PK-15-KO-MAP3K8猪肾上皮细胞系，PK-15-KO-MAP3K8 为 PK15 衍生细胞系，敲除 MAP3K8 基因，上皮样贴壁生长，炎症信号受抑，适用于炎症调控、病毒感染机制及相关药物筛选研究。

炎症信号通路特征：LPS 刺激后，NF-κB 活性较母系下降 60%（p65 核转位率从母系的 70% 降至 28%），促炎细胞因子 IL-6、TNF-α 分泌量分别下降 75% 和 80%；MAPK 通路中 p38 磷酸化水平下降 50%，而 ERK 磷酸化不受影响，证实 MAP3K8 对 NF-κB 和 p38 通路的特异性调控。

先天免疫功能变化：TLR4 表达量与母系相当（阳性率 92%），但 TLR4 介导的炎症反应显著减弱；抗病毒蛋白 IFN-β 的基础表达量不变，但 poly (I:C) 诱导后的表达量下降 40%，揭示 MAP3K8 在先天免疫中的双重作用。

病毒受体保留情况：猪瘟病毒受体 CD46（阳性率 93%）、猪圆环病毒受体硫酸乙酰肝素（阳性率 91%）表达量与母系一致，为病毒感染研究提供稳定背景。

MAP3K8 功能解析：通过该细胞系证实 MAP3K8 是猪肾细胞中 LPS 诱导 IL-6 分泌的关键分子，其缺失可wan全阻断 IL-6 启动子活性；同时发现 MAP3K8 通过与 TAB2 相互作用调控 NF-κB 核转位，为解析猪源细胞的炎症调控网络提供直接证据。

通路交叉对话研究：对比母系细胞发现，MAP3K8 缺失后，LPS 诱导的细胞凋亡率下降 40%（caspase-3 活性降低），证实 MAP3K8 在炎症与凋亡通路交叉调控中的作用，该发现为 sepsis 相关肾损伤机制提供新视角。

炎症依赖型病毒复制分析：猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）在该细胞系中复制效率下降 50%（病毒滴度从母系的 10⁷.⁵ TCID₅₀/mL 降至 10⁶.⁸ TCID₅₀/mL），且 NS2 蛋白诱导的 IL-8 分泌wan全消失，证实 PRRSV 复制依赖 MAP3K8 介导的炎症微环境。

病毒免疫逃逸机制解析：猪瘟病毒在该细胞系中复制效率提升 30%（病毒滴度达 10⁸.² TCID₅₀/mL），其 N 蛋白与 MAP3K8 的相互作用被阻断，导致 IFN-β 抑制效果减弱，揭示病毒利用宿主炎症分子逃逸免疫的新机制。

抗炎药物靶点验证：基于该细胞系发现某天然产物可特异性抑制 MAP3K8 活性，其在母系细胞中降低 IL-6 分泌的效果与基因敲除一致（下降 70%），而对该细胞系无额外作用，确证其靶向性。

抗病du药物研发：筛选出的 MAP3K8 激动剂可使 PRRSV 在该细胞系中的复制效率恢复至母系的 80%，同时增强 IFN-β 表达，为开发 “抗炎 - 抗病毒" 双重功能药物提供策略。

培养基：采用含 10% 胎牛血清的 MEM 培养基，pH 维持在 7.2-7.4；无需特殊添加物，与母系培养条件一致，便于平行实验。

传代流程：当细胞融合度达 80% 时，按 1:4 比例接种，离心速度 1000rpm，24 小时贴壁率超 95%，培养条件与母系无差异，操作简便。

冻存保护：采用含 10% DMSO 的wan全培养基，细胞密度 2×10⁶个 /mL，复苏存活率达 90%，需与母系同时冻存以保证实验对照一致性。

炎症反应检测：LPS（1μg/mL）刺激 6 小时后，ELISA 检测 IL-6 分泌量（母系约 500pg/mL，该细胞系约 125pg/mL），或通过 Western blot 分析 p65 核转位，结果变异系数＜8%。

病毒感染实验：接种 PRRSV（MOI=0.1）后 72 小时，TCID₅₀法检测病毒滴度，需设置母系对照以明确 MAP3K8 依赖程度。

优势：

局限性：