T47D [T-47D]人乳腺导管癌细胞系
T47D [T-47D]人乳腺导管癌细胞系是研究激素依赖性乳腺癌的经典模型，以高表达雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）及对激素治疗敏感为核心特征，在乳腺导管癌的激素调控机制、内分泌治疗耐药及药物研发中应用广泛，为解析雌激素驱动的乳腺癌发生发展提供了可靠实验工具。
来源与背景：该细胞系于 1976 年从一名 54 岁女性乳腺导管癌患者的胸腔积液中分离建立，属于 luminal 型乳腺癌细胞系。乳腺导管癌是乳腺癌中最常见的亚型，占比约 70%，其中激素受体阳性者占多数，而 T47D 因保留了完整的激素受体信号通路，成为研究激素依赖性乳腺导管癌的重要模型。与三阴性乳腺癌细胞系（如 MDA-MB-231）相比，其更能反映激素依赖的生长特性，尤其适合研究雌激素在乳腺癌发生中的作用机制，至今仍是乳腺导管癌内分泌治疗研究的关键参照。
细胞特性：形态上呈现典型的上皮样特征，贴壁生长且排列紧密呈铺路石样，细胞呈圆形或多边形，细胞质丰富，细胞核大而圆，核仁明显，核质比约 1:1.3，具有乳腺导管癌细胞的典型形态。核心特性体现为激素受体高表达，免疫组化显示 ER 阳性率达 90%，PR 阳性率 85%，ERα 蛋白表达量为正常乳腺上皮细胞的 5-8 倍，对雌激素刺激高度敏感，17β- 雌二醇处理后细胞增殖速率提升 30%；激素依赖生长，在无血清培养基中添加雌激素可维持细胞增殖，而去除雌激素或加入抗雌激素药物（如他mo昔芬）则显著抑制生长，IC50 值约为 0.5μM；增殖与侵袭能力，体外培养倍增时间约 60-72 小时，克隆形成率约 40%，裸鼠皮下接种成瘤率 100%，但成瘤速度较慢，6 周肿瘤体积约 0.8±0.2 cm³，Transwell 实验中穿膜细胞数显著低于 MDA-MB-231，体现较低的侵袭转移潜能。传代时采用常规消化液处理，因贴壁较牢固，需消化 4-5 分钟，传代比例 1:3-1:5，连续传代 50 次后仍保持激素受体高表达及激素依赖特性。
培养条件：适宜采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培养基，添加 1% 抗菌剂，培养环境需控制在 37℃、5% CO₂饱和湿度。为维持激素敏感性，可在培养基中添加 10μg/ml 胰岛素。细胞密度维持在 20%-70%，过度汇合会导致细胞接触抑制明显，增殖速率下降 25%。对激素环境敏感，血清中雌激素水平波动会影响细胞生长稳定性，传代时用含血清培养基终止消化，冻存液推荐含 10% DMSO 的胎牛血清，复苏后存活率可达 85% 以上，24 小时贴壁率超过 90%，细胞功能恢复正常。
检测鉴定：经微生物筛查，无支原体、细菌、真菌及常见病毒污染，符合实验细胞质量标准。免疫细胞化学检测显示 ER、PR 强阳性，HER2 阴性，符合 luminal A 型乳腺癌表型。基因测序证实 PIK3CA 基因突变，该突变与约 40% 的 ER 阳性乳腺癌患者一致，而 TP53 为野生型。染色体核型分析呈现亚三倍体核型，存在 1 号染色体长臂扩增、8 号染色体三体等异常，与 50% 的乳腺导管癌患者遗传学改变吻合。功能验证中，他mo昔芬处理后细胞周期 G1 期阻滞率达 60%，证实其激素治疗敏感性。
应用领域：在激素机制研究中，该细胞系被广泛用于探索雌激素通过 ER 调控下游靶基因（如 Cyclin D1、c-Myc）的分子机制，为理解 “雌激素 - ER - 靶基因" 通路在乳腺癌增殖中的作用提供了实验依据。在内分泌治疗研究中，常用于评估抗雌激素药物的疗效及耐药机制，研究发现长期用他mo昔芬处理可诱导细胞产生耐药，耐药细胞中 ER 共激活因子 SRC-1 表达上调 2 倍。在药物研发方面，作为筛选新型 ER 拮抗剂的模型，近期研究发现一种新型 ER 降解剂可使 T47D 细胞 ER 蛋白水平下降 80%，抑制率显著高于他mo昔芬。此外，该细胞系可用于研究激素与其他信号通路的交叉调控，与 PI3K 抑制剂联合使用时，对细胞增殖的抑制率从单独用药的 40% 提升至 70%，为联合治疗提供了实验基础。
与其他乳腺癌细胞系相比，T47D 的优势在于其完整的激素受体信号通路及对内分泌治疗的敏感性，能更真实地模拟激素依赖性乳腺导管癌的生物学特性，为该类型乳腺癌的发病机制研究及内分泌治疗策略开发提供了不可替代的实验工具，持续推动乳腺导管癌精准诊疗的发展。
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