Hybrid Liver cell GLH04鼠/人杂交瘤细胞系
Hybrid Liver cell GLH04鼠/人杂交瘤细胞系是肝相关单克隆抗体制备与肝脏疾病研究领域的重要细胞模型，凭借跨物种融合的du特优势、稳定分泌肝特异性抗体及优异的肝组织抗原识别能力，在肝脏疾病诊断、肝靶向药物研发及肝免疫学研究中应用广泛，为肝相关单克隆抗体的获取与功能研究提供了可靠支撑。
来源与背景：该细胞系源于 Wistar 大鼠肝脏相关 B 淋巴细胞与人类骨髓瘤细胞的融合产物，通过改良杂交瘤技术筛选克隆获得。建立过程是将经肝特异性抗原免疫后的大鼠 B 淋巴细胞与永生化人骨髓瘤细胞融合，利用 HAT 培养基结合物种特异性标志物筛选成功融合的杂交瘤细胞，经有限稀释法克隆和抗体肝靶向性检测，得到能稳定分泌针对肝靶抗原的单克隆抗体的细胞株。此跨物种融合过程结合了大鼠对肝抗原的强免疫应答和人类细胞的临床相关性，解决了单一物种杂交瘤在肝抗原识别与临床应用适配性上的局限，为获取高特异性、高临床价值的肝相关抗体提供了创新来源，在肝脏疾病免疫检测体系构建中作用显著。
细胞特性：形态呈跨物种杂交瘤特征，贴壁生长时为上皮样与梭形混合形态，细胞质含丰富肝相关细胞器，细胞核呈椭圆形，核质比约 1:2.2，约 7% 的细胞可见多核结构。核心特性突出：抗体分泌稳定，分泌量达 7-13μg/10⁶细胞 / 24h，连续传代 54 次后，抗体分泌能力仅下降 8%；肝抗原结合特异性强，与肝靶抗原的结合常数（Kd）达 10⁻⁹M 级别，与非肝组织抗原交叉反应率低于 0.7%；增殖能力良好，体外培养倍增时间约 53-59 小时，克隆形成率 38%，腹腔接种 SCID 小鼠后，15-21 天形成腹水，腹水中抗体浓度达 2-6mg/ml。传代采用温和方法，传代比例 1:2-1:3，细胞密度达 65%-70% 时及时传代，过度密集会使抗体分泌量下降 18% 左右。
培养条件：适宜用含 12% 胎牛血清的 DMEM/F12 混合培养基（比例 2:1），添加 1% 双抗及 0.4% 肝组织提取液，培养环境为 37℃、5% CO₂与 4% O₂的微低氧环境。关键要点：培养基适配性重要，此 DMEM 与 F12 比例可提升细胞活力 14%，肝组织提取液维持抗体肝靶向性；血清质量严格，需用超低内毒素胎牛血清（<0.2EU/ml），劣质血清会使细胞跨物种特性丢失 26%，抗体分泌量减少 33%；无血清培养需特定配方，添加肝特异性生长因子复合物可维持细胞生长，且利于抗体人源化修饰；腹水制备规范，SCID 小鼠腹腔预先注射弗氏不wan全佐剂，10 天后接种 1.4×10⁷个细胞，17-23 天收集腹水，每只收获 2-4ml，纯化后保持对人肝组织高亲和力。冻存用含 15% DMSO 与 5% 人血清白蛋白的冻存液，程序降温后液氮保存，复苏后 72 小时贴壁率达 75%，抗体分泌功能恢复 81% 以上。
检测鉴定：经严格检测，无细菌、真菌、支原体及反转录病毒污染，符合跨物种杂交瘤细胞质量标准。抗体亚型为大鼠 IgG2a 型，轻链含人源化修饰特征；通过 ELISA、免疫组化等验证，能特异性结合人肝组织靶抗原，与肝外组织交叉反应率低于 0.6%；染色体核型分析显示，染色体数目 104-114 条，融合大鼠（约 38%）与人类（约 62%）染色体特征，存在物种特异性染色体易位；功能验证中，用于人肝组织切片免疫染色时，精准定位肝靶抗原，阳性信号集中于特定区域，背景干扰低，证实其检测精准性。
应用领域：在肝疾病分子检测中，基于其抗体构建的 ELISA 试剂盒，检测灵敏度达 0.4ng/ml，适用于肝衰竭、肝硬化等疾病的血清标志物分析；在诊断试剂研发中，开发的免疫荧光探针用于肝穿刺组织切片染色，对早期肝损伤诊断符合率达 91%。在肝免疫学研究中，可绘制肝抗原表位图谱，为肝靶向药物设计提供靶点。此外，因含人源成分，在抗体人源化改造中具优势，经基因编辑可使人源化程度达 84% 以上，降低免疫排斥风险，为肝相关单克隆抗体药物研发提供高效平台，推动肝脏疾病精准诊断与治疗发展。
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