SEP-L2小耳猪肺细胞系，上皮样贴壁生长，高表达肺损伤修复因子，对呼吸道病毒敏感，适用于肺损伤机制研究、抗病du药物筛选及肺功能相关实验。

肺特异性标志物与修复因子：高表达肺部特异性标志物，如表面活性蛋白 A（SP-A，阳性率 97%）、 Clara 细胞分泌蛋白（CCSP，阳性率 96%），其 SP-A 在损伤后表达量可提升 4 倍（SEP-K1 无此特性）；分泌角质细胞生长因子（KGF）和转化生长因子 -β（TGF-β），其中 KGF 含量达 40pg/10⁶细胞 / 天，能促进肺上皮细胞迁移（迁移速率是静止期细胞的 2.3 倍），模拟肺部损伤后的修复启动过程，与小耳猪肺损伤组织的功能一致性达 90%。

屏障功能与代谢特性：具有完整的肺上皮屏障功能，跨上皮电阻（TEER）值达 450Ω・cm²（显著高于 SEP-K1），紧密连接蛋白 occludin 和 claudin-18 表达丰富；能分泌表面活性物质（含量达 12μg/10⁶细胞 / 天），维持肺泡表面张力，其氧气交换相关酶活性与小耳猪肺组织高度吻合，可模拟肺部气体交换的基础代谢过程。

病毒敏感性谱：对呼吸道病毒（如 PRRSV）的感染效率达 98%，感染后 48 小时出现典型细胞病变（细胞融合、空泡化），病毒滴度达 10⁷.⁸ TCID₅₀/mL（是 SEP-K1 细胞的 9 倍）；因高表达 PRRSV 受体 CD163，对肺部靶向病毒的吸附效率显著高于肾细胞系，尤其适合肺相关病毒病研究。

急性肺损伤模型：通过该细胞系发现脂多糖（LPS）可激活 TLR4/MyD88 通路，使炎症因子 TNF-α 表达量提升 5 倍，SP-A 表达下降 60%，与小耳猪急性肺损伤的病理特征一致性达 93%（SEP-K1 模型无法模拟），揭示 “炎症 - 屏障破坏" 的肺部病变轴。

修复信号调控机制：在 KGF 干预实验中，细胞迁移速率提升 70%，凋亡率下降 55%，其下游 ERK 通路磷酸化水平增加 3 倍，证实 KGF 在肺损伤修复中的关键作用，为清肺药物研发提供靶点。

PRRSV 致肺损伤机制：利用其肺部特异性，发现 PRRSV 可抑制 SP-A 功能（下降 50%），导致肺泡表面张力异常，同时诱导炎症小体 NLRP3 激活，使 IL-1β 分泌增加 4 倍，与 PRRSV 感染仔猪的肺间质炎症程度正相关（R²=0.92），研究结果较 SEP-K1 模型更接近在体状态。

抗病du药物筛选：建立基于病毒复制抑制率的高通量模型，某干扰素诱导剂可使 SEP-L2 细胞的 PRRSV 滴度下降 10⁵倍，且对细胞毒性较低（CC₅₀/EC₅₀比值达 25），小耳猪实验显示该药物可降低肺部病毒载量 70%，证实模型的应用价值。

清肺药物活性检测：在 LPS 致肺损伤模型中，某中药提取物可使细胞 SP-A 表达恢复 70%，TEER 值回升至正常水平的 85%，与小耳猪肺功能指标（动脉血氧分压上升 40%）的改善一致性达 90%（SEP-K1 模型仅 58%）。

肺部毒性评价：作为兽药肺毒性筛选的标准细胞系，其对氨基糖苷类抗生素的敏感性与小耳猪在体毒性的相关性达 92%，可在 72 小时内完成药物安全剂量评估，较动物实验成本降低 65%。

培养基：DMEM/F12 培养基添加 10% 胎牛血清、5ng/mL KGF，pH 维持在 7.2-7.4；为增强肺部功能模拟，可添加 10nM 地塞mi松，使 SP-A 表达量提升 30%。

传代流程：当细胞融合度达 70% 时，按 1:3 比例接种（低于 SEP-K1 的 1:4 比例），离心速度 800rpm，24 小时贴壁率超 92%，避免过度融合（＞80% 会导致屏障功能下降）。

冻存保护：采用含 10% DMSO 的wan全培养基，细胞密度 2×10⁶个 /mL，程序降温至 - 80℃过夜后转入液氮，复苏时 37℃水浴 1 分钟，存活率可达 89%，需检测 SP-A 表达确认功能稳定。

肺损伤模型构建：细胞接种 24 孔板，用 1μg/mL LPS 处理 24 小时，检测 IL-8 释放量（较正常组增加 4 倍）和 TEER 值下降幅度，结果变异系数＜7%；SEP-K1 对照组用于对比器官特异性差异。

病毒感染实验：接种 PRRSV（MOI=0.1）后，37℃培养 48 小时，通过 RT-PCR 检测病毒 RNA 拷贝数（可达 10⁹ copies/mL），适合抗病du药物疗效评估。

优势：

局限性：