MARC145/Gal-8猴胎肾细胞系，MARC145/Gal-8 为表达 Gal-8 的猴胎肾细胞系，上皮样，贴壁生长，对猪繁殖与呼吸综合征病毒敏感，支持高效复制，适用于病毒研究及抗病du药物筛选。

Gal-8 表达与定位：Gal-8 在细胞内呈胞质与细胞膜共定位，表达量较亲本 MARC145 细胞高 10-15 倍（qPCR 与 ELISA 检测），且持续分泌至细胞外（培养液中浓度达 50ng/mL），通过自分泌与旁分泌方式增强病毒感染。

病毒敏感性：对 PRRSV 的感染效率达 95% 以上（流式细胞术检测病毒 N 蛋白），感染后 24 小时即可检测到病毒复制，48 小时病毒滴度达 10⁷ TCID₅₀/mL，较 MARC145 细胞高 1-2 个数量级；对 PRRSV 的欧洲型与美洲型毒株均具有广谱敏感性，检出率均＞90%。

其他病毒兼容性：保留对脊髓灰质炎病毒、轮状病毒的敏感性，感染效率与 MA104 细胞相当，可作为多病毒研究的通用模型。

病毒入侵机制研究：利用 MARC145/Gal-8 的 Gal-8 过表达特性，揭示其通过桥接 PRRSV 包膜 GP5 蛋白与宿主细胞表面硫酸乙酰肝素（HS），促进病毒吸附的分子机制。通过 CRISPR-Cas9 敲除 Gal-8 后，病毒入侵率下降 70%，证实其为 PRRSV 感染的关键辅助因子。

病毒变异与适应性研究：该细胞系可支持 PRRSV 的连续传代，加速病毒在体外的适应性进化，通过传代实验已鉴定出 3 个与病毒毒力增强相关的氨基酸突变（位于 GP2 与 N 蛋白），为 PRRSV 变异规律研究提供实验依据。

减毒疫苗株筛选：因病毒复制效率高，可快速评估 PRRSV 减毒株的复制能力与免疫原性。例如，在该细胞系中筛选的 PRRSV TS 株（温度敏感株），在 39℃时复制能力下降 100 倍，动物实验显示其安全性与免疫保护率均优于传统毒株，为减毒活疫苗开发提供候选株。

亚单位疫苗抗原生产：通过感染重组 PRRSV（表达 GP5 蛋白），可高效生产病毒包膜蛋白，纯度达 90% 以上，免疫小鼠后中和抗体效价达 1:800，为亚单位疫苗研发提供低成本抗原来源。

高通量药物筛选：基于其高病毒产量与稳定感染特性，建立 96 孔板药物筛选模型，日均可检测 500 种化合物。例如，筛选出的 Gal-8 抑制剂（如天然黄酮类化合物）可使 PRRSV 感染率下降 80%，EC₅₀=1.2μM，且对细胞毒性低（CC₅₀＞50μM），为靶向宿主因子的抗病du药物研发提供先导化合物。

药物作用机制验证：通过对比药物在 MARC145 与 MARC145/Gal-8 细胞中的活性差异，可区分其作用靶点（病毒自身成分或宿主 Gal-8 通路），例如，利ba韦林在两种细胞中活性相似，证实其直接抑制病毒复制，而 Gal-8 抗体仅在改造细胞中有效，表明其靶向宿主因子。

培养基：DMEM 高糖培养基添加 10% 胎牛血清，pH 维持在 7.2-7.4，可加入 1mM 丙酮酸钠增强细胞代谢活性。

传代流程：当细胞融合度达 80%-90% 时，弃旧培养基，PBS 洗涤 2 次，加入细胞解离液，37℃孵育 2-3 分钟至细胞脱落，加入含血清的培养基终止消化，按 1:4 比例接种至新培养瓶，避免过度融合导致 Gal-8 表达下调。

冻存保护：取对数生长期细胞，用含 10% DMSO 的wan全培养基重悬至密度 6×10⁵个 /mL，程序降温后液氮保存，复苏后传代 2 次，待 Gal-8 表达稳定后用于实验。

PRRSV 接种：细胞以 1×10⁵个 / 孔接种 24 孔板，培养 24 小时至融合度 70%，用无血清培养基稀释病毒（MOI=0.1），37℃吸附 1 小时，换含 2% 血清的维持液，48 小时后通过 qPCR 检测病毒 RNA 或 ELISA 检测 N 蛋白，计算病毒滴度。

药物筛选操作：在病毒感染前 1 小时加入待筛药物，感染后继续培养 48 小时，通过 CCK-8 检测细胞活力（排除毒性），同时检测病毒产量，计算药物对病毒的抑制率与选择指数（SI=CC₅₀/EC₅₀）。

优势：

局限性：