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首页-产品系统-细胞-细胞系-BY-1324BHK-21 CIAPIN1+叙利亚仓鼠肾细胞系

BHK-21 CIAPIN1+叙利亚仓鼠肾细胞系
产品型号:BY-1324
简要描述:

BHK-21 CIAPIN1+叙利亚仓鼠肾细胞系,上皮样,贴壁生长,高表达 CIAPIN1,可用于该基因功能研究、肿瘤相关通路探究及药物筛选。

  • 厂家实力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

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  • 质量保障

    Quality Assurance

详细介绍

BHK-21 CIAPIN1+叙利亚仓鼠肾细胞系
BHK-21 CIAPIN1+叙利亚仓鼠肾细胞系是经基因工程改造的 BHK-21 衍生株,通过导入 CIAPIN1 基因获得,能稳定高表达细胞因子诱导的凋亡抑制因子 1(CIAPIN1),因蛋白表达可控性强、功能特异性高,成为肿瘤学与细胞存活机制研究的特色模型。其在保留 BHK-21 细胞易培养、增殖快的优势基础上,赋予了靶向研究 CIAPIN1 功能的能力,为解析该基因在细胞凋亡、肿瘤发生中的作用提供了精准工具。
一、细胞构建与基本特性
  • 构建背景:CIAPIN1 是调控细胞存活与应激响应的关键因子,该细胞系通过慢病毒载体介导将人 CIAPIN1 基因导入 BHK-21 细胞(叙利亚仓鼠肾上皮细胞),经嘌呤霉素抗性筛选及单克隆纯化获得高表达株,“CIAPIN1+" 代表稳定过表达该基因的细胞群体,确保蛋白表达的均一性与稳定性。

  • 形态与增殖:体外培养呈典型上皮样形态,贴壁生长,细胞呈多边形或短梭形,排列紧密,形态与亲本 BHK-21 细胞一致。在 37℃、5% CO₂条件下,传代周期约 18-24 小时,增殖速度快于普通 BHK-21 细胞,可适应含 10% 胎牛血清的 MEM 培养基,兼容贴壁与悬浮培养,高密度培养(细胞密度达 2×10⁶个 /mL)时仍能维持活性,适合大规模功能实验。

  • 表达特征:CIAPIN1 主要定位于细胞质,表达量是亲本细胞的 5-8 倍(通过 Western blot 定量),长期传代(>30 代)后表达量波动<12%。蛋白分子量约 34kDa,与天然 CIAPIN1 的分子量一致,且能与特异性抗体结合,功能上保留其抗凋亡活性 —— 经凋亡诱导剂处理后,细胞存活率比亲本 BHK-21 高 40%-50%。

二、核心应用领域
  1. CIAPIN1 功能机制研究

该细胞系是解析 CIAPIN1 调控网络的理想模型。CIAPIN1 通过激活 Akt/mTOR 通路抑制凋亡,同时参与线粒体功能维持,利用该细胞系可探究其与下游分子的相互作用。例如,通过免疫共沉淀实验筛选 CIAPIN1 的结合蛋白,或通过 RNA 干扰敲低 CIAPIN1 后检测通路活性变化,阐明其在细胞存活中的分子机制。在应激响应研究中,其可模拟 CIAPIN1 高表达状态下细胞对缺氧、营养缺乏的适应能力,为理解肿瘤微环境中的细胞存活策略提供线索。
  1. 肿瘤耐药机制与药物筛选

在抗肿瘤药物研发中,该细胞系可用于筛选能逆转 CIAPIN1 介导耐药的化合物。CIAPIN1 高表达与多种肿瘤(如肝癌、胃癌)的治疗耐药相关,通过比较该细胞系与亲本细胞对治疗药物的敏感性差异,可鉴定针对 CIAPIN1 的抑制剂。例如,利用高通量筛选平台检测化合物对 CIAPIN1 + 细胞凋亡率的提升效果,已发现部分天然产物能下调 CIAPIN1 表达并增强治疗效果。
  1. 病毒复制与宿主相互作用研究

因 BHK-21 细胞是病毒培养的经典模型,CIAPIN1 + 亚株可用于探究该基因对病毒复制的影响。CIAPIN1 被报道参与病毒感染后的宿主应答,通过比较病毒(如口蹄疫病毒、疱疹病毒)在该细胞系与亲本细胞中的复制效率,可分析 CIAPIN1 在病毒生命周期中的作用,为开发抗病毒策略提供依据,尤其适用于研究依赖宿主存活机制的病毒。
三、优势与局限性
  • 优势:CIAPIN1 表达稳定,避免瞬时转染的表达波动;功能特异性高,仅强化 CIAPIN1 相关通路,减少其他基因干扰;增殖速度快,实验周期短,适合大规模筛选;保留 BHK-21 细胞的病毒敏感性,可同时研究基因功能与病毒相互作用,应用场景多元。

  • 局限性:长期培养需维持嘌呤霉素筛选压力(2μg/mL),否则易丢失表达载体;CIAPIN1 过表达可能轻微改变细胞代谢(如葡萄糖摄取增加),实验设计中需设置亲本细胞对照;作为仓鼠细胞系,其信号通路与人类细胞存在差异,结果外推至人体时需结合人源细胞验证。

四、培养与实验注意事项
  • 培养条件:基础培养基为含 10% 胎牛血清、2μg/mL 嘌呤霉素的 MEM,添加抗菌剂防污染。传代时采用细胞刮分离,贴壁培养融合度控制在 70%-80%,避免过度密集导致接触抑制。进行凋亡实验时,建议使用无血清培养基同步化细胞 24 小时,以减少血清成分对结果的干扰。

  • 功能检测方法:验证 CIAPIN1 活性可采用流式细胞术检测凋亡率(Annexin V/PI 双染),或 Western blot 检测下游抗凋亡蛋白(如 Bcl-2)的表达变化;研究通路激活时,推荐检测磷酸化 Akt(p-Akt)的水平,以量化 CIAPIN1 的功能活性。

  • 冻存与复苏:冻存液含 10% DMSO、2μg/mL 嘌呤霉素的wan全培养基,液氮保存可维持活性 3 年以上;复苏时 37℃快速解冻,离心去除 DMSO 后用含筛选压力的培养基重悬,传代 1 次后即可用于实验,确保细胞状态稳定。

五、研究意义

该细胞系的建立为 CIAPIN1 功能研究提供了标准化工具,推动了对细胞存活调控机制的理解。在基础研究领域,其助力阐明了 CIAPIN1 在凋亡抑制、应激响应中的作用,为解析肿瘤细胞的存活优势提供了分子依据;在应用领域,其为筛选 CIAPIN1 抑制剂与逆转耐药药物提供了可靠模型,加速了抗肿瘤药物的研发进程。随着基因编辑技术的融合(如构建 CIAPIN1 敲除对照株),该细胞系的研究价值将进一步提升,为肿瘤精准治疗靶点的验证提供更全面的实验支持。

以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。

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