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来源与形态:BHK-21 细胞最初分离自 1 日龄叙利亚仓鼠的肾成纤维细胞,体外培养时呈成纤维样形态,贴壁生长,细胞呈长梭形或星形,排列疏松,具有良好的延展性。在 37℃、5% CO₂的培养条件下,增殖速度快,传代周期约 1-2 天,可稳定传代超过百代仍保持活性。
遗传特征:该细胞系为永生细胞系,核型呈非整倍体,染色体数目约 44-46 条,核型稳定且无内源性病毒污染。其基因组对外源基因的容纳能力强,转染后可高效表达目标产物,同时对多种营养缺陷型筛选标记敏感,便于重组细胞株的筛选与纯化。
病毒培养与疫苗生产
基因表达与重组蛋白研究
病毒学基础研究
优势:培养条件简单(可适应含血清或无血清培养基)、病毒敏感性高(能支持多种病毒的完整复制周期)、增殖速度快且可悬浮培养,适合大规模工业化生产;此外,细胞状态稳定,实验重复性好,被世界卫生组织(WHO)推荐为疫苗生产的标准细胞系之一。
局限性:作为动物细胞,其对部分人类病毒(如肝炎病毒)的敏感性较低,应用范围存在一定限制;长期传代可能导致细胞形态变异或病毒敏感性下降,需通过定期冻存原始细胞株来维持稳定性。
培养条件:常规使用含 10% 胎牛血清的 MEM 或 DMEM 培养基,添加青mei素 - 链mei素预防污染。若用于大规模病毒培养,可采用悬浮培养体系(如旋转瓶或生物反应器),配合无血清培养基提高生产效率。培养过程中需控制细胞密度(建议不超过 80% 融合度),避免过度密集导致细胞形态改变。
污染防控:贴壁细胞易受细菌、支原体污染,需定期通过革兰氏染色或 PCR 检测污染情况;冻存时需加入 10% DMSO,在液氮中长期保存,复苏时 37℃水浴快速解冻,离心去除 DMSO 以减少细胞损伤。
BHK-21 细胞系的应用贯穿基础研究与产业应用:在科研领域,它助力解析病毒的生命周期与致病机制;在工业领域,它支撑了疫苗的规模化生产,为传染病防控提供了关键保障。随着基因编辑技术的应用(如优化细胞对特定病毒的敏感性),其在抗病du药物研发、新型疫苗开发等领域的价值将进一步提升,持续为生物医学发展提供助力。
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