MEF小鼠胚胎成纤维细胞系
MEF小鼠胚胎成纤维细胞系源自妊娠 12.5-14.5 天的小鼠胚胎组织，是的成纤维细胞模型，因能模拟胚胎发育过程中的间质细胞功能，在干细胞培养、基因编辑及发育生物学研究中应用广泛。
该细胞系具有典型的成纤维细胞形态与表型特征。显微镜下，细胞呈长梭形或多角形，贴壁生长时排列紧密，呈现放射状或漩涡状生长模式，胞质丰富，细胞核呈椭圆形，核仁清晰可见。免疫表型分析显示，MEF 细胞高表达波形蛋白（Vimentin）和纤维连接蛋白（Fibronectin），不表达上皮细胞标志物细胞角蛋白（Cytokeratin），明确其间质细胞属性。与其他成纤维细胞系相比，原代 MEF 细胞保留了更多胚胎期的生物学特性，传代至 5-7 代内仍能维持稳定的生长状态和功能表达。
在体外培养体系中，MEF 细胞展现出良好的生长适应性。基础培养时，在含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基中，37℃、5% CO₂条件下生长旺盛，传代周期约 48-72 小时，细胞汇合度达到 80%-90% 时需及时传代，以避免接触抑制导致的生长停滞。其显著特点是对培养环境的兼容性强，在低糖或高糖 DMEM 培养基中均能正常增殖，且对血清质量的敏感性较低，这一特性降低了大规模培养的技术门槛。此外，MEF 细胞的冻存复苏效率高，采用含 10% 二甲基亚砜（DMSO）的冻存液冻存后，复苏存活率可达 90% 以上，便于长期保存与实验储备。
MEF 细胞的核心价值体现在干细胞培养中的支持作用。作为经典的饲养层细胞，经丝lie霉素 C 处理或 γ 射线照射后，其失去增殖能力但仍能分泌白血病抑制因子（LIF）、骨形态发生蛋白（BMPs）等细胞因子，为胚胎干细胞（ESCs）或诱导多能干细胞（iPSCs）提供维持未分化状态的微环境。研究表明，MEF 饲养层可通过激活干细胞内的 STAT3 信号通路，抑制分化相关基因的表达，使干细胞保持多向分化潜能 —— 在 MEF 细胞支持下，ESCs 可维持典型的克隆形态，高表达 Oct4、Nanog 等干细胞标志物，且在体外分化实验中能形成包含内、中、外三个胚层的拟胚体。
在基因编辑研究中，MEF 细胞是 CRISPR/Cas9 技术的理想验证模型。其高转染效率（脂质体介导转染效率可达 30%-50%）和快速增殖特性，使其适合用于基因敲除或敲入实验的初步验证。例如，通过编辑 MEF 细胞中的 p53 基因，可观察细胞周期调控异常及凋亡抗性增强的表型，为探究该基因在细胞应激反应中的作用提供直接证据。此外，MEF 细胞易于建立永生化细胞系，通过导入 SV40 大 T 抗原或端粒酶逆转录酶（TERT）基因，可获得无限增殖的 MEF 细胞，克服原代细胞传代次数有限的缺陷，适合开展长期实验研究。
在发育生物学研究中，MEF 细胞可用于模拟胚胎组织的间质 - 上皮相互作用。将其与胚胎上皮细胞共培养，能观察到上皮细胞形态发生改变，如极性建立和腺体结构形成，这一过程依赖于 MEF 细胞分泌的转化生长因子 -β（TGF-β）和肝细胞生长因子（HGF）的调控，为解析胚胎器官发生的分子机制提供了体外模型。此外，不同品系小鼠来源的 MEF 细胞（如 C57BL/6、BALB/c）在细胞因子分泌谱上存在差异，这种遗传背景的多样性使其可用于研究遗传因素对细胞功能的影响。
在病毒学研究中，MEF 细胞对多种逆转录病毒和慢病毒具有易感性，常作为病毒包装与滴度测定的宿主细胞。通过将病毒载体转染至 MEF 细胞，可高效生产重组病毒颗粒，用于后续的基因递送实验，例如在 iPSCs 诱导过程中，MEF 细胞包装的慢病毒可携带 Oct4、Sox2 等重编程因子，显著提高重编程效率。
随着 3D 培养技术的发展，MEF 细胞构建的三维支架模型能更真实地模拟体内胚胎间质环境。其与干细胞共培养形成的类器官结构，可用于研究细胞间的动态相互作用及组织分化的时空调控，为解析胚胎发育的复杂过程提供了更接近生理状态的研究平台。此外，MEF 细胞在药物安全性评价中也有应用，其对致畸物的敏感性可用于评估化合物对胚胎发育的潜在危害，通过检测细胞活力和分化能力的变化，为药物的胚胎毒性筛选提供参考数据。
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