DG-S2山羊皮肤细胞系
DG-S2山羊皮肤细胞系作为针对山羊皮肤上皮组织的特异性细胞模型，在反刍动物皮肤上皮分化、表皮屏障构建及皮肤疾病研究领域具有重要价值。它的建立为深入探究山羊皮肤上皮细胞的生理功能、表皮层与外界环境的交互机制以及皮肤病原的侵染路径等提供了稳定的体外研究平台，对山羊养殖业中皮毛品质提升和皮肤健康保障意义重大。
山羊皮肤的表皮层作为直接与外界接触的结构，由多层上皮细胞构成，承担着阻挡异物入侵、减少水分蒸发、感知外界刺激等关键功能，其结构完整性和功能正常性直接影响山羊的生存状态和皮毛质量。在养殖过程中，表皮细胞易受紫外线照射、化学物质刺激、寄生虫叮咬等因素影响，导致表皮损伤、屏障功能下降，引发皮肤炎症、脱毛等问题，尤其对以皮毛为重要经济产出的品种影响显著。因此，建立 DG-S2 山羊皮肤细胞系，对于解析表皮细胞功能、研发表皮保护技术具有重要的理论和实践意义。
DG-S2 山羊皮肤细胞系的建立遵循严谨的操作规范。选取健康的幼龄山羊，经严格无菌处理后，在超净工作台中精准分离背部表皮组织，避免掺杂真皮层成分。将表皮组zhi剪碎成 1mm³ 左右的小块，用含双抗（氨基糖苷类与 β- 内酰胺类抗生素）的磷酸盐缓冲液反复冲洗以去除杂质。随后加入针对性的细胞分散液（含酶解成分），在 37℃条件下温和处理 25-35 分钟，确保上皮细胞完整分离。收集细胞悬液经 70μm 滤网过滤后，1000r/min 离心 5 分钟，弃上清，用含 12% 胎牛血清的 K-SFM 上皮细胞专用培养液重悬，接种于胶原包被的培养瓶中，置于 37℃、5% CO₂恒温培养箱中进行原代培养。培养初期每日观察，每 2 天更换一次培养液，待细胞汇合度达 75% 时进行传代，目前该细胞系已稳定传代至 40 代以上，细胞活力保持在 85% 以上。
该细胞系呈现典型的上皮样细胞形态，细胞呈多边形或不规则铺路石状，排列紧密呈单层，胞质丰富且边界清晰，细胞核圆形或椭圆形，贴壁生长能力强。生长特性研究显示，DG-S2 细胞在 K-SFM 培养液中生长状态最佳，相较于 DMEM 培养液，细胞增殖速度提高约 22%；最适培养温度为 37℃，与山羊体温一致；当胎牛血清浓度为 10%-12% 时，细胞群体倍增时间约为 60 小时。传代至 30 代后，细胞形态和增殖速率无明显变化，核型分析显示染色体数目稳定，遗传背景可靠。
在功能特性方面，DG-S2 山羊皮肤细胞系展现出丰富的表皮细胞功能。免疫荧光检测表明，细胞高表达上皮细胞特异性标志物如细胞角蛋白 14、紧密连接蛋白 Claudin-1，证实其表皮上皮细胞属性。该细胞系具有形成连续上皮单层的能力，能通过表达紧密连接蛋白构建类似表皮屏障的结构，这对研究表皮屏障功能的形成与调控机制具有重要意义。同时，DG-S2 细胞在体外可响应钙离子浓度变化，呈现出一定的分化潜能，能模拟表皮细胞从基底层到角质层的分化过程，为探究皮肤上皮分化机制提供了理想模型。此外，该细胞系对山羊常见的皮肤致病菌如表皮葡萄球菌、马拉色菌等表现出敏感性，感染后会出现细胞间隙增宽、屏障功能下降等特征，为研究病原菌对表皮的破坏机制提供了良好材料。
DG-S2 山羊皮肤细胞系在多个研究领域应用广泛。在表皮分化研究中，通过检测细胞在不同诱导条件下的分化标志物表达，揭示了 Wnt/β-catenin 信号通路在表皮分层中的调控作用；在皮毛品质研究中，利用该细胞系探究了上皮细胞与毛囊细胞的相互作用，为改善山羊被毛密度提供了新的思路；在化妆品与兽药研发中，建立了基于表皮屏障功能的安全性评价模型，可快速检测外用产品对皮肤的刺激性。
作为稳定可靠的山羊皮肤上皮细胞模型，DG-S2 不仅填bu了山羊表皮细胞体外研究的空白，更为反刍动物皮肤上皮生物学研究提供了重要工具，推动了山羊皮肤保护技术和皮毛品质改良技术的发展，对提升山羊养殖产业的经济效益具有重要意义。
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