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详细介绍
来源与建立背景
形态与生长特征
功能特性
皮肤特异性标志物与人类同源性:高表达与人类同源的皮肤标志物,如 Ⅲ 型胶原蛋白(ColⅢ,阳性率 97%)—— 其含量占总胶原的 25%(SSC-S1 为 10%,更接近人类皮肤的 30%),透明质酸分泌量达 12μg/10⁶细胞 / 天(显著高于 SSC-S1 的 8μg),与人类皮肤的保湿能力更接近;同时表达人类皮肤相关 miRNA(如 miR-29a),表达谱与人类皮肤成纤维细胞的一致性达 78%(SSC-S1 为 62%)。
异种相容性特征:低表达猪特异性抗原 α-Gal(阳性率 5%,SSC-S1 为 30%),补体依赖的细胞毒性(CDC)反应率仅 12%(SSC-S1 为 45%),显著降低异种移植的免疫排斥风险;体外与人外周血单核细胞共培养时,促炎因子 TNF-α 分泌量较 SSC-S1 减少 60%,体现更好的免疫相容性。
病毒敏感性谱:对人类皮肤病毒(如单纯疱疹病毒 HSV-1)的感染效率达 85%(SSC-S1 仅 30%),病毒滴度达 10⁶.⁸ TCID₅₀/mL;对猪痘病毒的敏感性稍低于 SSC-S1(滴度 10⁷.₂ TCID₅₀/mL),但对口蹄疫病毒皮肤亚型的敏感性与 SSC-S1 相当,展现跨物种病毒研究价值。
人类皮肤病模型构建
烧伤修复机制研究:利用 SSC-S2 构建的三维皮肤模型,烧伤后 IL-6 分泌量达 280pg/mL(与人类烧伤组织的 295pg/mL 高度接近,SSC-S1 模型为 180pg/mL),且血管内皮生长因子(VEGF)表达模式与人类烧伤修复过程一致性达 82%,为解析人类烧伤愈合机制提供更精准的模型。
特应性皮炎模拟:在尘螨提取物刺激下,该细胞系的丝聚蛋白表达量下降 45%(SSC-S1 下降 25%),Th2 型细胞因子 IL-4 分泌量达 150pg/mL(更接近人类患者的 160pg/mL),成为特应性皮炎药物筛选的优选模型。
皮肤异种移植研究
移植排斥机制解析:通过 SSC-S2 与人类皮肤的异种移植模型,发现 α-Gal 低表达可使移植后 14 天的皮肤存活率提升至 60%(SSC-S1 仅 20%),且 CD4⁺T 细胞浸润减少 50%,为开发异种移植免疫抑制剂提供依据;该模型的排斥反应病理特征与人类临床病例一致性达 80%,远高于其他动物模型。
组织工程皮肤研发:利用 SSC-S2 构建的组织工程皮肤,与人创面的融合率达 75%(SSC-S1 为 45%),且术后 60 天胶原蛋白重塑程度更接近人类正常皮肤(ColⅠ/ColⅢ 比值 1.8 vs 人类 1.7,SSC-S1 为 2.5),已用于重度烧伤患者的临床前试验。
外用药物临床前评价
化妆品安全性检测:在 3D 皮肤模型中,某美白成分对 SSC-S2 的刺激性评分(0.8/5 分)与人类皮肤斑贴试验结果(0.7 分)高度一致,显著优于 SSC-S1 模型(1.5 分),被多家国际化妆品企业列为替代动物实验的shou选模型。
透皮吸收效率研究:某防晒霜的体外透皮速率在 SSC-S2 模型中为 12μg/cm²/h(人类皮肤为 11μg/cm²/h,SSC-S1 模型为 8μg/cm²/h),相关性达 91%,为药物剂型优化提供精准数据。
基础培养方案
培养基:采用 DMEM/F12(1:1)培养基添加 10% 胎牛血清、2ng/mL FGF-2,pH 维持在 7.2-7.4;为增强人类同源性特征,可添加 50μM 抗坏血酸,使 ColⅢ 表达量提升 40%,更接近人类皮肤特性。
传代流程:当细胞融合度达 75% 时,按 1:3 比例接种(低于 SSC-S1 的 1:3-1:4),0.25% yi酶 + 0.02% EDTA 联合消化 2.5 分钟(长于 SSC-S1),离心速度 800rpm,24 小时贴壁率超 88%,避免过度融合(>85% 会导致 α-Gal 表达上升)。
冻存保护:采用含 15% DMSO 的无血清冻存液(降低细胞损伤),细胞密度 2×10⁶个 /mL,程序降温至 - 80℃过夜后转入液氮,复苏存活率可达 85%,需检测 α-Gal 表达确认表型稳定。
异种相关实验操作
3D 皮肤模型构建:将 5×10⁵个 SSC-S2 细胞与胶原支架混合,培养 14 天形成厚度约 500μm 的真皮层,再接种人类角质形成细胞,构建的复合模型与人类皮肤的结构相似度达 85%(SSC-S1 模型为 65%),适合移植实验。
病毒交叉感染实验:接种 HSV-1(MOI=0.1)后,48 小时通过免疫荧光检测 gD 蛋白,阳性率达 85%,需设置 SSC-S1 与人类皮肤细胞对照,明确种属差异。
优势:
人类同源性高:皮肤结构、基因表达及功能特性与人类的一致性显著高于 SSC-S1,是目前最jie近人类皮肤的猪源细胞系,临床前研究结果的转化价值提升 40%。
异种移植优势:低表达免疫排斥相关抗原,免疫相容性优于 SSC-S1,为皮肤异种移植研究提供理想材料,移植存活率提升 2-3 倍。
跨物种研究价值:可同时支持猪源与人类皮肤病毒感染,适合人畜共患皮肤病研究,填bu了传统模型的种属鸿沟。
局限性:
培养成本高:需添加 FGF-2 等生长因子,培养成本是 SSC-S1 的 2 倍,且对培养基成分更敏感,批间差异稍大。
猪源病毒研究敏感性略低:对猪痘病毒的分离率(85%)低于 SSC-S1(96%),不适合猪源皮肤病毒的高效分离。
伦理争议:作为实验动物来源细胞系,其异种移植研究面临一定的伦理审查压力,应用范围受部分法规限制。
以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。
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