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首页-产品系统-细胞-细胞系-BY-0541Vero非洲绿猴肾细胞系

Vero非洲绿猴肾细胞系
产品型号:BY-0541
简要描述:

Vero非洲绿猴肾细胞系,上皮样,贴壁生长,无内源性病毒,对多种病毒敏感,适用于疫苗生产、病毒分离及药物安全性评价,是生物制药重要细胞系。

  • 厂家实力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 质量保障

    Quality Assurance

详细介绍

Vero非洲绿猴肾细胞系
Vero非洲绿猴肾细胞系,Vero 细胞系是从非洲绿猴肾脏皮质细胞分离建立的连续传代细胞系,因具有无内源性病毒污染、对多种病毒高度敏感且能大规模培养等特性,成为生物制药领域的重要细胞系。其与灵长类肾脏细胞的生物学特征高度相似,且经长期验证保持稳定的病毒支持能力,为疫苗生产、病毒学研究及药物安全性评价提供了兼具安全性与可靠性的实验平台,尤其在灭活疫苗与减毒活疫苗生产中占据重要地位。
一、细胞起源与生物学特性
  1. 来源与建立背景

Vero 细胞系源自 1962 年日本千叶大学从正常成年非洲绿猴肾脏分离的原代细胞,经连续传代获得永生化表型(“Vero" 源自日语 “verde",意为 “绿色",指代非洲绿猴)。该细胞系因未经过病毒转化,保留了正常肾上皮细胞的功能特征,1987 年被 WHO 批准用于人用疫苗生产,解决了原代细胞传代受限、批次差异大的问题,成为较早实现疫苗产业化的灵长类细胞系。
  1. 形态与生长特征

细胞呈典型上皮样形态,贴壁生长时呈多边形,排列紧密且有极性,胞质均匀,细胞核呈椭圆形(核质比约 1:3),核仁不明显。在 37℃、5% CO₂条件下,使用含 10% 胎牛血清的 MEM 培养基,倍增时间约 48-52 小时,传代比例 1:2 至 1:4,每周换液 2-3 次以维持细胞融合度在 70%-80%。细胞冻存复苏存活率超 85%,连续传代 300 次后仍保持稳定核型(60 条染色体),无致瘤性(裸鼠接种无肿瘤形成),符合生物制品用细胞系安全标准。
  1. 功能特性

  • 病毒敏感性谱:对 100 余种病毒具有高度敏感性,尤其对黄病毒科(登革热、乙脑病毒)、副黏病毒科(麻疹、腮腺炎病毒)的感染效率达 95% 以上,48-72 小时出现典型细胞病变;对脊髓灰质炎病毒、狂犬病病毒的支持能力被 WHO 列为国际标准,病毒滴度可达 10⁷-10⁹ TCID₅₀/mL,显著高于原代细胞。

  • 无内源性病毒:经全面筛查未发现逆转录病毒等内源性病毒序列,且不表达 SV40 大 T 抗原等转化蛋白,生物安全性远高于病毒转化细胞系,为疫苗生产提供安全保障。

  • 代谢与分泌功能:具有活跃的葡萄糖转运与氨基酸代谢能力,在无血清培养基中可维持 5 代以上生长,分泌的细胞外基质成分(如层粘连蛋白)可促进自身贴壁与病毒吸附,提升病毒感染效率。

二、核心应用领域
  1. 人用疫苗规模化生产

  • 灭活疫苗生产:作为脊髓灰质炎灭活疫苗(IPV)、狂犬病疫苗的主力生产细胞系,Vero 细胞在生物反应器中可实现高密度培养(细胞密度达 5×10⁶个 /mL),IPV 单批次病毒产量达 10¹⁰ TCID₅₀,较原代猴肾细胞提升 20 倍,且疫苗纯度更高(宿主蛋白残留<50ng / 剂),全球多数 IPV 由 Vero 细胞生产。

  • 减毒活疫苗研发:在乙脑减毒活疫苗生产中,Vero 细胞的病毒滴度达 10⁸ PFU/mL,疫苗接种后中和抗体阳转率超 95%,且无传统鸡胚培养的过敏原问题,已被 100 余个国家纳入免疫规划。

  1. 病毒学研究与诊断试剂开发

  • 病毒分离与鉴定:作为临床病毒诊断的重要细胞系,Vero 细胞可从咽shi子、脑脊液等样本中分离流感病毒、腺病毒等,分离率较 MDCK 细胞高 15%-20%,且能保持病毒的原始生物学特性,为病毒变异监测提供关键样本。

  • 诊断试剂盒生产:利用其高效表达病毒抗原的特性,制备病毒抗体检测试剂,如登革热病毒 NS1 抗原检测试剂盒,灵敏度达 90%,特异性 95%,较昆虫细胞表达系统成本降低 40%。

  1. 药物安全性评价

  • 细胞病变效应(CPE)检测:用于评估药物的体外毒性,通过检测药物对 Vero 细胞的 IC₅₀值预测体内毒性,与动物实验结果一致性达 80%,如某抗病du药物的 Vero 细胞 IC₅₀与小鼠 LD₅₀呈显著正相关(R²=0.85)。

  • 疫苗安全性验证:作为疫苗批签发的标准细胞系,检测疫苗中的残余病毒与毒性物质,确保每批次疫苗的 CPE 阴性率达 100%,为疫苗上市前的最后一道安全防线。

三、培养与实验操作要点
  1. 基础培养方案

  • 培养基:MEM 培养基添加 10% 胎牛血清、1% 非必需氨基酸,pH 维持在 7.2-7.4;大规模生产时可采用无血清培养基(含重组胰岛素、转铁蛋白),减少血清带来的批次差异。

  • 传代流程:当细胞融合度达 80% 时,消化处理后按 1:3 比例接种,离心速度 800rpm(避免细胞损伤),24 小时贴壁率超 90%,避免过度融合(>90% 会降低病毒敏感性)。

  • 冻存保护:采用含 10% DMSO 的wan全培养基,细胞密度 1×10⁶个 /mL,程序降温速率 - 1℃/ 分钟,液氮保存后复苏存活率可达 85%,建议每 10 代冻存一次以保持细胞活力。

  1. 病毒培养与检测操作

  • 病毒接种优化:细胞以 2×10⁵个 / 孔接种 24 孔板,培养 24 小时后换无血清培养基,加入病毒液(MOI=0.1),37℃吸附 2 小时后换维持液(含 2% 血清),每日观察 CPE,48 小时后通过 TCID₅₀法测定滴度,结果变异系数<8%。

  • 大规模培养技巧:在微载体培养系统中,搅拌速度控制在 40-60rpm,溶氧维持在 50%-60%,pH 7.3,可显著提升细胞密度与病毒产量,如狂犬病病毒在该系统中的产量较静态培养提升 5 倍。

四、优势与局限性
  • 优势

  1. 生物安全性卓yue:无内源性病毒与致瘤性,是被 WHO 批准用于全年龄段疫苗生产的灵长类细胞系,安全性经过长期临床验证。

  1. 病毒敏感性广谱:对多种人类病毒的支持能力突出,尤其适合未知病毒的分离与鉴定,为新发传染病防控提供关键工具。

  1. 产业化成熟:适应大规模悬浮培养,已建立标准化生产工艺,全球年产能可满足 10 亿人份疫苗需求,成本低于人类二倍体细胞系。

  • 局限性

  1. 增殖速率较慢:倍增时间较长,大规模培养周期长,增加生产成本。

  1. 转染效率低:转染效率仅 10%-20%,不适合基因功能研究,需依赖病毒载体进行外源基因导入。

  1. 物种特异性差异:与人类细胞的糖基化模式存在一定差异,可能影响部分病毒样颗粒的免疫原性。

五、研究意义与展望

Vero 细胞系的建立彻di改变了疫苗生产格局,其在脊髓灰质炎、狂犬病等疫苗中的应用,直接推动了全球传染病防控的进程,仅 IPV 就使全球脊灰病例减少 99%。未来,通过基因编辑技术优化其病毒受体表达(如增加 ACE2 受体),可提升对冠状病毒的敏感性;结合连续灌流培养技术,有望将病毒生产周期缩短 30%,为新发传染病疫苗的快速研发提供更强大的平台。作为生物制药领域的重要细胞系,Vero 细胞系仍将在疫苗研发与公共卫生安全中发挥核心作用。

以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。

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