WEHI-13VAR小鼠纤维肉瘤细胞系
WEHI-13VAR小鼠纤维肉瘤细胞系源自 BALB/c 小鼠诱发性纤维肉瘤，是保留间叶组织恶性增殖特性和高转移潜能的经典肉瘤模型，在纤维肉瘤的侵袭转移机制、间质重塑及抗肉瘤药物筛选研究中具有重要价值，为解析这种间叶源性恶性肿瘤的生物学行为提供了理想工具。
该细胞系呈现典型的纤维肉瘤细胞形态与表型特征。显微镜下，细胞呈长梭形或纺锤形，以贴壁生长为主，排列成束状或漩涡状，模拟成纤维细胞的排列方式。细胞核呈椭圆形或杆状，核质比高，染色质呈粗颗粒状，可见 1-2 个明显核仁，核分裂象活跃（每 10 个高倍视野 8-10 个），胞质丰富，呈嗜酸性，可见细长胞质突起，电镜下可见胞质内富含肌动蛋白微丝和粗面内质网，符合纤维肉瘤的超微结构特点。免疫表型分析显示，细胞高表达间叶组织标志物 vimentin（阳性率 95%）和 α- 平滑肌肌动蛋白（α-SMA，阳性率 60%），流式细胞术检测显示 vimentin 阳性细胞比例显著高于其他肉瘤细胞系，而上皮标志物 CK 阴性，证实其纯间叶源性特征。
体外培养体系中，WEHI-13VAR 细胞展现出旺盛的增殖能力与强侵袭特性。最适培养条件为含 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 培养基，添加 1% 谷an酰胺，在 37℃、5% CO₂环境下，传代周期约 60 小时，倍增时间约 45 小时，显著快于正常成纤维细胞。其显著特点是体外可分泌大量胶原蛋白（Ⅰ 型和 Ⅲ 型），形成富含基质的生长环境，这种特性与其高表达转化生长因子 -β1（TGF-β1）相关（分泌量是正常成纤维细胞的 3 倍）。Transwell 侵袭实验显示，其穿透人工基底膜的能力是其他纤维肉瘤细胞系的 2.5 倍，这种高侵袭性依赖于高表达的基质金属蛋白酶 - 1（MMP-1）和 MMP-3，酶活性分别较其他肉瘤细胞高 4 倍和 5 倍，可高效降解结缔组织基质。软琼脂克隆形成率达 45%，克隆形态呈不规则放射状，边缘有细长突起，连续传代 50 次后，vimentin 表达及侵袭能力无明显衰减，冻存复苏存活率超 90%。
在动物模型中，WEHI-13VAR 细胞的成瘤与转移模式ji具特点。将 1×10⁶个细胞皮下接种 BALB/c 小鼠，7 天形成实体瘤，14 天肿瘤突破包膜侵袭周围肌肉组织，21 天肺转移率达 75%（肝转移率 40%），模拟人类纤维肉瘤的血行转移偏好。病理切片显示肿瘤组织由密集的梭形细胞构成，呈编织状排列，可见病理性核分裂象，免疫组化可见 vimentin 阳性细胞弥漫分布，肺转移灶保留原发灶的梭形细胞形态。荧光标记追踪证实，肿瘤细胞通过血液循环定植于肺脏，高表达血管内皮细胞黏附分子 CD44，黏附率达 60%，CD44 抗体处理可使肺转移率下降 65%。
发病机制研究揭示其te有的分子异常。基因测序显示，细胞存在 N-ras 基因第 61 密码子突变（Q61K）和 p53 基因缺失，导致 RAS/RAF/MEK 通路持续激活，Western blot 检测显示磷酸化 ERK（p-ERK）表达量较正常成纤维细胞高 8 倍，使用 MEK 抑制剂处理后，细胞增殖率下降 70%，凋亡率上升 50%，证实该通路在其恶性增殖中的核心作用。此外，细胞中 Hedgehog 信号通路异常激活，Gli1 转录因子表达量较正常细胞高 6 倍，可促进间质细胞增殖和肿瘤侵袭，Hedgehog 通路抑制剂处理可使肿瘤体积缩小 55%。
转移机制方面，WEHI-13VAR 细胞的肺转移涉及多重调控。除 CD44 介导的血管黏附外，细胞高表达趋化因子受体 CXCR4，可响应肺组织高浓度的 CXCL12，迁移能力是 CXCR4 阴性细胞的 2.3 倍，CXCR4 拮抗剂处理可使肺转移灶数量减少 55%。基因芯片分析显示，转移灶细胞中与间质重塑相关的基因 Snail 和 Twist 表达上调，E - 钙粘蛋白表达下降 60%，使细胞更易脱离原发灶进入血液循环，Snail 沉默后转移率下降 50%。
在药物筛选应用中，该细胞系是评估纤维肉瘤药物的有效模型。基于其 N-ras 突变特性，对 MEK 抑制剂敏感，半数抑制浓度（IC50）约 0.5μM，药物处理后细胞 G1 期比例增加 45%，凋亡率上升 40%。体内实验显示，MEK 抑制剂口服可使 BALB/c 小鼠皮下肿瘤体积缩小 70%，肺转移率从 75% 降至 25%，疗效显著。其高间质特性使其成为抗纤维化药物的理想模型，某新型 TGF-β1 抑制剂可减少胶原蛋白分泌，使肿瘤间质减少 50%，同时抑制细胞侵袭（能力下降 60%）。
在肿瘤微环境研究中，WEHI-13VAR 细胞与肿瘤相关成纤维细胞（CAF）的相互作用为解析转移机制提供了线索。共培养实验显示，CAF 分泌的血小板衍生生长因子（PDGF）可激活肿瘤细胞的 PDGFRβ 通路，使 MMP-2 表达上调 3 倍，侵袭能力增强 60%，PDGF 中和抗体可阻断这种促进作用。在缺氧微环境（1% O₂）中，细胞 HIF-1α 表达上调，诱导血管内皮生长因子（VEGF）分泌增加，使肿瘤内微血管密度增加 2 倍，VEGF 抗体处理可抑制肿瘤生长及转移。
以上信息仅供参考，详细信息请联系我们。
详细介绍
产品咨询
联系我们
