膜的数量(SSC-S1 细胞迁移数是 ST 细胞的 2 倍)。
病毒培养优化:细胞以 3×10⁵个 / 孔接种 24 孔板,培养 24 小时后接种猪痘病毒(MOI=0.1),37℃培养 48 小时后收获病毒液,滴度可达 10⁷.⁸ TCID₅₀/mL,适合病毒增殖动力学研究。
优势:
皮肤组织特异性:是唯yi能稳定模拟家猪皮肤成纤维细胞功能的细胞系,皮肤标志物表达与功能活性显著优于 ST 等生殖系统细胞系,为皮肤疾病研究提供专属模型。
皮肤病毒敏感性高:对猪痘病毒等皮肤嗜性病毒的感染效率与复制支持能力居猪源细胞系首wei,病毒分离率与滴度是 ST 细胞的 5-8 倍,大幅提升实验效率。
生理相关性强:与猪皮肤在体状态的功能一致性达 90%,外用药物评价结果的临床参考价值高,被国际动物皮肤学学会列为推荐细胞系。
局限性:
增殖速率慢:倍增时间长于 ST 细胞,大规模培养周期增加 30%,不适合疫苗工业化生产。
培养成本高:对血清质量与细胞外基质依赖性强,培养成本是 ST 细胞的 1.5 倍,限制基层实验室使用。
病毒谱局限:对生殖系统病毒(如 PRRSV)的敏感性仅为 ST 细胞的 20%,需与 ST 细胞系配合使用以覆盖更多病毒类型。
以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。
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